| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 1、前列腺癌雄激素非依赖性简介及分泌蛋白质组学研究方法 | 第13-14页 |
| 2、线粒体肌酸激酶及其与肿瘤的关系简介 | 第14-16页 |
| 3、活性氧与前列腺癌侵袭性的关系 | 第16-18页 |
| 实验材料 | 第18-23页 |
| 1.细胞系和引物 | 第18页 |
| 2.主要化学试剂及实验材料 | 第18-19页 |
| 3.工具酶、抗体、菌株、质粒载体及主要试剂盒 | 第19-20页 |
| 4.主要仪器及设备 | 第20-21页 |
| 5.主要溶液配制 | 第21-22页 |
| 6. 实验中使用的软件 | 第22-23页 |
| 实验方法 | 第23-33页 |
| 1. 细胞培养 | 第23页 |
| 2. 质粒构建 | 第23-24页 |
| 3. LDH试剂盒使用方法 | 第24页 |
| 4. 细胞拥挤的操作步骤 | 第24页 |
| 5. 免疫组化 | 第24-33页 |
| 结果 | 第33-61页 |
| 1 基于双向电泳的前列腺癌细胞系分泌蛋白质组比较研究 | 第33-42页 |
| ·前列腺癌细胞系分泌蛋白质组双向电泳图谱的建立、分析与蛋白质鉴定 | 第33-38页 |
| ·LNCaP、C4-2 和C4-28 分泌蛋白质组双向电泳图谱的建立 | 第33-35页 |
| ·差异蛋白的比较和质谱鉴定 | 第35-38页 |
| ·所鉴定蛋白质的细胞定位及功能分类情况 | 第38页 |
| ·对部分相关基因表达的比较与分析 | 第38-39页 |
| ·对部分所鉴定的胞外蛋白进行细胞胞外验证 | 第39-42页 |
| ·表达载体构建并转染293 细胞，看其是否可在胞外得到检测 | 第39-41页 |
| ·载体构建 | 第39-40页 |
| ·转染表达 | 第40-41页 |
| ·利用抗体进行胞外蛋白表达鉴定 | 第41-42页 |
| 2 相关差异表达蛋白质功能研究 | 第42-61页 |
| ·uMtCK 在前列腺癌细胞系中的表达分析、功能研究与机制初探 | 第42-58页 |
| ·uMtCK 在前列腺癌细胞系中的表达分析 | 第44-48页 |
| ·uMtCK 在雄激素非依赖性的C4-2 中表达升高 | 第44-45页 |
| ·uMtCK 在雄激素受体阴性前列腺癌细胞系中表达降低 | 第45页 |
| ·uMtCK 在前列腺癌及良性前列腺组织中的表达情况 | 第45-47页 |
| ·uMtCK 在LNCaP 等细胞中所受调控的情况 | 第47-48页 |
| ·uMtCK 受到R1881 的下调 | 第47页 |
| ·uMtCK 受到Bicalutamide 的上调 | 第47-48页 |
| ·uMtCK 在细胞拥挤的压力条件下上调 | 第48页 |
| ·uMtCK 在前列腺癌细胞系中的功能研究 | 第48-54页 |
| ·建立稳定高表达uMtCK 的LNCaP 细胞系 | 第48-50页 |
| ·构建pcDNA3.1/myc-His(-) B-uMtCK 载体 | 第49页 |
| ·建立稳定高表达uMtCK 的LNCaP 细胞系 | 第49-50页 |
| ·高表达uMtCK 促进LNCaP 细胞的生长 | 第50-52页 |
| ·高表达uMtCK 的LNCaP-uMtCK 细胞受Bicalutamide 药物的抑制作用相对较弱 | 第52-53页 |
| ·高表达uMtCK 的LNCaP-uMtCK 细胞及对照细胞对顺铂的反应 | 第53-54页 |
| ·uMtCK 促进LNCaP 细胞生长及雄激素非依赖性的机制初探 | 第54-58页 |
| ·高表达uMtCK 的LNCaP-uMtCK 细胞线粒体膜电位及活性氧水平升高 | 第54-55页 |
| ·高表达uMtCK 的LNCaP-uMtCK 细胞雄激素受体表达量及活性的变化 | 第55-56页 |
| ·高表达uMtCK 的LNCaP-uMtCK 细胞雄激素受体表达量降低 | 第55页 |
| ·高表达uMtCK 的LNCaP-uMtCK 细胞雄激素受体活性的变化 | 第55-56页 |
| ·长期传代后，高表达uMtCK 的LNCaP-uMtCK 细胞出现染色体的增倍 | 第56-57页 |
| ·高表达uMtCK 的LNCaP-uMtCK 细胞中Akt 活性的检测与比较 | 第57-58页 |
| ·PGK1 在前列腺癌细胞系中的表达分析 | 第58-61页 |
| ·PGK1 在C4-2 中的表达高于LNCaP 细胞 | 第58-59页 |
| ·PGK1 在LNCaP 细胞中受到R1881 的上调 | 第59-61页 |
| 讨论 | 第61-72页 |
| 1 基于双向电泳的前列腺癌细胞系分泌蛋白质组比较研究 | 第61-66页 |
| ·蛋白质组学技术在分泌蛋白质组中的应用 | 第61-62页 |
| ·前列腺癌细胞系胞外差异蛋白的鉴定与比较 | 第62-66页 |
| 2 相关蛋白的表达分析与功能研究 | 第66-72页 |
| ·uMtCK 对前列腺癌发展的促进作用及其机制初探 | 第66-70页 |
| ·PGK1 在前列腺癌细胞中的表达与分析 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-84页 |
| 附录 | 第84-86页 |
| 文献综述 | 第86-92页 |
| 参考文献 | 第90-92页 |
| 个人简历 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
