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淹水胁迫下水稻胚芽鞘中激素代谢相关酶基因的表达及其RNAi载体的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-30页
   ·淹水胁迫对植物的影响第13页
   ·淹水胁迫对水稻生长的影响第13-16页
     ·生长状态第13-14页
     ·水稻耐淹机理的相关研究进展第14-16页
   ·植物激素在植物适应耐淹机制中的作用第16-20页
     ·乙烯在植物适应耐淹机制中起主导作用第16-17页
     ·乙烯合成过程中的关键酶第17-18页
     ·乙烯合成中ACS基因和ACO基因表达的研究第18-19页
     ·细胞分裂素合成过程中的关键酶第19-20页
     ·ABA降解过程中的关键酶第20页
   ·实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR)技术第20-24页
     ·实时荧光定量PCR技术原理第21页
     ·实时荧光定量PCR中非特异性扩增与特异性扩增的检测第21-23页
     ·定量方法第23-24页
     ·实时荧光定量PCR技术的应用第24页
   ·RNA干扰第24-28页
     ·RNA干扰的作用机制第25页
     ·siRNA研究进展第25页
     ·常用制备siRNA的方法第25-26页
     ·miRNA的研究进展第26-27页
     ·siRNA与miRNA的区别第27-28页
   ·本研究的目的与意义第28-30页
第二章 材料与方法第30-51页
   ·材料第30-35页
     ·植物材料第30页
     ·菌株第30页
     ·载体第30页
     ·试剂盒第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·溶液第31-33页
     ·培养基第33-34页
     ·实验仪器第34-35页
   ·方法第35-51页
     ·空气和淹水环境中水稻胚芽鞘的培养第35页
     ·石蜡切片制作水稻胚芽鞘细胞结构第35-37页
     ·水稻胚芽鞘总RNA提取至转录为cDNA过程第37-39页
     ·RT-PCR检测不同培养条件下胚芽鞘中ACS基因家族,ACO基因家族,IPT基因家族,8’-羟化酶的表达差异第39-41页
     ·实时荧光定量PCR检测不同培养条件下胚芽鞘中ACS-2,ACO-6,8’-羟化酶的相对表达差异第41-42页
     ·RNAi载体图谱及构建流程第42-43页
     ·感受态细胞DH-10β的制备第43-44页
     ·乙烯合成关键酶基因,ABA降解关键酶基因的RNAi表达载体构建第44-49页
     ·RNAi双元表达载体的构建第49-51页
第三章 结果与分析第51-73页
   ·黑暗条件下,持续淹水胁迫对胚芽鞘生长速度的影响第51页
   ·持续淹水胁迫对胚芽鞘细胞结构的影响第51-53页
   ·日本晴胚芽鞘总RNA提取第53-54页
   ·RT-PCR检测不同培养条件下胚芽鞘中ACS基因家族,ACO基因家族,IPT基因家族,8’-羟化酶的表达差异第54-61页
   ·实时荧光定量PCR检测不同培养条件下胚芽鞘中ACS-2,ACO-6,8’-羟化酶的相对表达差异第61-64页
     ·PCR产物熔解曲线和扩增效率一致性分析第61-63页
     ·基因相对表达差异的比较第63-64页
   ·RNAi表达载体的构建第64-71页
     ·PCR反扩第64-66页
     ·RNAi中间载体质粒抽提第66页
     ·质粒PCR检测第66-67页
     ·MAGIC,构建RNAi表达载体第67-71页
   ·含RNAi的双元表达载体的鉴定第71-73页
     ·植物双元表达载体的PCR鉴定第71页
     ·双酶切鉴定第71-73页
第四章 讨论与展望第73-75页
参考文献第75-80页
致谢第80页

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