摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-43页 |
·植物与病原菌互作 | 第16-24页 |
·植物与病原菌互作的“中心法则” | 第16-19页 |
·“基因对基因”假说 | 第19页 |
·植物抗病基因的结构与功能 | 第19-21页 |
·病原菌无毒基因的结构与功能 | 第21-23页 |
·R 基因与 Avr 基因的互作 | 第23-24页 |
·病原菌效应蛋白(Effector)研究进展 | 第24-33页 |
·病原菌效应蛋白筛选方法 | 第24-28页 |
·病原菌效应蛋白作用机制研究 | 第28-31页 |
·病原菌效应蛋白转运机制研究 | 第31-33页 |
·病原菌激发子研究进展 | 第33-36页 |
·腺苷酸转移酶(adenine nucleotide tranlocase,ANT)研究进展 | 第36-40页 |
·ANT 是线虫细胞凋亡机制的重要成员 | 第37-38页 |
·ANT 是哺乳动物细胞凋亡机制的重要成员 | 第38-39页 |
·ANT 在酵母中参与细胞凋亡调控 | 第39页 |
·真菌细胞凋亡中的研究进展 | 第39-40页 |
·植物类病变(lesion mimic)研究进展 | 第40-42页 |
·研究目的与意义 | 第42-43页 |
第二章 小麦条锈菌效应蛋白的鉴定与功能分析 | 第43-76页 |
·引言 | 第43-44页 |
·试验材料 | 第44-45页 |
·植物材料、小麦条锈菌菌种和工程菌株 | 第44页 |
·载体材料 | 第44页 |
·试剂 | 第44-45页 |
·试验方法 | 第45-53页 |
·小麦条锈菌的繁殖与收集 | 第45页 |
·小麦条锈菌夏孢子萌发与样品采集 | 第45页 |
·小麦条锈菌夏孢子基因组 DNA 提取 | 第45页 |
·小麦条锈菌夏孢子、萌发孢子及被侵染叶片总 RNA 的提取及纯化 | 第45-46页 |
·生物信息学分析小麦条锈菌分泌蛋白 | 第46页 |
·分泌蛋白的克隆 | 第46-48页 |
·抑制 BAX 诱导的 PCD 的效应蛋白筛选 | 第48-49页 |
·候选效应蛋白序列分析 | 第49页 |
·候选效应蛋白信号肽分泌功能的验证 | 第49-50页 |
·候选效应蛋白表达特征分析 | 第50-51页 |
·候选效应蛋白在小麦条锈菌不同毒性的生理小种间序列差异分析 | 第51页 |
·候选效应蛋白毒性 motif 分析 | 第51页 |
·候选效应蛋白作用位点分析 | 第51-52页 |
·效应蛋白负责转运的结构域分析 | 第52页 |
·利用细菌三型分泌系统(TTSS)在小麦中表达效应蛋白 | 第52-53页 |
·结果与分析 | 第53-73页 |
·小麦条锈菌基因组中分泌蛋白的筛选与克隆 | 第53页 |
·农杆菌侵染烟草筛选抑制 BAX 诱导 PCD 的效应蛋白 | 第53-55页 |
·条锈菌效应蛋白基因序列分析 | 第55-56页 |
·条锈菌效应蛋白信号肽分泌功能验证 | 第56-57页 |
·效应蛋白基因表达特征分析 | 第57-59页 |
·小麦条锈菌效应蛋白基因多态性分析 | 第59-61页 |
·效应蛋白毒性结构域分析 | 第61-64页 |
·效应蛋白亚细胞定位 | 第64-66页 |
·效应蛋白转运结构域分析 | 第66-70页 |
·效应蛋白抑制寄主的防御反应 | 第70-71页 |
·效应蛋白无毒性分析 | 第71-73页 |
·讨论 | 第73-76页 |
第三章 小麦条锈菌激发子 Pst322 的鉴定与功能分析 | 第76-100页 |
·引言 | 第76-77页 |
·试验材料 | 第77页 |
·植物材料、小麦条锈菌菌种和工程菌株 | 第77页 |
·载体材料 | 第77页 |
·试剂 | 第77页 |
·试验方法 | 第77-84页 |
·小麦条锈菌的繁殖与收集 | 第77页 |
·小麦条锈菌夏孢子萌发与样品采集 | 第77-78页 |
·小麦条锈菌吸器分离提取 | 第78页 |
·小麦条锈菌夏孢子基因组 DNA 提取 | 第78页 |
·小麦条锈菌夏孢子、萌发孢子、吸器及被侵染叶片总 RNA 的提取及纯化 | 第78-79页 |
·Pst322 基因的分离与克隆 | 第79页 |
·生物信息学分析 Pst322 编码蛋白 | 第79页 |
·表达模式分析 | 第79页 |
·信号肽分泌功能验证 | 第79页 |
·通过农杆菌侵染在烟草中、拟南芥中瞬时表达 Pst322 | 第79-80页 |
·农杆菌侵染在烟草中瞬时表达 Pst322 缺失突变体 | 第80页 |
·通过基因枪轰击在烟草中瞬时表达 Pst322 | 第80-81页 |
·基因枪轰击在小麦和大麦中瞬时表达 Pst322 | 第81-84页 |
·结果与分析 | 第84-97页 |
·Pst322 基因的克隆与结构分析 | 第84页 |
·Pst322 基因在不同锈菌及其他植物病原菌中不保守 | 第84-85页 |
·Pst322 基因在小麦条锈菌不同生理小种间的多态性 | 第85-86页 |
·Pst322 基因信号肽具有分泌功能 | 第86页 |
·Pst322 基因在条锈菌侵染过程中诱导表达 | 第86-87页 |
·瞬时表达 Pst322 基因在寄主植物中诱导细胞坏死 | 第87-90页 |
·Pst322 基因在条锈菌非寄主植物中导细胞坏死 | 第90-92页 |
·Pst322 基因功能结构域分析 | 第92-93页 |
·HIGS 沉默 Pst322 基因抑制病原菌的发育 | 第93-97页 |
·讨论 | 第97-100页 |
第四章 小麦条锈菌腺苷酸转位酶 PsANT 的鉴定与功能分析 | 第100-120页 |
·引言 | 第100-101页 |
·试验材料 | 第101页 |
·植物材料、小麦条锈菌菌种和工程菌株 | 第101页 |
·载体材料 | 第101页 |
·试验方法 | 第101-104页 |
·小麦条锈菌的繁殖与收集 | 第101页 |
·小麦条锈菌夏孢子萌发与样品采集 | 第101页 |
·小麦条锈菌夏孢子、萌发孢子及被侵染叶片总 RNA 的提取及纯化 | 第101页 |
·PsANT 基因的分离与克隆 | 第101页 |
·生物信息学分析 PsANT 编码蛋白 | 第101-102页 |
·表达模式分析 | 第102页 |
·基因枪轰击在烟草中瞬时表达 PsANT | 第102页 |
·PsANT 功能结构域分析 | 第102页 |
·基因枪轰击在小麦中瞬时表达 PsANT | 第102页 |
·在酵母中表达 PsANT | 第102-103页 |
·PsANT 在小麦与条锈菌互作中免疫胶体金定位 | 第103-104页 |
·利用 host-induced gene silencing(HIGS)沉默 PsANT | 第104页 |
·结果与分析 | 第104-117页 |
·PsANT 基因的克隆与编码蛋白的结构分析 | 第104-106页 |
·PsANT 多序列比对与进化树分析 | 第106-107页 |
·PsANT 蛋白定位于小麦条锈菌线粒体 | 第107-109页 |
·PsANT 在烟草细胞中过表达诱导细胞坏死 | 第109页 |
·PsANT 三个结构域对细胞坏死的作用 | 第109-111页 |
·PsANT 在小麦细胞中过表达诱导细胞坏死 | 第111页 |
·PsANT 在酵母中过表达诱导细胞坏死 | 第111-112页 |
·PsANT 在小麦条锈菌侵染过程中诱导表达 | 第112页 |
·HIGS 沉默 PsANT 基因抑制病原菌的发育 | 第112-117页 |
·讨论 | 第117-120页 |
第五章 小麦叶片坏死斑点基因在小麦细胞坏死及抗条锈病中的功能分析 | 第120-142页 |
·引言 | 第120页 |
·试验材料 | 第120页 |
·试验方法 | 第120-124页 |
·小麦条锈菌的繁殖与收集 | 第120-121页 |
·样品采集及小麦叶片总 RNA 的提取及纯化 | 第121页 |
·TaLls1 基因的分离与克隆 | 第121页 |
·生物信息学分析 TaLls1 编码蛋白 | 第121页 |
·表达模式分析 | 第121页 |
·基因枪轰击在烟草中瞬时表达 TaLls1 | 第121-122页 |
·TaLls1 功能结构域分析 | 第122页 |
·基因枪轰击在小麦中瞬时表达 TaLls1 | 第122页 |
·利用 virus induced gene silencing(VIGS)沉默 TaLls1 | 第122-123页 |
·叶绿素代谢产物分析 | 第123-124页 |
·结果与分析 | 第124-139页 |
·TaLls1 基因的克隆与编码蛋白的结构分析 | 第124页 |
·TaLls1 多序列比对与进化树分析 | 第124页 |
·TaLls1 在小麦不同组织中表达 | 第124页 |
·TaLls1 在伤害、脱落酸和条锈菌处理后上调表达 | 第124-128页 |
·TaLls1 沉默增强小麦对毒性条锈菌生理小种的抗性 | 第128-133页 |
·TaLls1 沉默诱导小麦细胞坏死 | 第133-135页 |
·在烟草和小麦中过表达 TaLls1 诱导细胞坏死 | 第135-137页 |
·TaLls1 沉默植株中 Pa 积累及过表达植株中 RCC 积累均可引致细胞坏死 | 第137-139页 |
·讨论 | 第139-142页 |
第六章 结论及创新点 | 第142-144页 |
参考文献 | 第144-160页 |
附录 | 第160-165页 |
致谢 | 第165-166页 |
个人简介 | 第166-167页 |