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树鼩IgG分离纯化与抗体制备

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第一章 绪论第14-35页
   ·丙型肝炎及其危害性第14页
   ·丙型肝炎疫苗的研究现状第14-18页
     ·重组亚单位疫苗与多肤疫苗第15-16页
     ·重组病毒载体疫苗第16页
     ·DNA疫苗第16-17页
     ·转基因植物疫苗第17页
     ·病毒样颗粒疫苗(VPL疫苗)第17-18页
   ·可能的丙型肝炎动物模型——树鼩第18-20页
     ·树鼦简介第18-19页
     ·树鼩动物模型第19页
     ·树鼦在丙型肝炎中的应用第19-20页
   ·免疫球蛋白及其制备技术第20-26页
     ·免疫球蛋白与抗体第20-21页
     ·免疫球蛋白的分子结构及分类第21-24页
     ·免疫球蛋白的制备技术第24-26页
   ·多克隆和单克隆抗体技术第26-33页
     ·抗体形成机理第26-27页
     ·影响抗体产生的因素第27-28页
     ·多克隆抗体的制备第28-30页
     ·单克隆抗体(Mono-clonal antibody,McAb)第30-33页
   ·本研究的意义和目的第33-34页
   ·研究路线图第34-35页
第二章 树鼩血清免疫球蛋白的纯化与鉴定第35-49页
   ·引言第35页
   ·材料和方法第35-40页
     ·实验材料第35-37页
     ·树鼦血清的制备第37页
     ·免疫球蛋白的分离、纯化第37-39页
     ·蛋白纯度测定第39-40页
     ·分子量的测定第40页
   ·结果第40-46页
     ·树鼩血清免疫球蛋白Sephacryl-S200柱层析第40-41页
     ·DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析第41-42页
     ·蛋白含量测定第42-43页
     ·变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳第43-44页
     ·分子量的测定结果第44-46页
   ·讨论第46-49页
     ·分离策略的选择第46-47页
     ·蛋白质的检测第47-48页
     ·提纯蛋白的保存第48-49页
第三章 兔抗树鼦血清免疫球蛋白G多克隆抗体的制备第49-64页
   ·引言第49页
   ·材料和方法第49-55页
     ·实验材料第49-50页
     ·免疫抗血清的制备第50页
     ·双相琼脂扩散检测多克隆抗体的效价第50-51页
     ·间接ELISA法检测多克隆抗体的效价第51-53页
     ·酶标记羊抗兔抗体最佳工作浓度的选择第53页
     ·抗原抗体最佳包被量的确定第53页
     ·多克隆抗体的制备及保存第53-54页
     ·免疫印迹试验(western-blotting)检测多克隆抗体的特异性第54-55页
   ·结果第55-60页
     ·双相琼脂扩散检测多克隆抗体的效价第55-56页
     ·间接ELISA法检测多克隆抗体的效价第56-58页
     ·酶标记羊抗兔抗体最佳工作浓度的选择第58-59页
     ·抗原抗体最佳包被量的确定第59-60页
     ·Western-blotting检测多克隆抗体的特异性第60页
   ·讨论第60-64页
     ·多克隆抗体第60-62页
     ·双相琼脂扩散第62页
     ·ELISA实验条件的优化第62页
     ·免疫印迹第62-64页
第四章 单克隆抗体的初步制备第64-76页
   ·引言第64页
   ·材料与方法第64-70页
     ·实验材料第64-65页
     ·免疫BALB/c小鼠第65-66页
     ·SP2/0细胞的复苏与冻存第66-67页
     ·饲养细胞的制备第67页
     ·脾细胞的制备第67-68页
     ·细胞融合第68-69页
     ·杂交细胞的维护与增殖第69页
     ·杂交瘤的检测第69-70页
   ·结果第70-74页
   ·讨论第74-76页
第五章 结论第76-77页
致谢第77-78页
参考文献第78-86页
附录A第86页

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