摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第一章 绪论 | 第14-35页 |
·丙型肝炎及其危害性 | 第14页 |
·丙型肝炎疫苗的研究现状 | 第14-18页 |
·重组亚单位疫苗与多肤疫苗 | 第15-16页 |
·重组病毒载体疫苗 | 第16页 |
·DNA疫苗 | 第16-17页 |
·转基因植物疫苗 | 第17页 |
·病毒样颗粒疫苗(VPL疫苗) | 第17-18页 |
·可能的丙型肝炎动物模型——树鼩 | 第18-20页 |
·树鼦简介 | 第18-19页 |
·树鼩动物模型 | 第19页 |
·树鼦在丙型肝炎中的应用 | 第19-20页 |
·免疫球蛋白及其制备技术 | 第20-26页 |
·免疫球蛋白与抗体 | 第20-21页 |
·免疫球蛋白的分子结构及分类 | 第21-24页 |
·免疫球蛋白的制备技术 | 第24-26页 |
·多克隆和单克隆抗体技术 | 第26-33页 |
·抗体形成机理 | 第26-27页 |
·影响抗体产生的因素 | 第27-28页 |
·多克隆抗体的制备 | 第28-30页 |
·单克隆抗体(Mono-clonal antibody,McAb) | 第30-33页 |
·本研究的意义和目的 | 第33-34页 |
·研究路线图 | 第34-35页 |
第二章 树鼩血清免疫球蛋白的纯化与鉴定 | 第35-49页 |
·引言 | 第35页 |
·材料和方法 | 第35-40页 |
·实验材料 | 第35-37页 |
·树鼦血清的制备 | 第37页 |
·免疫球蛋白的分离、纯化 | 第37-39页 |
·蛋白纯度测定 | 第39-40页 |
·分子量的测定 | 第40页 |
·结果 | 第40-46页 |
·树鼩血清免疫球蛋白Sephacryl-S200柱层析 | 第40-41页 |
·DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析 | 第41-42页 |
·蛋白含量测定 | 第42-43页 |
·变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第43-44页 |
·分子量的测定结果 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-49页 |
·分离策略的选择 | 第46-47页 |
·蛋白质的检测 | 第47-48页 |
·提纯蛋白的保存 | 第48-49页 |
第三章 兔抗树鼦血清免疫球蛋白G多克隆抗体的制备 | 第49-64页 |
·引言 | 第49页 |
·材料和方法 | 第49-55页 |
·实验材料 | 第49-50页 |
·免疫抗血清的制备 | 第50页 |
·双相琼脂扩散检测多克隆抗体的效价 | 第50-51页 |
·间接ELISA法检测多克隆抗体的效价 | 第51-53页 |
·酶标记羊抗兔抗体最佳工作浓度的选择 | 第53页 |
·抗原抗体最佳包被量的确定 | 第53页 |
·多克隆抗体的制备及保存 | 第53-54页 |
·免疫印迹试验(western-blotting)检测多克隆抗体的特异性 | 第54-55页 |
·结果 | 第55-60页 |
·双相琼脂扩散检测多克隆抗体的效价 | 第55-56页 |
·间接ELISA法检测多克隆抗体的效价 | 第56-58页 |
·酶标记羊抗兔抗体最佳工作浓度的选择 | 第58-59页 |
·抗原抗体最佳包被量的确定 | 第59-60页 |
·Western-blotting检测多克隆抗体的特异性 | 第60页 |
·讨论 | 第60-64页 |
·多克隆抗体 | 第60-62页 |
·双相琼脂扩散 | 第62页 |
·ELISA实验条件的优化 | 第62页 |
·免疫印迹 | 第62-64页 |
第四章 单克隆抗体的初步制备 | 第64-76页 |
·引言 | 第64页 |
·材料与方法 | 第64-70页 |
·实验材料 | 第64-65页 |
·免疫BALB/c小鼠 | 第65-66页 |
·SP2/0细胞的复苏与冻存 | 第66-67页 |
·饲养细胞的制备 | 第67页 |
·脾细胞的制备 | 第67-68页 |
·细胞融合 | 第68-69页 |
·杂交细胞的维护与增殖 | 第69页 |
·杂交瘤的检测 | 第69-70页 |
·结果 | 第70-74页 |
·讨论 | 第74-76页 |
第五章 结论 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
附录A | 第86页 |