树鼩原代肝细胞分离培养及HCV对其感染性研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-26页 |
| ·丙型肝炎与丙型肝炎病毒(HCV) | 第13-16页 |
| ·丙型肝炎的病原学 | 第13-14页 |
| ·丙型肝炎的传播与流行 | 第14页 |
| ·丙型肝炎的自然史 | 第14-15页 |
| ·丙肝的治疗及药物研究进展 | 第15-16页 |
| ·树鼩 | 第16-17页 |
| ·HCV体外培养系统 | 第17-19页 |
| ·原代肝细胞培养 | 第19-24页 |
| ·肝细胞培养方式 | 第19-20页 |
| ·原代肝细胞培养基中的添加物 | 第20-22页 |
| ·原代细胞的纯化 | 第22-23页 |
| ·国内外HCV感染的研究状况 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| ·总实验技术路线图 | 第25-26页 |
| 第二章 树鼩原代肝细胞的分离 | 第26-39页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·材料与方法 | 第26-29页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-29页 |
| ·结果 | 第29-33页 |
| ·最佳的分离方式与条件 | 第29-31页 |
| ·离心方式与肝细胞的获得 | 第31-32页 |
| ·肝细胞分离结果 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-37页 |
| ·肝细胞分离方法 | 第33-34页 |
| ·理想的灌流方式、灌流液的选择及灌流速度 | 第34-35页 |
| ·胶原酶浓度与作用时间 | 第35-36页 |
| ·离心方式 | 第36页 |
| ·其它 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-39页 |
| 第三章 树鼩原代肝细胞的培养、冻存及复苏 | 第39-57页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·材料与方法 | 第39-45页 |
| ·主要材料 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-45页 |
| ·结果 | 第45-53页 |
| ·培养条件的最优化 | 第45-49页 |
| ·树鼩原代肝细胞活力测定结果 | 第49-51页 |
| ·树鼩原代肝细胞的纯化 | 第51页 |
| ·树鼩原代肝细胞的首次传代 | 第51-52页 |
| ·树鼩原代肝细胞最适的冻存与复苏 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| ·培养液成分的最优化 | 第53-54页 |
| ·细胞活力检测 | 第54-55页 |
| ·原代细胞的冻存与复苏 | 第55-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 第四章 HCV对树鼩原代肝细胞的感染性研究 | 第57-73页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·材料与方法 | 第57-65页 |
| ·主要材料 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-65页 |
| ·结果 | 第65-70页 |
| ·HCVcc感染结果 | 第65-67页 |
| ·接种HCVpp-EGFP观察结果 | 第67-68页 |
| ·免疫荧光检测HCV抗原的表达 | 第68-69页 |
| ·荧光素酶检测 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·感染时间与感染滴度 | 第70页 |
| ·定性检测确定感染 | 第70-71页 |
| ·其它 | 第71-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 第五章 结论与展望 | 第73-76页 |
| ·结论 | 第73-74页 |
| ·确定了半原位胶原酶二步灌流法 | 第73页 |
| ·找到适合树鼩原代肝细胞长期培养的培养基 | 第73页 |
| ·建立了比较成熟的树鼩原代肝细胞培养方法 | 第73页 |
| ·初步确定HCV可成功感染树鼩原代肝细胞 | 第73-74页 |
| ·存在问题及课题展望 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 附录A | 第85页 |
