摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
英文缩写词表 | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第13-32页 |
·丙型肝炎与丙型肝炎病毒 | 第13-17页 |
·丙型肝炎简介 | 第13页 |
·丙型肝炎病毒的简介 | 第13-17页 |
·HCV感染动物模型 | 第17-21页 |
·HCV感染动物模型的意义 | 第17页 |
·不同类型HCV感染动物模型 | 第17-21页 |
·丙型肝炎病毒受体 | 第21-27页 |
·CD81 | 第21-23页 |
·低密度脂蛋白受体(LDLr) | 第23-24页 |
·B族I型清道夫受体(SR-BI) | 第24页 |
·DC-SiGN/L-SiGN | 第24-25页 |
·Claudin | 第25-26页 |
·受体表达与发病机制 | 第26-27页 |
·荧光定量PCR技术及其应用 | 第27-29页 |
·荧光实时定量RT-PCR技术的原理 | 第27页 |
·荧光定量PCR的荧光材料 | 第27-29页 |
·荧光定量PCR的应用 | 第29页 |
·本论文研究的目的意义和研究策略 | 第29-32页 |
·本论文研究目的和意义 | 第29-31页 |
·本论文研究策略 | 第31-32页 |
第二章 树鼩中HCV受体基因片段的克隆测序及其分析 | 第32-56页 |
·引言 | 第32-33页 |
·实验技术路线 | 第33-34页 |
·实验材料和方法 | 第34-39页 |
·实验材料 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-39页 |
·数据分析 | 第39页 |
·实验结果 | 第39-49页 |
·核酸序列同源性比较与引物设计 | 第39-40页 |
·树鼩重要受体RT-PCR扩增 | 第40-41页 |
·树鼩重要受体克隆与鉴定 | 第41页 |
·树鼩HCV重要受体核酸测序序列结果 | 第41-43页 |
·树鼩中HCV受体核苷酸序列比对与同源性分析 | 第43-45页 |
·树鼩中HCV受体氨基酸序列比对与差异性分析 | 第45-49页 |
·讨论 | 第49-55页 |
·树鼩中CD81受体与HCV作用的位点分析 | 第49-52页 |
·树鼩中SR-BI受体与HCV作用的位点分析 | 第52-54页 |
·树鼩中Claudin-1受体与HCV作用的位点分析 | 第54-55页 |
·本章小结 | 第55-56页 |
第三章 树鼩中CD81受体基因荧光定量PCR检测方的建立 | 第56-71页 |
·引言 | 第56-57页 |
·实验技术路线图 | 第57-58页 |
·实验材料和方法 | 第58-61页 |
·实验材料 | 第58页 |
·实验方法 | 第58-61页 |
·实验结果 | 第61-66页 |
·Taqman探针荧光定量PCR探针和引物 | 第61页 |
·Taqman探针荧光定量PCR检测方法最佳条件的确定 | 第61-63页 |
·检测方法标准曲线的建立 | 第63页 |
·检测方法重复性和稳定性的验证 | 第63-66页 |
·检测体系灵敏性检测结果 | 第66页 |
·讨论 | 第66-70页 |
·实时定量PCR方法的选择 | 第66-67页 |
·检测方法的标准曲线 | 第67-68页 |
·本方法重复性问题 | 第68-69页 |
·本检测体系的灵敏性 | 第69-70页 |
·本检测体系的特异性 | 第70页 |
·本章小结 | 第70-71页 |
第四章 树鼩原代肝细胞的HCV的感染与CD81受体的检测 | 第71-81页 |
·引言 | 第71-72页 |
·实验技术路线 | 第72-73页 |
·实验材料和实验方法 | 第73-75页 |
·实验材料 | 第73页 |
·实验方法 | 第73-75页 |
·实验结果 | 第75-78页 |
·感染24小时,不同时间收集细胞HCV负链情况的检测 | 第75页 |
·感染24小时,不同时间收集细胞CD81分子的检测 | 第75-76页 |
·感染8、12、16、20小时,不同时间收集细胞检测HCV正负链结果 | 第76-77页 |
·感染8、12、16、20小时,不同时间收集细胞检测CD81分子的检测 | 第77-78页 |
·讨论 | 第78-80页 |
·Taqman探针荧光定量PCR检测模板的问题 | 第78页 |
·用于感染PTH的细胞培养病毒HCVcc | 第78-79页 |
·CD81的变化与树鼩的体外感染 | 第79-80页 |
·存在的问题 | 第80页 |
·本章小结 | 第80-81页 |
第五章 结论 | 第81-83页 |
·成功扩增了树鼩中HCV重要受体,并完成了体外克隆与测序 | 第81页 |
·完成了树鼩中HCV受体核苷酸序列比对与同源性分析 | 第81页 |
·完成了树鼩中HCV受体氨基酸序列比对与差异性分析 | 第81页 |
·建立了树鼩中CD81分子Taqman探针荧光定量PCR检测方法 | 第81-82页 |
·树鼩原代肝细胞感染与CD81表达量的关系 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-89页 |
附录A | 第89页 |