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猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的原核表达及其间接阻断ELISA检测方法的建立

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 文献综述第9-25页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展第9-19页
     ·PRRSV 的分类第9-10页
     ·PRRSV 理化特性第10页
     ·PRRSV 抗原性第10-11页
     ·PRRSV 分子生物学研究进展第11-19页
   ·猪繁殖与呼吸综合征诊断方法研究进展第19-25页
     ·临床诊断第19页
     ·病毒学检查第19-22页
     ·分子生物学诊断技术第22-23页
     ·其它检测技术第23-24页
     ·结语第24-25页
第二章 PRRSV 核衣壳蛋白的克隆与表达第25-36页
   ·材料与方法第25-32页
     ·材料第25-26页
     ·方法第26-32页
   ·结果第32-34页
     ·PRRSV N 蛋白的RT-PCR 扩增及鉴定第32页
     ·重组质粒的双酶切鉴定第32-33页
     ·重组载体的诱导表达第33-34页
     ·重组蛋白的Western blotting 分析第34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
第三章 检测PRRSV 抗体的间接阻断ELISA 方法的建立第36-42页
   ·材料与方法第36-38页
     ·主要免疫学试剂与器材第36页
     ·抗PRRSV N 蛋白单抗第36页
     ·血清样本第36页
     ·包被抗原的制备第36页
     ·间接阻断ELISA 方法的操作第36-38页
   ·结果第38-40页
     ·重组N 蛋白的制备第38页
     ·包被浓度的确定第38页
     ·最适封闭液浓度的确定第38页
     ·最适单抗浓度的确定第38页
     ·最适酶标羊抗鼠二抗浓度的确定第38-39页
     ·最适酶标羊抗猪二抗浓度的确定第39页
     ·判定标准的确定第39页
     ·检测临床猪血清第39页
     ·与Western blotting 检测结果比较第39-40页
     ·与IDEXX 公司试剂盒比较试验第40页
   ·讨论第40-41页
   ·小结第41-42页
第四章 重组GP5 检测PRRSV 抗体间接ELISA 方法的建立第42-49页
   ·材料与方法第42-44页
     ·材料第42页
     ·方法第42-44页
   ·结果第44-46页
     ·重组抗原的诱导表达第44页
     ·Western blotting 分析第44-45页
     ·间接ELISA 方法的建立第45-46页
   ·讨论第46-48页
     ·PRRSV 中国株ORF5 基因重组表达质粒的构建与诱导表达第46页
     ·包涵体的纯化第46-47页
     ·本试验的突出特点第47页
     ·检测结果分析第47-48页
   ·小结第48-49页
参考文献第49-57页
致谢第57-58页
附录第58-67页
 附录 1 主要试剂的配制第58-64页
 附录 2 间接阻断 ELISA 检测猪血清的抑制率第64-67页
个人简历第67页

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