| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 前言 | 第7-10页 |
| 实验材料 | 第10-17页 |
| 1. 试剂 | 第10-12页 |
| 2. 抑制剂及其他 | 第12页 |
| 3. 引物 | 第12-13页 |
| 4. 质粒载体 | 第13-15页 |
| 5. 菌株和细胞株 | 第15页 |
| 6. 疟原虫虫株 | 第15页 |
| 7. 主要仪器设备 | 第15-16页 |
| 8. 分析软件 | 第16-17页 |
| 实验方法 | 第17-38页 |
| 1. 分子生物学实验方法 | 第17-22页 |
| 2. RNA制备和cDNA合成 | 第22-23页 |
| 3. real-time PCR芯片杂交 | 第23-26页 |
| 4. 变性条件下的蛋白电泳 | 第26-28页 |
| 5. 重组蛋白纯化 | 第28-29页 |
| 6. 常规ELISA(Enzyme linked immunosorbent assay) | 第29-31页 |
| 7. 酶活性测定 | 第31-33页 |
| 8. 细胞生物学方法 | 第33-35页 |
| 9. Lipofectin2000介导真核细胞瞬时转染 | 第35-36页 |
| 10. 芯片实验前细胞处理过程 | 第36页 |
| 11. 恶性疟原虫体外培养和同步化 | 第36页 |
| 12. Pfmif-pEGFP在293T细胞中的表达与分泌 | 第36-37页 |
| 13. Pfmif在疟原虫感染红细胞中的分泌 | 第37-38页 |
| 实验结果 | 第38-54页 |
| 实验流程图 | 第38-39页 |
| 第一部分 疟原虫MIF分子分泌通路初步研究 | 第39-47页 |
| 1. Pfmif-pET30a的表达与纯化 | 第39页 |
| 2. 在转染Pfmif-pEGFP质粒载体的293T细胞中检测PfMIF分泌通 路 | 第39-45页 |
| 3. 尝试在感染红细胞中使用抑制剂 | 第45-47页 |
| 第二部分 疟原虫MIF分子对小鼠巨噬细胞信号通路的影响 | 第47-54页 |
| 1. 去除重组蛋白的内毒素 | 第47页 |
| 2. 检测重组蛋白的酶活性 | 第47页 |
| 3. real-time PCR芯片结果 | 第47-52页 |
| 4. 半定量RT-PCR验证芯片实验结果 | 第52-54页 |
| 讨论 | 第54-61页 |
| 一、疟原虫MIF分子的分泌途径 | 第54-57页 |
| 二、从芯片结果分析疟原虫MIF分子对宿主免疫细胞的作用 | 第57-60页 |
| 三、从芯片结果分析real time PCR芯片技术 | 第60-61页 |
| 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 文献综述 | 第65-74页 |
| 附录 | 第74-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
