| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 英文缩略表 | 第6-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 禽白血病病毒(ALV)的分类 | 第11-12页 |
| 2 禽白血病病毒(ALV)的形态结构及生命周期 | 第12-13页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)的形态结构 | 第12页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)的生命周期 | 第12-13页 |
| 3 禽白血病病毒(ALV)的基因组结构及功能 | 第13-14页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)的基因组结构 | 第13-14页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)的编码蛋白及其功能 | 第14页 |
| 4 禽白血病病毒(ALV)诊断方法研究进展 | 第14-16页 |
| ·病原学检测 | 第15页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第15页 |
| ·电镜检测 | 第15页 |
| ·免疫荧光法 | 第15页 |
| ·血清学诊断 | 第15-16页 |
| ·血清中和实验 | 第15-16页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第16页 |
| ·分子诊断技术 | 第16页 |
| 5 反转录病毒的反向遗传系统 | 第16-19页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)的反向遗传系统的建立 | 第17页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)的反向遗传系统应用 | 第17-19页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)基因功能的研究 | 第17-18页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)致瘤机制的研究 | 第18页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)组织嗜性的研究 | 第18页 |
| ·禽白血病病毒(ALV)疫苗的研究 | 第18-19页 |
| 6 实验目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 实验部分 | 第20-53页 |
| 第一章 髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒四川株SCGS-1的分离鉴定与全基因序列测定 | 第20-37页 |
| 1 实验材料 | 第20-24页 |
| ·病料及鸡胚来源 | 第20页 |
| ·菌种、载体及抗体 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·试剂配制 | 第22-23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-31页 |
| ·病毒分离 | 第24-25页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第24-25页 |
| ·病毒的分离培养 | 第25页 |
| ·病毒的鉴定 | 第25-27页 |
| ·病毒PCR鉴定 | 第25-26页 |
| ·前病毒DNA模板制备 | 第25-26页 |
| ·病毒cDNA模板制备 | 第26页 |
| ·PCR反应 | 第26页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第26-27页 |
| ·双抗体夹心ELISA检测 | 第27页 |
| ·SCGS-1全基因组序列测定 | 第27-30页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·PCR反应体系与条件 | 第27-28页 |
| ·目的DNA片段胶回收 | 第28-29页 |
| ·目的片段3’末端加“A” | 第29页 |
| ·目的片段与pMD19-T Simple Vector连接 | 第29页 |
| ·重组质粒转化 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞制备 | 第29页 |
| ·重组质粒转化 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第30页 |
| ·重组质粒的提取 | 第30页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定与序列测定 | 第30页 |
| ·SCGS-1全基因序列分析 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-34页 |
| ·病毒分离 | 第31页 |
| ·分离病毒的鉴定 | 第31-33页 |
| ·病毒PCR鉴定 | 第31页 |
| ·病毒间接免疫荧光试验 | 第31-32页 |
| ·双抗体夹心ELISA检测 | 第32-33页 |
| ·ALV-J全基因PCR扩增与克隆测序 | 第33页 |
| ·全基因序列分析 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| 第二章 髓细胞瘤型J亚群禽白血病病毒四川株SCGS-1前病毒cDNA感染性克隆的构建及病毒拯救 | 第37-53页 |
| 1 实验材料 | 第37-38页 |
| ·毒株及抗体 | 第37页 |
| ·菌种及载体 | 第37页 |
| ·实验试剂 | 第37-38页 |
| ·试剂配制 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-44页 |
| ·SCGS-1株前病毒cDNA感染性克隆的构建 | 第38-41页 |
| ·生物信息学分析与引物设计 | 第38-39页 |
| ·模板制备与PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·pUC-SCGS重组质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的构建与阳性克隆的鉴定 | 第40页 |
| ·pUC-SCGS重组质粒的构建与鉴定 | 第40-41页 |
| ·pUC-SCGS重组质粒的序列分析 | 第41页 |
| ·SCGS-1株前病毒cDNA分子标记质粒pUC-/NSCGS的构建 | 第41-43页 |
| ·生物信息学分析与引物设计 | 第41-42页 |
| ·重叠PCR反应体系与条件 | 第42页 |
| ·克隆质粒的构建与阳性重组克隆的鉴定 | 第42页 |
| ·pUC-ASCGS重组质粒的构建与鉴定 | 第42-43页 |
| ·细胞转染及病毒拯救 | 第43页 |
| ·拯救病毒检测 | 第43-44页 |
| ·拯救病毒PCR检测 | 第43-44页 |
| ·拯救病毒间接免疫荧光检测 | 第44页 |
| ·拯救病毒双抗体夹心ELISA检测 | 第44页 |
| 3 实验结果 | 第44-50页 |
| ·SCGS-1株前病毒cDNA感染性克隆pUC-SCGS的构建 | 第44-46页 |
| ·PCR扩增结果 | 第44页 |
| ·pUC-SCGS重组质粒的构建 | 第44-46页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第44-45页 |
| ·pUC-SCGS重组质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| ·pUC-SCGS重组质粒的序列分析 | 第46页 |
| ·SCGS-1株前病毒cDNA分子标记质粒pUC-ASCGS的构建 | 第46-48页 |
| ·重叠PCR扩增结果 | 第46页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第46-47页 |
| ·pUC-ASCGS重组质粒的鉴定 | 第47-48页 |
| ·拯救病毒的检测 | 第48-50页 |
| ·拯救病毒PCR检测 | 第48-49页 |
| ·拯救病毒间接免疫荧光检测 | 第49-50页 |
| ·拯救病毒双抗体夹心ELISA检测 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介以及攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
