| 中文摘要 | 第1-18页 |
| ABSTRACT | 第18-22页 |
| 符号说明 | 第22-24页 |
| 第一章 绪论 | 第24-38页 |
| ·糖的种类与生物合成 | 第24-25页 |
| ·糖的种类 | 第24-25页 |
| ·酰氨基己糖 | 第25页 |
| ·寡糖的合成与制备 | 第25-28页 |
| ·寡糖的化学法合成 | 第25-26页 |
| ·寡糖的酶法合成 | 第26-28页 |
| ·糖核苷酸及其合成 | 第28-33页 |
| ·糖核苷酸的种类与功能 | 第28-29页 |
| ·糖核苷酸的生物合成途径 | 第29-31页 |
| ·糖核苷酸的体外制备 | 第31-33页 |
| ·糖核苷酸的化学法合成 | 第31页 |
| ·糖核苷酸的酶法合成 | 第31-33页 |
| ·糖胺聚糖及其合成 | 第33-37页 |
| ·糖胺聚糖的种类和功能 | 第33-34页 |
| ·透明质酸的制备 | 第34-35页 |
| ·透明质酸合酶 | 第35-37页 |
| ·论文大纲 | 第37-38页 |
| 第二章 人源UDP-N-乙酰氨基半乳糖焦磷酸化酶在氨基糖糖核苷酸合成中的应用 | 第38-54页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·菌株 | 第39页 |
| ·酶、试剂与耗材 | 第39页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第39-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·人源UDP-N-乙酰氨基半乳糖焦磷酸化酶(AGX1)的表达与纯化 | 第40-41页 |
| ·AGX1活性检测 | 第41页 |
| ·AGX1酶活的毛细管电泳及质谱检测 | 第41页 |
| ·AGX1催化反应的最适条件摸索 | 第41-42页 |
| ·AGX1蛋白对不同核苷三磷酸底物适应性研究 | 第42页 |
| ·AGX1蛋白对不同糖-1-磷酸和NTP双底物利用广泛性研究. | 第42页 |
| ·AGX1蛋白对不同核苷三磷酸底物的动力学研究 | 第42-43页 |
| ·dUDP-GalNAc和dTDP-GalNAc的小规模制备 | 第43页 |
| ·dUDP-GalNAc和dTDP-GalNAc的纯化 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-52页 |
| ·蛋白表达与纯化 | 第43-44页 |
| ·AGX1蛋白活性检测 | 第44-45页 |
| ·AGX1蛋白催化反应的最适条件摸索 | 第45-46页 |
| ·AGX1蛋白对不同核苷三磷酸底物适应性研究 | 第46-49页 |
| ·AGX1蛋白对不同糖-1-磷酸和NTP双底物利用广泛性研究. | 第49-50页 |
| ·AGX1蛋白对不同核苷三磷酸底物的动力学研究 | 第50-51页 |
| ·dUDP-GalNAc及dTDP-GalNAc的小规模制备 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-54页 |
| 第三章 空肠弯曲菌来源的UDP-GlcNAc焦磷酸化酶(CjGlmU)在稀有糖核苷酸合成中的应用 | 第54-71页 |
| ·引言 | 第54-55页 |
| ·实验材料 | 第55-56页 |
| ·菌株和载体 | 第55页 |
| ·引物 | 第55页 |
| ·酶、试剂与耗材 | 第55-56页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-59页 |
| ·空肠弯曲菌来源的cjglmU的克隆 | 第56-58页 |
| ·CjGlmU的表达与纯化 | 第58页 |
| ·CjGlmU的酶活检测 | 第58页 |
| ·CjGlmU酶活的毛细管电泳及质谱检测 | 第58页 |
| ·CjGlmU蛋白对金属离子依赖性研究 | 第58页 |
| ·CjGlmU蛋白对不同核苷三磷酸底物适应性研究 | 第58-59页 |
| ·CjGlmU蛋白对不同核苷三磷酸和糖-1-磷酸的双底物利用广泛性研究 | 第59页 |
| ·CDP-GlcNAc、UDP-GlcNBu、UDP-GlcNPr的体外毫克级酶法制备 | 第59页 |
| ·CDP-GlcNAc、UDP-GlcNBu、UDP-GlcNPr的纯化 | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-69页 |
| ·空肠弯曲菌来源的cjglmU基因的克隆 | 第59页 |
| ·CjGlmU的表达与纯化(序列比对) | 第59-60页 |
| ·CjGlmU的酶活检测 | 第60-62页 |
| ·CjGlmU对金属离子依赖性研究 | 第62页 |
| ·CjGlmU对不同核苷三磷酸底物适应性研究 | 第62-65页 |
| ·CjGlmU蛋白对不同糖-1-磷酸和核苷三磷酸的双底物适应性研究 | 第65-68页 |
| ·CjGlmU与EcGlmU活性比较 | 第68-69页 |
| ·CDP-GlcNAc、UDP-GlcNBu及UDP-GlcNPr的小规模制备 | 第69页 |
| ·本章小节 | 第69-71页 |
| 第四章 幽门螺杆菌和肺炎链球菌来源的β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶的底物特异性研究 | 第71-91页 |
| ·引言 | 第71-73页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·材料与菌种 | 第73页 |
| ·引物 | 第73页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第73-74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·实验方法 | 第74-78页 |
| ·幽门螺杆菌β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶(hplgta)的克隆 | 第74-75页 |
| ·幽门螺杆菌及肺炎链球菌β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶(HpLgtA/NmLgtA)的表达与纯化 | 第75-76页 |
| ·β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶(LgtA)的酶活检测 | 第76页 |
| ·HpLgtA合成反应的条件优化 | 第76-77页 |
| ·HpLgtA催化反应的毛细管电泳检测 | 第77页 |
| ·HpLgtA及NmLgtA对不同糖核苷酸的底物适应性的研究 | 第77页 |
| ·HpLgtA及NmLgtA对UDP-GlcNAc及其结构类似物的酶反应动力学研究 | 第77-78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-89页 |
| ·幽门螺杆菌β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶(hplgta)的克隆 | 第78页 |
| ·β-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶的序列比对 | 第78页 |
| ·HpLgtA和NmLgtA的表达与纯化 | 第78-79页 |
| ·HpLgtA和NmLgtA的酶活分析 | 第79-81页 |
| ·HpLgtA催化反应的毛细管电泳检测 | 第81页 |
| ·HpLgtA合成反应的条件优化 | 第81-82页 |
| ·HpLgtA和NmLgtA的底物适应性研究 | 第82-87页 |
| ·HpLgtA和NmLgtA的酶反应动力学研究 | 第87-89页 |
| ·本章小节 | 第89-91页 |
| 第五章 透明质酸寡糖链的体外合成及其在巴斯德杆菌透明质酸合酶(PmHAS)性质研究中的应用 | 第91-107页 |
| ·引言 | 第91-94页 |
| ·实验材料 | 第94-95页 |
| ·菌株 | 第94页 |
| ·酶、试剂与耗材 | 第94页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第94-95页 |
| ·实验方法 | 第95-96页 |
| ·PmHAS的表达与纯化 | 第95页 |
| ·PmHAS的活性检测 | 第95页 |
| ·生物素标记的透明质酸二糖的大量合成 | 第95页 |
| ·生物素标记的透明质酸二糖的纯化 | 第95页 |
| ·生物素标记的透明质酸三糖的大量合成 | 第95-96页 |
| ·生物素标记的透明质酸三糖的纯化 | 第96页 |
| ·受体底物对PmHAS体外聚合能力的影响研究 | 第96页 |
| ·酶法合成分子量均一的透明质酸多糖的初步研究 | 第96页 |
| ·结果与讨论 | 第96-105页 |
| ·PmHAS的表达与纯化 | 第96-97页 |
| ·PmHAS的酶活检测 | 第97-98页 |
| ·生物素标记的透明质酸二糖的制备 | 第98页 |
| ·生物素标记的透明质酸三糖的制备 | 第98-99页 |
| ·受体底物对PmHAS体外聚合能力的影响研究 | 第99-103页 |
| ·酶法合成分子量均一的透明质酸多糖的初步研究 | 第103-105页 |
| ·本章小节 | 第105-107页 |
| 全文总结 | 第107-109页 |
| 本文取得的创新性成果 | 第107-108页 |
| 本论文的不足之处 | 第108-109页 |
| 附录 | 第109-140页 |
| 参考文献 | 第140-157页 |
| 致谢 | 第157-158页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第158-159页 |
| 外文论文 | 第159-160页 |
| 附件 | 第160-176页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第176页 |
