| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-24页 |
| ·沙门氏菌研究概况 | 第13-18页 |
| ·沙门氏菌的病原特征 | 第13页 |
| ·沙门氏菌的毒力基因研究 | 第13-15页 |
| ·沙门氏菌对宿主的作用机制 | 第15-18页 |
| ·转座突变策略 | 第18-20页 |
| ·Tn5:分子遗传学工具 | 第18-19页 |
| ·转座子相关技术 | 第19-20页 |
| ·转座突变的应用 | 第20页 |
| ·Red 重组系统 | 第20-23页 |
| ·Red 重组系统的构成和机制 | 第20-22页 |
| ·Red 重组系统的优势和应用 | 第22-23页 |
| ·Red 重组系统的问题和展望 | 第23页 |
| ·研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 转座突变体库的构建及减毒菌株的筛选 | 第24-30页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·质粒、菌株、细胞 | 第24页 |
| ·主要试剂与药品 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·转座突变体库的构建 | 第25-26页 |
| ·肠炎沙门氏菌减毒菌株的体外筛选 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-28页 |
| ·转座突变体库的构建和 PCR 鉴定结果 | 第27-28页 |
| ·减毒突变株的初筛及复验结果 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 减毒菌株突变基因的定位和确认 | 第30-39页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·试验菌株 | 第30页 |
| ·主要试剂与试剂盒 | 第30-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-35页 |
| ·Southern blot 验证 Tn5 插入情况 | 第31-33页 |
| ·染色体步移获取目的序列 | 第33-35页 |
| ·结果 | 第35-37页 |
| ·Southern blot 确定 Tn5 插入的结果 | 第35-36页 |
| ·染色体步移 PCR 扩增及序列测定结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·Southern blot 验证 Tn5 单插入试验 | 第37页 |
| ·染色体步移获取侧翼未知序列 | 第37-39页 |
| 第四章 基因缺失株的构建及生物学特性的研究 | 第39-63页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·细胞、试验动物 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-45页 |
| ·Red 重组构建基因缺失株 | 第40-43页 |
| ·生物学特性的研究 | 第43-45页 |
| ·结果 | 第45-57页 |
| ·基因缺失株的构建 | 第45-47页 |
| ·生物学特性的研究 | 第47-57页 |
| ·讨论 | 第57-63页 |
| ·基因敲除 | 第57-58页 |
| ·回复突变 | 第58页 |
| ·hilA 调控基因 | 第58-60页 |
| ·基因缺失株的生物学特性 | 第60-63页 |
| 第五章 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简历 | 第74页 |
