| 致谢 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-21页 |
| 1 文献综述及本研究目的 | 第21-36页 |
| ·烟粉虱 | 第21-23页 |
| ·烟粉虱概述 | 第21-22页 |
| ·烟粉虱在我国发生现状 | 第22页 |
| ·烟粉虱的危害方式 | 第22-23页 |
| ·双生病毒 | 第23-25页 |
| ·双生病毒概述 | 第23页 |
| ·粉虱传双生病毒 | 第23-24页 |
| ·双生病毒的危害及在中国的发生现状 | 第24-25页 |
| ·烟粉虱-双生病毒-植物互作 | 第25-31页 |
| ·双生病毒对烟粉虱的直接影响 | 第25-26页 |
| ·双生病毒对烟粉虱的间接影响 | 第26-27页 |
| ·烟粉虱-双生病毒间接互惠的生态学意义 | 第27-28页 |
| ·双生病毒病害流行 | 第27页 |
| ·入侵烟粉虱对土著烟粉虱的取代 | 第27-28页 |
| ·烟粉虱-双生病毒间接互惠的生理机制 | 第28-31页 |
| ·双生病毒对植物防御反应的影响 | 第28-29页 |
| ·双生病毒对植物韧皮部营养物质的影响 | 第29-31页 |
| ·海藻糖酶 | 第31-34页 |
| ·海藻糖概述 | 第31-32页 |
| ·海藻糖的化学性质 | 第31-32页 |
| ·海藻糖在昆虫体内的功能 | 第32页 |
| ·海藻糖酶研究进展 | 第32-34页 |
| ·本研究目的与主要内容 | 第34-36页 |
| ·本研究目的 | 第34页 |
| ·本研究主要内容 | 第34-36页 |
| 2 基本材料与方法 | 第36-51页 |
| ·基本材料 | 第36-39页 |
| ·供试昆虫及其实验种群维持 | 第36页 |
| ·供试植物 | 第36页 |
| ·供试病毒及感病植株的获取 | 第36-37页 |
| ·供试病毒 | 第36-37页 |
| ·感病植株的获取 | 第37页 |
| ·生态学实验相关的主要设备和仪器 | 第37-38页 |
| ·养虫笼 | 第37页 |
| ·夹叶笼 | 第37-38页 |
| ·吸虫器 | 第38页 |
| ·人工气候室 | 第38页 |
| ·其他设备 | 第38页 |
| ·生化及分子生物学相关研究的主要仪器设备与试剂 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·常用基本方法 | 第39-51页 |
| ·烟粉虱总DNA提取方法 | 第40页 |
| ·烟草基因组DNA提取 | 第40页 |
| ·RAPD-PCR鉴定烟粉虱隐种 | 第40-41页 |
| ·PCR反应体系及程序设置 | 第40页 |
| ·电泳观察PCR结果 | 第40-41页 |
| ·PCR-RFLP鉴定烟粉虱隐种 | 第41-42页 |
| ·PCR扩增COI基因片段 | 第41页 |
| ·Taq Ⅰ酶切PCR产物 | 第41-42页 |
| ·电泳观察酶切PCR产物 | 第42页 |
| ·植物及烟粉虱体内病毒DNA的PCR检测 | 第42页 |
| ·PCR反应体系及程序设置 | 第42页 |
| ·电泳观察PCR结果 | 第42页 |
| ·电泳观察PCR样品 | 第42-43页 |
| ·6×加样缓冲液(Loading buffer)的配制 | 第43页 |
| ·凝胶电泳 | 第43页 |
| ·氨基酸检测 | 第43-44页 |
| ·仪器设备 | 第43页 |
| ·检测器设置 | 第43页 |
| ·自动进样器设置 | 第43-44页 |
| ·流动相 | 第44页 |
| ·四元泵设置 | 第44页 |
| ·柱温设置 | 第44页 |
| ·图谱分析 | 第44页 |
| ·高效离子交换色谱检测糖分 | 第44页 |
| ·蒽酮-硫酸比色法测总糖 | 第44-45页 |
| ·实验仪器 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44-45页 |
| ·操作步骤 | 第45页 |
| ·PCR产物割胶回收 | 第45页 |
| ·PCR产物连接T载体 | 第45-46页 |
| ·感受态细胞制作 | 第46页 |
| ·感受态细胞的DNA转化 | 第46-51页 |
| 3 TYLCCNV感染与MEAM 1烟粉虱取食对烟草韧皮部汁液营养成分的影响 | 第51-59页 |
| ·材料与方法 | 第52-53页 |
| ·供试昆虫、病毒及植物 | 第52页 |
| ·韧皮部汁液营养成分的分析 | 第52-53页 |
| ·处理设置 | 第52页 |
| ·各处理烟草的获取 | 第52-53页 |
| ·韧皮部汁液的收集 | 第53页 |
| ·韧皮部汁液成分的分析 | 第53页 |
| ·数据分析 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-59页 |
| 4 烟草感染TYLCCNV对MEAM 1烟粉虱营养吸收的影响 | 第59-65页 |
| ·材料与方法 | 第59-60页 |
| ·供试昆虫、病毒及植物 | 第59页 |
| ·烟粉虱蜜露成分的分析 | 第59-60页 |
| ·处理设置 | 第59页 |
| ·烟粉虱蜜露收集方法 | 第59-60页 |
| ·蜜露成分的分析 | 第60页 |
| ·数据分析 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-65页 |
| 5 TYLCCNV对MEAM 1烟粉虱营养吸收的直接影响 | 第65-70页 |
| ·材料与方法 | 第65-66页 |
| ·供试昆虫、病毒及植物 | 第65页 |
| ·处理设置 | 第65-66页 |
| ·蜜露成分的分析 | 第66页 |
| ·数据分析 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-70页 |
| 6 TYLCCNV对MEAM 1烟粉虱海藻糖酶与海藻糖的影响 | 第70-96页 |
| ·材料与方法 | 第71-79页 |
| ·供试昆虫、病毒及植物 | 第71页 |
| ·主要试剂盒及试剂 | 第71页 |
| ·分子生物学相关软件 | 第71-72页 |
| ·BtTres cDNA全长获取 | 第72-75页 |
| ·烟粉虱总RNA提取 | 第72-73页 |
| ·RACE用cDNA文库的制备 | 第73-74页 |
| ·RACE引物设计 | 第74页 |
| ·BtTres基因cDNA 5’和3’端的扩增 | 第74页 |
| ·BtTres基因cDNA 5’和3’端PCR产物割胶回收及测序 | 第74-75页 |
| ·BtTres基因与编码蛋白质序列的同源性及结构分析 | 第75页 |
| ·烟粉虱各虫态下BtTres的表达量 | 第75-77页 |
| ·烟粉虱各虫态qRT-PCR用cDNA的制备 | 第75页 |
| ·qRT-PCR引物设计 | 第75页 |
| ·BtTres表达量的标准曲线制作 | 第75-76页 |
| ·烟粉虱各虫态下BtTres表达量的检测 | 第76-77页 |
| ·TYLCCNV对烟粉虱海藻糖酶活性及海藻糖含量的间接影响 | 第77-78页 |
| ·烟粉虱体内海藻糖酶及海藻糖提取 | 第77页 |
| ·海藻糖酶活性的测定 | 第77-78页 |
| ·海藻糖含量的测定 | 第78页 |
| ·BtTres表达量的测定 | 第78页 |
| ·TYLCCNV对烟粉虱海藻糖酶活性及海藻糖含量的直接影响 | 第78-79页 |
| ·数据分析 | 第79页 |
| ·结果与分析 | 第79-81页 |
| ·BtTres基因与编码蛋白质序列的同源性及结构分析 | 第79-80页 |
| ·烟粉虱各虫态下BtTres的表达 | 第80页 |
| ·烟草感染TYLCCNV对MEAM1烟粉虱海藻糖酶活性及海藻糖含量的影响 | 第80-81页 |
| ·海藻糖酶活性检测 | 第80-81页 |
| ·BtTres的表达量检测 | 第81页 |
| ·海藻糖含量检测 | 第81页 |
| ·TYLCCNV对烟粉虱海藻糖酶活性及海藻糖含量的直接影响 | 第81页 |
| ·海藻糖酶活性检测 | 第81页 |
| ·海藻糖含量检测 | 第81页 |
| ·讨论 | 第81-96页 |
| 7 总讨论 | 第96-101页 |
| ·TYLCCNV对MEAM 1烟粉虱营养吸收的影响 | 第96-97页 |
| ·TYLCCNV对MEAM 1烟粉虱海藻糖酶与海藻糖的影响 | 第97-98页 |
| ·本研究的特色与创新之处 | 第98页 |
| ·研究中存在的问题 | 第98-99页 |
| ·值得继续研究的问题 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-116页 |
| 附录 两种双生病毒经MED烟粉虱水平与垂直传播的概率 | 第116-128页 |
| 1 材料与方法 | 第117-120页 |
| ·供试昆虫 | 第117页 |
| ·供试植物 | 第117页 |
| ·供试病毒 | 第117页 |
| ·感病植株的获取 | 第117页 |
| ·带毒与未带毒烟粉虱以及未交配烟粉虱的获取 | 第117页 |
| ·烟粉虱与植物DNA提取 | 第117页 |
| ·病毒DNA检测 | 第117-118页 |
| ·模板DNA的滚环扩增(Roiling Cycle Amplication,RCA) | 第117-118页 |
| ·TYLCCNV DNA的检测 | 第118页 |
| ·TYLCV DNA的检测 | 第118页 |
| ·两种双生病毒经烟粉虱水平传播的检测 | 第118-119页 |
| ·两种双生病毒经烟粉虱垂直传播的检测 | 第119页 |
| ·携带TYLCV的MED烟粉虱后代成虫侵染植物能力的检测 | 第119-120页 |
| ·数据分析 | 第120页 |
| 2 结果与分析 | 第120-121页 |
| ·两种双生病毒经烟粉虱水平传播的检测 | 第120-121页 |
| ·两种双生病毒经烟粉虱垂直传播的检测 | 第121页 |
| ·携带TYLCV的MED烟粉虱后代成虫侵染植物能力的检测 | 第121页 |
| 3 讨论 | 第121-126页 |
| 附录 参考文献 | 第126-128页 |
| 作者简历 | 第128页 |
