中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
第一篇 文献综述 | 第12-40页 |
第一章 ARID家族的研究概况 | 第12-30页 |
1 ARID家族概况 | 第12-18页 |
·ARID1亚家族 | 第13页 |
·ARID2亚家族 | 第13页 |
·ARID3亚家族 | 第13-14页 |
·ARID4亚家族 | 第14页 |
·ARID5亚家族 | 第14页 |
·JARID1亚家族 | 第14-16页 |
·JARID2亚家族 | 第16页 |
·ARID家族蛋白的DNA结合活性 | 第16-18页 |
2 JARID1C基因的研究进展 | 第18-26页 |
·JARID1C基因的结构和表达 | 第18-19页 |
·JARID1C基因与XLMR | 第19-20页 |
·JARID1C基因与X染色体失活逃逸 | 第20-26页 |
参考文献 | 第26-30页 |
第二章 利用 EST序列克隆新基因及其序列分析策略 | 第30-40页 |
1 基于EST的电子克隆策略 | 第30-34页 |
·电子克隆的基本策略 | 第31-32页 |
·EST序列的获取 | 第32-33页 |
·EST序列拼接软件 | 第33页 |
·EST技术的不足之处及解决对策 | 第33-34页 |
2 核酸序列分析 | 第34-35页 |
·ORF(Open Reading Frame)分析 | 第34页 |
·染色体定位 | 第34页 |
·基因结构分析 | 第34页 |
·基因上游调控区分析 | 第34-35页 |
3 蛋白质结构分析和功能预测 | 第35-37页 |
·蛋白质氨基酸组成、分子量和等电点分析 | 第35页 |
·疏水性分析 | 第35-36页 |
·信号肽预测 | 第36页 |
·跨膜区预测 | 第36页 |
·亚细胞定位预测 | 第36页 |
·蛋白质功能结构域分析 | 第36-37页 |
·蛋白质多序列比对和分子系统发生分析 | 第37页 |
4 小结 | 第37-38页 |
5 本试验研究的目的和意义 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-40页 |
第二篇 试验研究 | 第40-74页 |
第三章 猪JARID1C基因的克隆测序 | 第40-56页 |
1 材料与试剂 | 第40-42页 |
·试验动物 | 第40页 |
·网络资源及软件 | 第40页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第40-41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·主要溶液及其配制 | 第41-42页 |
2 试验方法 | 第42-49页 |
·猪JARID1C基因的电子克隆 | 第42页 |
·引物设计 | 第42-43页 |
·RT-PCR扩增 ORF区 | 第43-46页 |
·5’RACE-PCR扩增5’UTR | 第46-47页 |
·cDNA克隆测序 | 第47-49页 |
3 结果与分析 | 第49-52页 |
·猪EST序列的获取 | 第49-50页 |
·EST序列的拼接 | 第50-51页 |
·RT-PCR扩增 ORF区 | 第51页 |
·5'RACE扩增5'UTR | 第51页 |
3.S PCR产物克隆测序 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
·JARID1C基因的电子克隆 | 第52-53页 |
·RACE技术的优缺点 | 第53页 |
·TOPO TA克隆技术 | 第53-56页 |
第四章 蛋白质序列的生物信息学分析 | 第56-66页 |
1 方法 | 第56-58页 |
·ORF区预测 | 第56页 |
·蛋白质氨基酸组成、分子量和等电点分析 | 第56页 |
·蛋白质疏水性分析 | 第56页 |
·蛋白质信号肽预测 | 第56-57页 |
·跨膜区预测 | 第57页 |
·亚细胞定位预测 | 第57页 |
·蛋白质功能结构域预测 | 第57页 |
·蛋白质氨基酸序列间的多重比对和分子系统发生分析 | 第57-58页 |
2 结果与分析 | 第58-64页 |
·ORF分析 | 第58页 |
·氨基酸组成、分子量和等电点 | 第58页 |
·疏水性分析 | 第58-59页 |
·信号肽分析 | 第59-60页 |
·跨膜区分析 | 第60-61页 |
·亚细胞定位预测 | 第61页 |
·蛋白质结构域预测 | 第61-62页 |
·蛋白质氨基酸序列间的多重比对和分子系统发生分析 | 第62-64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
第五章 猪JARID1C基因的组织表达谱分析 | 第66-74页 |
1 材料与试剂 | 第66页 |
·试验样品 | 第66页 |
·主要试剂 | 第66页 |
·主要仪器 | 第66页 |
·主要溶液及其配制(同第三章) | 第66页 |
2 试验方法 | 第66-68页 |
·引物设计 | 第66-67页 |
·总RNA抽提(同第三章) | 第67页 |
·RNA浓度和纯度检测(同第三章) | 第67页 |
·第一链cDNA合成 | 第67页 |
·GAPDH PCR检测反转录效果 | 第67页 |
·实时定量Real-time PCR | 第67-68页 |
3 结果与分析 | 第68-71页 |
·RNA的纯度和浓度 | 第68-69页 |
·GAPDH检测反转录效果 | 第69页 |
·GAPDH和 JARID1C基因的荧光定量 | 第69-70页 |
·JARID1C基因的组织表达谱分析 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-74页 |
全文结论 | 第74-76页 |
附录一 RACE技术 | 第76-81页 |
1 原理 | 第76-77页 |
2 试验步骤 | 第77-81页 |
附录二 pCR4-TOPO质粒载体 | 第81-84页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第84页 |