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共表达H5N1亚型禽流感病毒同义HA、NA蛋白的DNA疫苗免疫效果评价

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 引言第12-19页
   ·禽流感病毒概述第12-14页
     ·禽流感的病原学第12-13页
     ·禽流感病毒血凝素第13页
     ·禽流感病毒神经氨酸酶(NA)及对 NA 的免疫应答第13页
     ·禽流感病毒的传播及其对人类健康的影响第13-14页
   ·禽流感疫苗研究进展第14-15页
     ·全病毒灭活苗第14页
     ·亚单位疫苗第14页
     ·重组活载体疫苗第14-15页
     ·反向遗传疫苗第15页
   ·DNA 疫苗的研究进展第15-17页
     ·DNA 疫苗的主要特点第15页
     ·DNA 疫苗的基本原理第15-16页
     ·流感病毒 DNA 疫苗研究进展第16-17页
     ·提高 DNA 疫苗免疫原性的方式第17页
   ·本研究的目的与意义第17-19页
第二章 表达 H5N1 亚型 AIV 同义 HA 和 NA 蛋白重组质粒的构建及体外表达第19-32页
   ·材料与方法第19-23页
     ·菌株,细胞与质粒第19页
     ·酶及主要试剂第19页
     ·血清与抗体第19-20页
     ·主要仪器第20页
     ·H5 亚型 AIV 同义 HA 蛋白及同义 NA 蛋白氨基酸同义序列分析与合成第20页
     ·重组质粒 pCons-CHA, pCons-CNA 的构建与鉴定第20-21页
     ·共表达同义 HA 和 NA 基因重组质粒 pCons-CHANA 的构建与鉴定第21页
     ·间接 NA-ELISA 检测方法的建立第21-22页
     ·重组质粒体外表达的间接免疫荧光鉴定第22-23页
     ·重组蛋白的 Western Blot 鉴定第23页
   ·结果第23-30页
     ·重组质粒 pCons-CHA, pCons-CNA 的鉴定第23-25页
     ·重组质粒 pCons-CHANA 的鉴定第25-27页
     ·重组质粒 pGEX-CNA 的鉴定第27页
     ·间接 NA-ELISA 检测方法的建立第27页
     ·间接免疫荧光(IFA)检测结果第27-30页
     ·Western Blot 鉴定结果第30页
   ·讨论第30-32页
第三章 不同 DNA 疫苗(组合)对 SPF 鸡的免疫效力评估第32-50页
   ·材料与方法第32-34页
     ·病毒、抗原第32页
     ·DNA 疫苗第32页
     ·SPF 鸡胚和 SPF 鸡第32页
     ·病毒鸡胚半数致死量 EID50的测定第32页
     ·试验分组情况第32-33页
     ·SPF 鸡免疫方法与免疫程序第33页
     ·HI 抗体的测定第33-34页
     ·NA-ELISA 抗体的测定第34页
     ·攻毒保护实验第34页
     ·病毒分离与滴定第34页
   ·结果第34-47页
     ·鸡胚半数致死量 EID50的测定第34-35页
     ·DNA 疫苗超螺旋含量的检测第35页
     ·不同疫苗(组合)对 DK/GD/322/2010 的免疫保护效力评估第35-38页
     ·不同疫苗(组合)对 DK/HuB/S1513/2010 的免疫保护效率评估第38-41页
     ·不同疫苗(组合)对 CK/SD/A-10/2011 的免疫保护效率评估第41-44页
     ·不同疫苗(组合)对 DK/FJ/31/2007 的免疫保护效率评估第44-47页
   ·讨论第47-50页
第四章 全文结论第50-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
作者简历第58页

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