| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| ·细菌表面展示技术研究进展 | 第12-16页 |
| ·细菌表面展示技术简介 | 第12页 |
| ·细菌表面展示系统的组成 | 第12-13页 |
| ·细菌表面展示系统的种类 | 第13页 |
| ·细菌表面展示技术的应用 | 第13-16页 |
| ·细菌表面展示技术存在的问题与展望 | 第16页 |
| ·运载蛋白-Mbg | 第16-17页 |
| ·乘客蛋白-几丁质酶的研究进展 | 第17-25页 |
| ·几丁质酶的研究历史 | 第17-18页 |
| ·几丁质酶的分布 | 第18-20页 |
| ·几丁质酶的分类 | 第20-21页 |
| ·几丁质酶的结构特征及理化性质 | 第21-22页 |
| ·几丁质酶的应用 | 第22-25页 |
| ·研究目的及意义 | 第25-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-42页 |
| ·实验材料 | 第28-32页 |
| ·质粒 | 第28页 |
| ·菌株 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·PCR反应的引物 | 第29-30页 |
| ·主要试剂 | 第30-32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-42页 |
| ·技术路线 | 第32-33页 |
| ·分子生物学基本操作 | 第33-37页 |
| ·大肠杆菌诱导表达、纯化及蛋白质含量和酶活测定 | 第37-39页 |
| ·几丁质酶活性影响因子的测定和动力学常数测定 | 第39页 |
| ·融合蛋白在细菌细胞表面的定位分析 | 第39-41页 |
| ·重组工程菌的性能分析 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-67页 |
| ·苏云金芽孢杆菌几丁质酶基因的克隆及序列分析 | 第42-48页 |
| ·PCR扩增 | 第42页 |
| ·序列的生物信息学分析 | 第42-48页 |
| ·chi9602基因的原核表达、纯化以及几丁质酶活性的测定 | 第48-58页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第48-50页 |
| ·几丁质酶的诱导表达 | 第50-51页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第51-53页 |
| ·几丁质酶的纯化、蛋白质含量以及几丁质酶活性的测定 | 第53-55页 |
| ·几丁质酶影响因子分析 | 第55-57页 |
| ·几丁质酶动力学常数测定 | 第57-58页 |
| ·表面展示几丁质酶的苏云金芽孢杆菌工程菌的构建 | 第58-62页 |
| ·表面展示载体的构建 | 第58-60页 |
| ·细胞表面定位分析 | 第60-62页 |
| ·表面展示几丁质酶的苏云金芽孢杆菌工程菌的性能分析 | 第62-67页 |
| ·生长曲线的测定 | 第62页 |
| ·重组菌株全细胞几丁质酶活性测定 | 第62-65页 |
| ·纯化的几丁质酶和工程菌株抑制真菌的实验 | 第65-67页 |
| 4 讨论与小结 | 第67-73页 |
| ·讨论 | 第67-71页 |
| ·运载蛋白Mbg的性能分析和作用 | 第67-68页 |
| ·靶蛋白几丁质酶的结构分析和在细菌表面展示效率的分析 | 第68-69页 |
| ·工程菌株全细胞酶活分析 | 第69-70页 |
| ·表面展示工程菌株的功能分析 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 附录 | 第79-82页 |
| 已发表或者待出版论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
