摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
1 文献综述 | 第13-28页 |
·甘薯茎线虫病及其防治 | 第13-19页 |
·引言 | 第13-14页 |
·甘薯茎线虫病的发生与分布 | 第14-15页 |
·甘薯茎线虫的生物学特性 | 第15页 |
·甘薯茎线虫的侵染机制和危害症状 | 第15-16页 |
·植物寄生线虫的综合防治 | 第16-19页 |
·化学防治 | 第16-17页 |
·物理防治 | 第17页 |
·生物防治 | 第17-19页 |
·苏云金芽胞杆菌及其杀虫晶体蛋白基因的表达调控 | 第19-23页 |
·苏云金芽胞杆菌简介 | 第19页 |
·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白及其编码基因 | 第19-20页 |
·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因的表达调控 | 第20-22页 |
·转录水平的调控 | 第21页 |
·转录后水平的调控 | 第21-22页 |
·翻译后水平的调控 | 第22页 |
·影响cry基因表达的几个其他因素 | 第22-23页 |
·基因拷贝数 | 第22-23页 |
·cry基因之间的协同作用 | 第23页 |
·宿主细胞的影响 | 第23页 |
·苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫研究进展 | 第23-27页 |
·苏云金芽胞杆菌对植物寄生线虫的杀虫活性 | 第23-24页 |
·苏云金芽胞杆菌的杀线虫基因和产物 | 第24-25页 |
·苏云金芽胞杆菌对线虫的作用机制 | 第25-27页 |
·苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白对昆虫的作用机制 | 第25-26页 |
·苏云金芽胞杆菌晶体蛋白对线虫的作用机制研究 | 第26-27页 |
·研究的目的和意义 | 第27-28页 |
2 材料和方法 | 第28-38页 |
·实验材料 | 第28-30页 |
·菌株来源 | 第28-29页 |
·PCR引物 | 第29-30页 |
·培养基 | 第30页 |
·抗生素及使用浓度 | 第30页 |
·供试线虫 | 第30页 |
·试剂和仪器 | 第30-32页 |
·试剂 | 第30页 |
·常用缓冲液和溶液 | 第30-31页 |
·仪器 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-38页 |
·供试苏云金芽胞杆菌的培养 | 第32页 |
·苏云金芽胞杆菌晶体蛋白的SDS-PAGE | 第32页 |
·电泳样品的制备 | 第32页 |
·晶体蛋白的SDS-PAGE | 第32页 |
·苏云金芽胞杆菌生物测定样品的制备 | 第32-33页 |
·晶体蛋白样品的浓度测定 | 第33页 |
·甘薯茎线虫的接种、培养和收集 | 第33-34页 |
·甘薯茎线虫的接种和培养 | 第33页 |
·甘薯茎线虫的收集 | 第33-34页 |
·对甘薯茎线虫具有杀虫活性的苏云金芽胞杆菌筛选 | 第34页 |
·初筛 | 第34页 |
·复筛 | 第34页 |
·DNA操作方法 | 第34-35页 |
·大肠杆菌质粒的抽提 | 第34-35页 |
·苏云金芽胞杆菌质粒的抽提 | 第35页 |
·DNA的体外重组操作 | 第35-38页 |
·PCR扩增操作 | 第35页 |
·酶切反应 | 第35-36页 |
·连接反应 | 第36页 |
·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备与热激转化 | 第36页 |
·BMB171感受态细胞的制备和电转化 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-56页 |
·甘薯茎线虫的接种、培养和收集 | 第38-39页 |
·对甘薯茎线虫具有杀虫活性的苏云金芽胞杆菌筛选 | 第39-44页 |
·苏云金芽胞杆菌供试菌株 | 第39-41页 |
·供试苏云金芽胞杆菌的初筛 | 第41-43页 |
·供试苏云金芽胞杆菌的复筛 | 第43页 |
·YBT-008对甘薯茎线虫的LC_(50)测定 | 第43-44页 |
·YBT-008杀虫晶体蛋白基因的鉴定和验证 | 第44-49页 |
·YBT-008的生物学特性 | 第44-45页 |
·YBT-008晶体蛋白的SDS-PAGE | 第45-46页 |
·YBT-008的LC-MS及结果分析 | 第46页 |
·YBT-008杀虫晶体蛋白基因的PCR验证 | 第46-49页 |
·YBT-008杀虫晶体蛋白基因的克隆与表达 | 第49-54页 |
·cyt2Ba、cry11Aa、cry4Aa和cry4Ba重组表达载体的构建 | 第50-52页 |
·cyt2Ba、cry11Aa、cry4Aa和cry4Ba全长编码序列的PCR扩增 | 第51-52页 |
·cyt2Ba、cry11Aa、cry4Aa和cry4Ba与pHT304载体的连接 | 第52页 |
·重组载体的表达验证 | 第52-54页 |
·重组表达蛋白对甘薯茎线虫的杀虫活性验证 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
·杀甘薯茎线虫的苏云金芽胞杆菌及其筛选 | 第56-57页 |
·对YBT-008杀虫晶体蛋白和基因的分析 | 第57页 |
·Cyt2Ba、Cry11Aa、Cry4Aa和Cry4Ba的表达及杀线虫活性 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
致谢 | 第74页 |