| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·巴斯德毕赤酵母简介 | 第7-12页 |
| ·毕赤酵母表达系统的特点 | 第7页 |
| ·毕赤酵母对甲醇的利用 | 第7-9页 |
| ·酵母和哺乳动物细胞的 N-糖基化过程及改造工作的研究进程 | 第9-10页 |
| ·内质网α-1,3-甘露糖转移酶（ALG3） | 第10-12页 |
| ·Cre-Lox 重组系统 | 第12-13页 |
| ·粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF） | 第13页 |
| ·课题主要研究背景及内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-29页 |
| ·材料 | 第15-17页 |
| ·菌种和载体 | 第15页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·主要培养基和试剂溶液的配制 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-29页 |
| ·野生型 P. pastoris X33 和 X-33（ och1）菌株生长状态的考察 | 第17-18页 |
| ·构建 ALG3 基因敲除载体 | 第18-23页 |
| ·ALG3 基因的敲除 | 第23-25页 |
| ·OCH1 和 ALG3 双基因缺失菌株 X33OA 生长状态的探究 | 第25-26页 |
| ·报告蛋白 GM-CSF 在野生 X33、X-33（ och1）菌株和 X33OA 菌株 中的表达 | 第26-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-45页 |
| ·结果 | 第29-43页 |
| ·X-33（ och1）菌株的生长条件的优化 | 第29-33页 |
| ·ALG3 基因敲除载体的构建及鉴定 | 第33-35页 |
| ·OCH1 和 ALG3 双基因缺失菌株的获得 | 第35-37页 |
| ·OCH1 和 ALG3 双基因缺失菌株 X33OA 的生理研究 | 第37-40页 |
| ·OCH1 和 ALG3 双基因缺失菌株 X33OA 对 GM-CSF 的表达 | 第40-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 结论与展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
