ABSTRACT | 第1-7页 |
摘要 | 第7-12页 |
CHAPTER 1 INTRODUCTION | 第12-28页 |
·BIOLOGY AND ECOLOGY OF LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE | 第12-13页 |
·COTTON BOLLWORM, H. ARMIGERA HUBNER | 第13-14页 |
·Distribution | 第13页 |
·Morphology | 第13页 |
·Life cycle | 第13页 |
·Host plants | 第13-14页 |
·IMPORTANT INSECTICIDES-LEPIDOPTERAN SPECIES | 第14-22页 |
·Historical perspective of the insecticide market for lepidopteran | 第14-15页 |
·World’s insecticides market | 第15页 |
·Insecticides of the old chemistry | 第15-18页 |
·Insecticides of the “New chemistry” | 第18-22页 |
·PROBLEM OF THE INSECTICIDE RESISTANCE | 第22页 |
·RESISTANCE MECHANISMS IN INSECTS | 第22-26页 |
·Behavioral and penetration resistance | 第22-23页 |
·Metabolic resistance | 第23-25页 |
·Altered target-site resistance | 第25-26页 |
·RESISTANCE MANAGEMENT | 第26-27页 |
·Problem of Cross-resistance | 第26页 |
·Integrated pest and insecticide resistance management | 第26-27页 |
·OBJECTIVES OF THIS STUDY | 第27-28页 |
CHAPTER 2 TOXICOLOGICAL STUDIES OF CANTHARIDIN IN H. ARMIGERA | 第28-35页 |
·LABORATORY REARING OF H. ARMIGERA | 第28-31页 |
·Introduction | 第28页 |
·Rearing conditions | 第28页 |
·Materials | 第28页 |
·Maintenance of colony | 第28-31页 |
·EXTRACTION OF CANTHARIDIN | 第31-32页 |
·ESTIMATION OF LC50OF CANTHARIDIN ON HELICOVERPA ARMIGERA | 第32页 |
·Bioassay, experimental design and statistical analysis | 第32页 |
·RESULTS | 第32-34页 |
·CONCLUSION | 第34-35页 |
CHAPTER 3 LETHAL AND SUB-LETHAL EFFECTS OF CANTHARIDIN ON LIFE HISTORY TRAITS AND POPULATION PARAMETERS OF H. ARMIGERA | 第35-50页 |
·INTRODUCTION | 第35页 |
·MATERIALS AND METHODS | 第35-37页 |
·Cantharidin extraction and purification | 第35-36页 |
·Insects rearing | 第36页 |
·Artificial diet | 第36页 |
·Bioassay and calculation of lethal time (LT50) | 第36页 |
·Insects treatment | 第36页 |
·Development of life table data | 第36-37页 |
·Statistical analysis and population parameters | 第37页 |
·Population parameters estimated | 第37页 |
·RESULTS | 第37-47页 |
·DISCUSSION | 第47-49页 |
·CONCLUSION | 第49-50页 |
CHAPTER 4 EFFECT OF CANTHARIDIN ON GLUTATHIONE S-TRANSFERASE (GST) | 第50-68页 |
·INTRODUCTION | 第50-51页 |
·MATERIALS AND METHODS | 第51-57页 |
·Insects | 第51页 |
·Bioassay | 第51页 |
·Larval treatment | 第51页 |
·Total RNA preparation and synthesis of cDNAs template for real-time qPCR | 第51-52页 |
·Cloning of glutathione S-transferase gene from H. armigera | 第52页 |
·Construction of recombinant expression plasmid | 第52-53页 |
·SDS-PAGE analysis of recombinant protein and immunoblotting | 第53页 |
·Prokaryotic expression and purification of the soluble recombinant protein, rHaGST | 第53-54页 |
·Enzyme preparation | 第54页 |
·GST activity assay | 第54页 |
·Kinetic properties of GST | 第54页 |
·Kinetic properties of purified soluble rHaGST | 第54-55页 |
·Determination of IC50 | 第55页 |
·Real-time qPCR analysis of gene expression | 第55页 |
·Computer assisted modeling of HaGST | 第55-57页 |
·RESULTS | 第57-65页 |
·Bioassay | 第57页 |
·SDS-PAGE analysis | 第57-58页 |
·Specific activity of HaGST | 第58-59页 |
·Kinetic properties of GSTs | 第59-60页 |
·Kinetic properties of purified rHaGST | 第60-61页 |
·IC50 of cantharidin | 第61页 |
·Time course expression profile of the HaGST gene by real-time qPCR | 第61页 |
·Homology Modeling of HaGST | 第61-65页 |
·DISCUSSION | 第65-66页 |
·CONCLUSION | 第66-68页 |
CHAPTER 5 EFFECT OF CANTHARIDIN ON ALKALINE PHOSPHATASE (ALP) | 第68-86页 |
·INTRODUCTION | 第68-69页 |
·MATERIALS AND METHODS | 第69-75页 |
·Test Insect | 第69页 |
·Insect treatment | 第69-70页 |
·The enzyme preparation and alkaline phosphatase activity assay | 第70页 |
·Enzyme kinetics and inhibition study | 第70页 |
·Gene cloning and sequencing | 第70-71页 |
·Construction of recombinant plasmid and expression of rHaALP | 第71-72页 |
·Real-time qPCR analysis of gene expression | 第72-73页 |
·Western analysis and production of HaALP antibody | 第73页 |
·Homology modeling and Molecular dynamics simulations (Work carried out by the coauthor, Ji Yuan Liu) | 第73-75页 |
·RESULTS | 第75-83页 |
·Specific activity of HaALP in vivo | 第75-76页 |
·Kinetic properties of ALP | 第76-77页 |
·Time course expression profile of HaALP gene | 第77页 |
·Homology Modeling | 第77-83页 |
·DISCUSSION | 第83-84页 |
·CONCLUSION | 第84-86页 |
CHAPTER 6 GENE CLONED TO BE TESTED FOR TARGET OF CANTHARIDIN75 | 第86-90页 |
·BACKGROUND | 第86页 |
·CLONING AND SEQUENCING OF H. ARMIGERA CARBOXYLESTERASE GENE | 第86-87页 |
·INTRODUCTION | 第86页 |
·MATERIALS AND METHODS | 第86页 |
·RESULTS | 第86-87页 |
·CLONING AND SEQUENCING OF H. ARMIGERA AChE GENE | 第87-88页 |
·INTRODUCTION | 第87页 |
·MATERIALS AND METHODS | 第87页 |
·RESULTS | 第87-88页 |
·CLONING AND SEQUENCING OF H. ARMIGERA PROTEIN PHOSPHATASE 2A | 第88页 |
·INTRODUCTION | 第88页 |
·MATERIALS AND METHODS | 第88页 |
·RESULTS | 第88页 |
·CLONING AND SEQUENCING OF M. SEPARATA PROTEIN PHOSPHATASE 2A | 第88-90页 |
·MATERIALS AND METHODS | 第88-89页 |
·RESULTS | 第89-90页 |
REFERENCES | 第90-100页 |
APPENDIX I | 第100-101页 |
APPENDIX II | 第101-102页 |
APPENDIX III | 第102-103页 |
APPENDIX IV | 第103-104页 |
APPENDIX V | 第104-105页 |
APPENDIX VI | 第105页 |
APPENDIX VII | 第105-106页 |
APPENDIX VIII | 第106页 |
APPENDIX IX | 第106-107页 |
APPENDIX X | 第107-109页 |
APPENDIX XI | 第109-111页 |
APPENDIX XII | 第111-112页 |
APPENDIX XIII | 第112页 |
APPENDIX XIV | 第112-113页 |
APPENDIX XV | 第113-114页 |
APPENDIX XVI | 第114-116页 |
APPENDIX XVII | 第116-118页 |
APPENDIX XVIII | 第118-119页 |
APPENDIX XIX | 第119-120页 |
APPENDIX XX | 第120-121页 |
APPENDIX XXI | 第121-122页 |
APPENDIX XXII | 第122-123页 |
ACKNOWLEDGEMENTS | 第123-124页 |
ABOUT THE AUTHOR | 第124-126页 |