| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·植物广谱抗病研究进展 | 第11-14页 |
| ·植物天然免疫系统 | 第11页 |
| ·植物广谱抗病基因研究进展 | 第11-13页 |
| ·植物抗病信号转导 | 第13-14页 |
| ·依赖SA的系统获得性抗性信号路径 | 第13页 |
| ·依赖JA的抗性信号路径 | 第13-14页 |
| ·植物抗黄萎病分子机制研究进展 | 第14-15页 |
| ·植物中的黄素单加氧酶 | 第15-18页 |
| ·拟南芥YUCCA基因家族 | 第16-17页 |
| ·FMO1(AtFMO1)基因 | 第17页 |
| ·FMO1在EDS1/PAD4介导的抗病信号途径中的作用 | 第17页 |
| ·FMO1在SAR中的作用 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 棉花广谱响应真菌侵染基因的分离与鉴定 | 第19-36页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·病原菌 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-21页 |
| ·拟南芥广谱响应真菌侵染基因的分离 | 第19页 |
| ·Gene Ontology基因功能富集分析 | 第19页 |
| ·棉花广谱响应真菌侵染基因的分离 | 第19页 |
| ·病原菌培养 | 第19-20页 |
| ·棉花接种处理及激素JA处理 | 第20页 |
| ·RNA的提取及纯化 | 第20页 |
| ·RNA的反转录 | 第20页 |
| ·Real time PCR | 第20-21页 |
| ·结果和分析 | 第21-34页 |
| ·利用GENEVESTIGATOR分离拟南芥广谱响应真菌侵染基因 | 第21页 |
| ·拟南芥广谱响应真菌侵染基因的GO功能聚类 | 第21-22页 |
| ·同源法分离棉花中广谱响应真菌侵染的候选基因 | 第22页 |
| ·棉花广谱响应侵染候选基因的表达分析 | 第22-33页 |
| ·棉花和拟南芥广谱响应侵染候选基因的表达模式比较分析 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·分离获得拟南芥广谱响应真菌侵染的基因 | 第34-35页 |
| ·同源序列法分离到棉花广谱响应真菌侵染的候选基因 | 第35页 |
| ·棉花和拟南芥受真菌病原菌诱导后表达模式不一致的原因 | 第35-36页 |
| 第三章 陆地棉FMO1基因的克隆及在本氏烟中的功能验证 | 第36-59页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·基因来源 | 第36页 |
| ·菌株和载体 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-43页 |
| ·GhFMO1全长的获得 | 第36-37页 |
| ·快速扩增cDNA 5’末端(5’-RACE) | 第36-37页 |
| ·快速扩增cDNA 3’末端(3’-RACE) | 第37页 |
| ·基因全长扩增 | 第37页 |
| ·GhFMO1生物信息学分析 | 第37-38页 |
| ·组织表达模式分析 | 第38页 |
| ·超表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·运用Gateway技术构建表达载体 | 第38-39页 |
| ·超量表达载体pGWB408-GhFMO1的构建 | 第39页 |
| ·农杆菌的转化 | 第39页 |
| ·农杆菌重组质粒的PCR检测 | 第39页 |
| ·GhFMO1超表达转基因烟草的获得 | 第39-40页 |
| ·转基因烟草T0植株的PCR阳性检测 | 第40-41页 |
| ·烟草对卡那霉素的敏感度测试及转基因纯系的获得和筛选 | 第41页 |
| ·转基因烟草GhFMO1基因的表达鉴定 | 第41页 |
| ·转基因烟草中抗病相关基因的表达量分析 | 第41-42页 |
| ·转基因烟草后代的抗病鉴定 | 第42-43页 |
| ·病原菌 | 第42页 |
| ·烟草的土壤种植 | 第42页 |
| ·转基因烟草的接菌鉴定 | 第42页 |
| ·烟草抗病鉴定方法 | 第42-43页 |
| ·转基因烟草的抗逆鉴定 | 第43页 |
| ·结果和分析 | 第43-56页 |
| ·GhFMO1基因序列生物信息学分析 | 第43-46页 |
| ·GhFMO1核苷酸序列分析 | 第43-45页 |
| ·GhFMO1蛋白质保守结构域和进化树分析 | 第45-46页 |
| ·GhFMO1在棉花根部组织优势表达 | 第46页 |
| ·GhFMO1受生物和非生物逆境诱导后表现出不同的表达模式 | 第46-47页 |
| ·超表达载体转化根癌农杆菌EHA105 | 第47-48页 |
| ·GhFMO1超表达转基因本氏烟草的获得与检测 | 第48-49页 |
| ·野生型烟草对卡那霉素的敏感度实验 | 第49页 |
| ·超量表达载体转GhFMO1基因烟草T1代分离比检测 | 第49-50页 |
| ·转基因烟草T2代GhFMO1基因的表达以及SA、JA、ROS路径相关基因的表达量分析 | 第50-52页 |
| ·转GhFMO1基因烟草的抗病性鉴定 | 第52-54页 |
| ·转基因烟草提高烟草对黄萎病菌“V991”的抗性 | 第52-53页 |
| ·转基因烟草提高烟草对灰霉病的抗性 | 第53-54页 |
| ·野生型和转GhFMO1基因烟草对不同的非生物逆境表现出相似的表型 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| ·GhFMO1是从棉花中分离的一个FMO类基因 | 第56页 |
| ·在烟草中超量表达GhFMO1能提高其对真菌的广谱抗性 | 第56-57页 |
| ·转基因烟草可通过参与调控抗病相关路径(SA、JA、ROS)提高对真菌的广谱抗性 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
