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基因Ⅶ型NDV强毒株反向遗传系统的建立及其应用研究

摘要第1-4页
Abstract第4-11页
中英文对照表第11-13页
第一章 绪论第13-27页
   ·新城疫病毒的概述第13页
   ·新城疫病毒的分类和理化特性第13-14页
   ·新城疫病毒基因组的结构第14-15页
   ·NDV编码的蛋白及其功能第15-18页
   ·新城疫病毒的复制与致病性第18-20页
   ·新城疫病毒的分子流行病学第20-21页
   ·新城疫病毒疫苗学的概况第21-22页
   ·新城疫病病毒的反向遗传学及其应用第22-25页
   ·本研究的目的和意义第25-27页
第二章 NDV SG10株反向遗传系统的建立第27-46页
   ·引言第27-28页
   ·材料和方法第28-37页
     ·病毒和细胞第28页
     ·质粒和菌株第28页
     ·SPF鸡胚和SPF鸡第28页
     ·主要试剂和仪器第28-29页
     ·病毒的纯化第29页
     ·病毒序列的测定第29-31页
     ·辅助质粒和微基因组的构建第31-33页
     ·辅助质粒和微基因组的功能鉴定第33页
     ·全长cDNA克隆质粒的构建第33-35页
     ·病毒的拯救第35-36页
     ·拯救病毒的鉴定第36页
     ·拯救病毒的致病性分析第36页
     ·拯救病毒的生长特性分析第36-37页
   ·结果第37-44页
     ·NDV SG10株序列的测定和分析第37-40页
     ·辅助质粒和微基因组的功能鉴定第40-41页
     ·全长cDNA克隆质粒的构建第41-42页
     ·NDV SG10株的拯救与鉴定第42-43页
     ·拯救病毒生物学特性的测定第43页
     ·拯救病毒的生长特性的分析第43-44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-46页
第三章 应用反向遗传系统对NDV SG10株进行改造第46-63页
   ·引言第46页
   ·材料和方法第46-52页
     ·病毒、质粒和细胞第46-47页
     ·构建SG10株NP基因5’端缺失6bp的突变株第47-48页
     ·突变株rSG10-6bp的生物学特性分析第48页
     ·构建SG10株F蛋白裂解位点突变的病毒株第48-49页
     ·突变株aSG10生物学特性分析第49-50页
     ·表达绿色荧光蛋白的重组NDV的构建第50-51页
     ·突变株aSG10-EGFP生物学特性分析第51页
     ·表达IBV S1蛋白重组NDV的构建第51-52页
     ·突变株aSG10-S1生物学特性分析第52页
   ·结果第52-60页
     ·SG10株NP基因5’端缺失6bp的突变株的构建第52-53页
     ·突变株rSG10-6bp生物学特性分析第53-54页
     ·拯救病毒的生长特性的测定第54页
     ·构建SG10株F蛋白裂解位点突变的病毒株第54-55页
     ·突变株aSG10生物学特性分析第55-56页
     ·拯救病毒的生长特性的测定第56页
     ·表达绿色荧光蛋白重组NDV的构建第56-57页
     ·突变株aSG10-EGFP生物学特性分析第57-58页
     ·拯救病毒的生长特性的测定第58页
     ·表达IBV S1蛋白重组NDV的构建第58-59页
     ·突变株aSG10-S1生物学特性分析第59-60页
     ·拯救病毒的生长特性的测定第60页
   ·讨论第60-61页
   ·小结第61-63页
第四章 重组病毒aSG10株的免疫原性评价第63-76页
   ·引言第63页
   ·材料和方法第63-65页
     ·病毒、质粒和细胞第63-64页
     ·致弱株aSG10的安全性和免疫原性鉴定第64-65页
     ·致弱株SG10的攻毒保护试验第65页
   ·结果第65-74页
     ·安全性检测第65-70页
     ·攻毒保护试验第70-74页
   ·讨论第74-75页
   ·小结第75-76页
第五章 结论第76-77页
第六章 创新点第77-78页
参考文献第78-85页
附录第85-95页
致谢第95-97页
作者简介第97页

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