| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-32页 |
| ·彩色棉的研究进展 | 第13-17页 |
| ·彩色棉的色彩类型 | 第13-14页 |
| ·彩色棉的色素形成机理 | 第14-15页 |
| ·对天然彩棉的基因挖掘和转基因品质的改良 | 第15-16页 |
| ·利用外源基因改造白色棉纤维颜色 | 第16-17页 |
| ·植物花青素生物合成途径的研究进展 | 第17-30页 |
| ·花青素结构及其生物合成 | 第17-20页 |
| ·花青素生物合成中的结构基因 | 第20-23页 |
| ·查尔酮合成酶 | 第20-21页 |
| ·查耳酮异构酶 | 第21页 |
| ·黄烷酮羟化酶 | 第21-22页 |
| ·类黄酮3’-羟化酶和类黄酮-3’,5’-羟化酶 | 第22页 |
| ·二氢黄酮醇-4-还原酶 | 第22页 |
| ·花青素合成酶和花青素还原酶 | 第22-23页 |
| ·花青素-3-氧葡糖基转移酶 | 第23页 |
| ·花青素生物合成中的调节基因 | 第23页 |
| ·花青素生物合成中的转录因子 | 第23-27页 |
| ·MYB类转录因子 | 第24-25页 |
| ·bHLH类转录因子 | 第25-26页 |
| ·WD40类转录因子 | 第26-27页 |
| ·转录因子对结构基因的调控 | 第27-28页 |
| ·花青素合成相关的基因在植物中的应用 | 第28-29页 |
| ·花青素合成相关基因在花色基因工程中的应用 | 第28页 |
| ·花青素合成相关基因在其它方面的应用 | 第28-29页 |
| ·影响花青素合成的其它因素 | 第29页 |
| ·关于花青素研究的展望 | 第29-30页 |
| ·研究的目的和意义 | 第30页 |
| ·研究拟采取的技术路线 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-54页 |
| ·实验材料 | 第32-36页 |
| ·基因来源 | 第32页 |
| ·棉花材料 | 第32页 |
| ·菌株和载体 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·常用的培养基 | 第33-36页 |
| ·实验方法 | 第36-54页 |
| ·目的基因在棉花中的亚细胞定位分析 | 第36-37页 |
| ·delila和roseal基因分别连eGFP融合表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化 | 第37页 |
| ·愈伤组织细胞的荧光观察和照相 | 第37页 |
| ·目的基因过量表达载体的构建 | 第37-41页 |
| ·运用Gateway(?)技术构建表达载体 | 第38-40页 |
| ·表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第41-42页 |
| ·转基因阳性植株gDNA水平的鉴定 | 第42-45页 |
| ·基因组gDNA的提取及纯化 | 第42-44页 |
| ·转基因植株的gDNA水平的PCR检测 | 第44-45页 |
| ·Southern blot检测转基因植株的拷贝数 | 第45-48页 |
| ·Southern blot探针的制备 | 第45-48页 |
| ·目的基因在转基因棉花中转录水平上的鉴定 | 第48-52页 |
| ·用改良的CTAB法提取棉花不同组织的总RNA | 第48-49页 |
| ·RNA消化、纯化及逆转录反应 | 第49-50页 |
| ·PCR检测逆转录的cDNA完整性 | 第50页 |
| ·Real time-PCR检测基因的表达量 | 第50-52页 |
| ·花青素合成相关的结构基因在转基因棉花中的表达分析 | 第52-53页 |
| ·转基因植株茎尖叶片、苞叶和花蕾中的花青素含量的测定 | 第53页 |
| ·纤维特异启动子启动的转基因棉花纤维中色素的提取与测定分析 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-77页 |
| ·delila和rosea1蛋白在棉花中的亚细胞定位分析 | 第54-58页 |
| ·融合表达载体的构建及检测 | 第54-55页 |
| ·delila和rosea1蛋白在棉花愈伤中的亚细胞定位分析 | 第55-58页 |
| ·利用农杆菌介导法将delila和rosea1基因导入棉花 | 第58-63页 |
| ·delila和rosea1基因过量表达载体的构建与转化农杆菌 | 第58-60页 |
| ·delila和rosea1基因过量表达载体导入棉花 | 第60-61页 |
| ·四个过量表达载体转化效率的统计 | 第61-63页 |
| ·转基因阳性植株的鉴定分析 | 第63-67页 |
| ·转基因阳性单株系Southern blot分析 | 第67-71页 |
| ·delila和rosea1及花青素合成相关基因在转基因棉花中的表达分析 | 第71-75页 |
| ·delila和rosea1在转基因棉花中的表达分析 | 第71-74页 |
| ·花青素合成相关基因在转基因棉花中的表达分析 | 第74-75页 |
| ·花青素的测定分析 | 第75-77页 |
| ·转基因棉纤维中色素的测定 | 第77页 |
| 4 讨论 | 第77-82页 |
| ·农杆菌介导的棉花遗传转化体系的优化 | 第77-79页 |
| ·影响侵染效率及出愈的因素 | 第78页 |
| ·胚性愈伤的诱导、获得的优化 | 第78-79页 |
| ·几种氮元素不同状态在再生体系中的作用 | 第79页 |
| ·delila和rosea1蛋白可能形成复合体后调控棉纤维色素的合成 | 第79-80页 |
| ·转异源基因所存在的问题分析及改良措施分析 | 第80-82页 |
| ·基因资源的选择 | 第80页 |
| ·基因抑制机制的选择 | 第80页 |
| ·转基因植株花色及果实等部位色彩的稳定性 | 第80页 |
| ·利用多基因导入改良植物性状 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
