LAMP法检测金黄色葡萄球菌
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-24页 |
| ·金黄色葡萄球菌 | 第9-11页 |
| ·生物学特征 | 第9页 |
| ·致病性 | 第9-10页 |
| ·流行病学 | 第10-11页 |
| ·金葡菌的特异性基因 | 第11-13页 |
| ·肠毒素基因 | 第11页 |
| ·tst基因 | 第11-12页 |
| ·et基因 | 第12页 |
| ·nuc基因 | 第12页 |
| ·staphopains基因 | 第12-13页 |
| ·coa基因 | 第13页 |
| ·femA, mecA基因 | 第13页 |
| ·金葡菌的核酸检测方法 | 第13-16页 |
| ·核酸探针 | 第14页 |
| ·PCR方法 | 第14页 |
| ·多重PCR | 第14-15页 |
| ·Real-time PCR | 第15-16页 |
| ·LAMP方法 | 第16-23页 |
| ·LAMP的扩增机制 | 第16-18页 |
| ·LAMP引物的设计原则 | 第18-20页 |
| ·LAMP方法的反应体系和反应条件 | 第20页 |
| ·LAMP反应产物的检测 | 第20-21页 |
| ·环引物的应用 | 第21页 |
| ·LAMP方法的特点 | 第21页 |
| ·LAMP的应用 | 第21-23页 |
| ·本文研究目的与研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第24-32页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·主要药品 | 第25-26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-32页 |
| ·金葡菌的保藏、活化和培养 | 第27-28页 |
| ·金葡菌生长曲线的测定 | 第28页 |
| ·金葡菌的计数方法 | 第28-29页 |
| ·金葡菌染色体DNA提取和定量测定 | 第29-30页 |
| ·金葡菌细胞裂解液的制备方法 | 第30页 |
| ·PCR反应 | 第30-31页 |
| ·LAMP 反应 | 第31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-50页 |
| ·金葡菌的生长曲线 | 第32-33页 |
| ·金葡菌生物量的测定 | 第33-34页 |
| ·DNA的提取及定量 | 第34-35页 |
| ·DNA提取方法比较 | 第34-35页 |
| ·DNA的定量 | 第35页 |
| ·金葡菌检测靶基因的选择及引物设计 | 第35-37页 |
| ·金葡菌检测靶基因的选择 | 第35页 |
| ·nuc基因的引物设计 | 第35-37页 |
| ·LAMP反应体系和反应条件优化 | 第37-41页 |
| ·dNTP浓度对LAMP的影响 | 第38页 |
| ·甜菜碱浓度对LAMP的影响 | 第38-39页 |
| ·Mg~(2+)浓度对LAMP的影响 | 第39-40页 |
| ·反应时间对LAMP的影响 | 第40-41页 |
| ·LAMP方法的特异性 | 第41-42页 |
| ·LAMP方法的灵敏度 | 第42-50页 |
| ·第一套LAMP引物的灵敏度 | 第42-45页 |
| ·第二套LAMP引物的灵敏度 | 第45-50页 |
| 第四章 结论与展望 | 第50-51页 |
| ·主要结论 | 第50页 |
| ·展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57页 |