| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·研究背景 | 第12-13页 |
| ·文献综述 | 第13-22页 |
| ·喹诺酮类抗生素导致关节软骨毒性的特点 | 第14-16页 |
| ·喹诺酮类抗生导致的关节毒性产生的机制 | 第16-18页 |
| ·TNF/TNFR1信号通路研究进展 | 第18-20页 |
| ·内质网信号通路研究进展 | 第20-22页 |
| ·本课题研究思路 | 第22页 |
| ·研究内容和目标 | 第22-23页 |
| 2. 材料和方法 | 第23-38页 |
| ·细胞株 | 第23页 |
| ·实验用药 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-25页 |
| ·主要仪器和设备 | 第25-26页 |
| ·溶液配制 | 第26-28页 |
| ·细胞的培养、传代和冻存 | 第28-29页 |
| ·软骨细胞的鉴定 | 第29-30页 |
| ·MTT法检测细胞的活力 | 第30-31页 |
| ·Annexin-Ⅴ FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第31页 |
| ·实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA的表达 | 第31-35页 |
| ·细胞处理及分组 | 第31-32页 |
| ·总RNA的提取 | 第32页 |
| ·总RNA纯度,浓度及完整性的检测 | 第32页 |
| ·逆转录反应 | 第32-33页 |
| ·实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA表达水平 | 第33-35页 |
| ·Western blot测定TNF/TNFR1和Caspase-12的磷酸化水平 | 第35-37页 |
| ·细胞处理及分组 | 第35页 |
| ·细胞蛋白提取 | 第35页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第35-36页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第36-37页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第37页 |
| ·统计学分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-50页 |
| ·软骨细胞培养 | 第38-39页 |
| ·软骨细胞的鉴定 | 第39-40页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星致关节软骨细胞剂量及时间依赖性毒性作用 | 第40-41页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对软骨细胞凋亡的影响 | 第41-43页 |
| ·RNA质量的鉴定 | 第43-44页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对软骨细胞死亡受体TNF/TNFR1通路相关因子mRNA水平的影响 | 第44-46页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对内质网应激相关因子mRNA水平的影响 | 第46-48页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对软骨细胞抗凋亡因子bcl-2和转录调控因子NF-κB的影响 | 第48-49页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对软骨细胞凋亡相关关键蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-57页 |
| ·软骨细胞培养 | 第50-51页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对TNF/TNFR1信号通路激活的影响 | 第51-53页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对内质网信号通路激活的影响 | 第53-54页 |
| ·氧氟沙星和麻保沙星对抗凋亡因子的影响 | 第54-57页 |
| 5 全文总结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-71页 |
| 附录Ⅰ---研究生简介 | 第68-69页 |
| 附录Ⅱ--实时荧光PCR各基因扩增产物的溶解曲线分析结果 | 第69-71页 |
