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斑蝥素对棉铃虫毒杀作用分子机理研究

ABSTRACT第1-7页
摘要第7-12页
CHAPTER 1 INTRODUCTION第12-28页
   ·BIOLOGY AND ECOLOGY OF LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE第12-13页
   ·COTTON BOLLWORM, H. ARMIGERA HUBNER第13-14页
     ·Distribution第13页
     ·Morphology第13页
     ·Life cycle第13页
     ·Host plants第13-14页
   ·IMPORTANT INSECTICIDES-LEPIDOPTERAN SPECIES第14-22页
     ·Historical perspective of the insecticide market for lepidopteran第14-15页
     ·World’s insecticides market第15页
     ·Insecticides of the old chemistry第15-18页
     ·Insecticides of the “New chemistry”第18-22页
   ·PROBLEM OF THE INSECTICIDE RESISTANCE第22页
   ·RESISTANCE MECHANISMS IN INSECTS第22-26页
     ·Behavioral and penetration resistance第22-23页
     ·Metabolic resistance第23-25页
     ·Altered target-site resistance第25-26页
   ·RESISTANCE MANAGEMENT第26-27页
     ·Problem of Cross-resistance第26页
     ·Integrated pest and insecticide resistance management第26-27页
   ·OBJECTIVES OF THIS STUDY第27-28页
CHAPTER 2 TOXICOLOGICAL STUDIES OF CANTHARIDIN IN H. ARMIGERA第28-35页
   ·LABORATORY REARING OF H. ARMIGERA第28-31页
     ·Introduction第28页
     ·Rearing conditions第28页
     ·Materials第28页
     ·Maintenance of colony第28-31页
   ·EXTRACTION OF CANTHARIDIN第31-32页
   ·ESTIMATION OF LC50OF CANTHARIDIN ON HELICOVERPA ARMIGERA第32页
     ·Bioassay, experimental design and statistical analysis第32页
   ·RESULTS第32-34页
   ·CONCLUSION第34-35页
CHAPTER 3 LETHAL AND SUB-LETHAL EFFECTS OF CANTHARIDIN ON LIFE HISTORY TRAITS AND POPULATION PARAMETERS OF H. ARMIGERA第35-50页
   ·INTRODUCTION第35页
   ·MATERIALS AND METHODS第35-37页
     ·Cantharidin extraction and purification第35-36页
     ·Insects rearing第36页
     ·Artificial diet第36页
     ·Bioassay and calculation of lethal time (LT50)第36页
     ·Insects treatment第36页
     ·Development of life table data第36-37页
     ·Statistical analysis and population parameters第37页
     ·Population parameters estimated第37页
   ·RESULTS第37-47页
   ·DISCUSSION第47-49页
   ·CONCLUSION第49-50页
CHAPTER 4 EFFECT OF CANTHARIDIN ON GLUTATHIONE S-TRANSFERASE (GST)第50-68页
   ·INTRODUCTION第50-51页
   ·MATERIALS AND METHODS第51-57页
     ·Insects第51页
     ·Bioassay第51页
     ·Larval treatment第51页
     ·Total RNA preparation and synthesis of cDNAs template for real-time qPCR第51-52页
     ·Cloning of glutathione S-transferase gene from H. armigera第52页
     ·Construction of recombinant expression plasmid第52-53页
     ·SDS-PAGE analysis of recombinant protein and immunoblotting第53页
     ·Prokaryotic expression and purification of the soluble recombinant protein, rHaGST第53-54页
     ·Enzyme preparation第54页
     ·GST activity assay第54页
     ·Kinetic properties of GST第54页
     ·Kinetic properties of purified soluble rHaGST第54-55页
     ·Determination of IC50第55页
     ·Real-time qPCR analysis of gene expression第55页
     ·Computer assisted modeling of HaGST第55-57页
   ·RESULTS第57-65页
     ·Bioassay第57页
     ·SDS-PAGE analysis第57-58页
     ·Specific activity of HaGST第58-59页
     ·Kinetic properties of GSTs第59-60页
     ·Kinetic properties of purified rHaGST第60-61页
     ·IC50 of cantharidin第61页
     ·Time course expression profile of the HaGST gene by real-time qPCR第61页
     ·Homology Modeling of HaGST第61-65页
   ·DISCUSSION第65-66页
   ·CONCLUSION第66-68页
CHAPTER 5 EFFECT OF CANTHARIDIN ON ALKALINE PHOSPHATASE (ALP)第68-86页
   ·INTRODUCTION第68-69页
   ·MATERIALS AND METHODS第69-75页
     ·Test Insect第69页
     ·Insect treatment第69-70页
     ·The enzyme preparation and alkaline phosphatase activity assay第70页
     ·Enzyme kinetics and inhibition study第70页
     ·Gene cloning and sequencing第70-71页
     ·Construction of recombinant plasmid and expression of rHaALP第71-72页
     ·Real-time qPCR analysis of gene expression第72-73页
     ·Western analysis and production of HaALP antibody第73页
     ·Homology modeling and Molecular dynamics simulations (Work carried out by the coauthor, Ji Yuan Liu)第73-75页
   ·RESULTS第75-83页
     ·Specific activity of HaALP in vivo第75-76页
     ·Kinetic properties of ALP第76-77页
     ·Time course expression profile of HaALP gene第77页
     ·Homology Modeling第77-83页
   ·DISCUSSION第83-84页
   ·CONCLUSION第84-86页
CHAPTER 6 GENE CLONED TO BE TESTED FOR TARGET OF CANTHARIDIN75第86-90页
   ·BACKGROUND第86页
   ·CLONING AND SEQUENCING OF H. ARMIGERA CARBOXYLESTERASE GENE第86-87页
     ·INTRODUCTION第86页
     ·MATERIALS AND METHODS第86页
     ·RESULTS第86-87页
   ·CLONING AND SEQUENCING OF H. ARMIGERA AChE GENE第87-88页
     ·INTRODUCTION第87页
     ·MATERIALS AND METHODS第87页
     ·RESULTS第87-88页
   ·CLONING AND SEQUENCING OF H. ARMIGERA PROTEIN PHOSPHATASE 2A第88页
     ·INTRODUCTION第88页
     ·MATERIALS AND METHODS第88页
     ·RESULTS第88页
   ·CLONING AND SEQUENCING OF M. SEPARATA PROTEIN PHOSPHATASE 2A第88-90页
     ·MATERIALS AND METHODS第88-89页
     ·RESULTS第89-90页
REFERENCES第90-100页
APPENDIX I第100-101页
APPENDIX II第101-102页
APPENDIX III第102-103页
APPENDIX IV第103-104页
APPENDIX V第104-105页
APPENDIX VI第105页
APPENDIX VII第105-106页
APPENDIX VIII第106页
APPENDIX IX第106-107页
APPENDIX X第107-109页
APPENDIX XI第109-111页
APPENDIX XII第111-112页
APPENDIX XIII第112页
APPENDIX XIV第112-113页
APPENDIX XV第113-114页
APPENDIX XVI第114-116页
APPENDIX XVII第116-118页
APPENDIX XVIII第118-119页
APPENDIX XIX第119-120页
APPENDIX XX第120-121页
APPENDIX XXI第121-122页
APPENDIX XXII第122-123页
ACKNOWLEDGEMENTS第123-124页
ABOUT THE AUTHOR第124-126页

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