| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-38页 |
| 1.斜纹夜蛾抗药性的发生概况及其机理 | 第17-18页 |
| 2.昆虫抗药性的生理生化机制 | 第18-35页 |
| ·表皮穿透速率降低 | 第19页 |
| ·代谢抗性研究进展 | 第19-26页 |
| ·多功能氧化酶系(MFOs) | 第19-23页 |
| ·P450基因的多样性及其结构特征 | 第20-21页 |
| ·昆虫细胞色素P450基因的过量表达与抗药性 | 第21-23页 |
| ·昆虫细胞色素P450基因的结构改变与抗药性 | 第23页 |
| ·酯酶 | 第23-26页 |
| ·羧酸酯酶的基因结构特征 | 第24-25页 |
| ·酯酶在害虫抗药性中的作用 | 第25-26页 |
| ·酯酶基因扩增 | 第25页 |
| ·酯酶基因的突变 | 第25-26页 |
| ·酯酶基因mRNA表达量的增加 | 第26页 |
| ·谷胱甘肽-S-转移酶 | 第26页 |
| ·杀虫剂靶标与抗药性的关系 | 第26-35页 |
| ·钠离子通道 | 第27-31页 |
| ·钠离子通道的结构及其与拟除虫菊酯类杀虫剂的相互作用 | 第27-28页 |
| ·击倒抗性的分子机理 | 第28-31页 |
| ·乙酰胆碱酯酶 | 第31-35页 |
| 3 斜纹夜蛾的抗性治理对策 | 第35-37页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| 第二章 斜纹夜蛾对常用杀虫剂的相对敏感毒力基线及抗药性监测 | 第38-47页 |
| 1 材料与方法 | 第39-40页 |
| ·供试虫源 | 第39页 |
| ·供试药剂 | 第39-40页 |
| ·毒力测定方法 | 第40页 |
| ·点滴法： | 第40页 |
| ·浸叶法： | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-46页 |
| ·敏感品系的验证 | 第40-41页 |
| ·斜纹夜蛾对常用杀虫剂相对敏感毒力基线的建立 | 第41-43页 |
| ·抗药性监测 | 第43-46页 |
| 3 讨论： | 第46-47页 |
| 第三章 斜纹夜蛾抗溴氰菊酯品系的相对适合度和抗性遗传方式研究 | 第47-54页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| ·供试昆虫及药剂 | 第47-48页 |
| ·毒力测定方法 | 第48页 |
| ·种群生命表的组建 | 第48页 |
| ·抗性遗传分析方法 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-52页 |
| ·溴氰菊酯抗性斜纹夜蛾的相对生物适合度 | 第49-51页 |
| ·抗性遗传特性分析 | 第51-52页 |
| ·抗性基因的染色体遗传 | 第51页 |
| ·抗性基因的显、隐性 | 第51-52页 |
| ·抗性的单基因或多基因遗传 | 第52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 斜纹夜蛾抗药性的生化机制研究 | 第54-68页 |
| 1 材料与方法 | 第55-58页 |
| ·供试虫源 | 第55页 |
| ·供试药剂 | 第55-56页 |
| ·毒力测定及增效剂的增效作用测定 | 第56页 |
| ·离体酶活性测定 | 第56-58页 |
| ·酶液制备 | 第56页 |
| ·酯酶活性测定 | 第56-57页 |
| ·多功能氧化酶的O-脱甲基活力(PNOD)测定 | 第57页 |
| ·谷胱甘肽S—转移酶(GST)活性测定 | 第57页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的动力学参数和抑制中浓度(I_(50))测定 | 第57页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第57-58页 |
| ·数据分析 | 第58页 |
| ·斜纹夜蛾para型钠离子通道基因ⅡS4-ⅡS6区域的克隆 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-66页 |
| ·斜纹夜蛾对常规药剂的抗性水平与交互抗性 | 第58-61页 |
| ·增效剂TPP、PBO和DEM的增效作用测定 | 第61页 |
| ·代谢酶活性测定 | 第61-63页 |
| ·乙酰胆碱酯酶的动力学参数及敏感性的测定 | 第63-65页 |
| ·斜纹夜蛾钠离子通道基因ⅡS4-ⅡS6的序列分析 | 第65-66页 |
| 3.讨论 | 第66-68页 |
| 第五章 斜纹夜蛾细胞色素P450基因的克隆与定量分析 | 第68-94页 |
| 1 材料与方法 | 第69-76页 |
| ·供试昆虫 | 第69页 |
| ·总RNA的制备 | 第69-70页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第70页 |
| ·引物设计及细胞色素P450 cDNA片段的PCR扩增 | 第70-71页 |
| ·PCR产物的纯化、克隆及测序测定 | 第71-72页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第71页 |
| ·连接反应 | 第71页 |
| ·转化 | 第71-72页 |
| ·单克隆的挑选 | 第72页 |
| ·小量质粒DNA的提取与酶切检测 | 第72页 |
| ·序列测定 | 第72页 |
| ·细胞色素P450基因全长的克隆 | 第72-74页 |
| ·斜纹夜蛾细胞色素P450基因分子树的构建和系统发育分析 | 第74页 |
| ·斜纹夜蛾细胞色素P450基因的定量分析 | 第74-76页 |
| ·总RNA的提取： | 第74-75页 |
| ·引物设计 | 第75页 |
| ·实时荧光定量PCR反应 | 第75页 |
| ·实时荧光定量PCR反应效率的确定 | 第75-76页 |
| ·斜纹夜蛾P450基因mRNA表达量比较 | 第76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-91页 |
| ·斜纹夜蛾CYP4基因cDNA片段的克隆与分析 | 第76-78页 |
| ·斜纹夜蛾重要CYP4基因全长cDNA的克隆与分析 | 第78-85页 |
| ·PCR产物熔解曲线及荧光定量PCR扩增效率一致性分析 | 第85-91页 |
| 3 讨论 | 第91-94页 |
| ·CYP4家族P450基因的多样性 | 第91页 |
| ·细胞色素P450基因的过量表达与昆虫抗药性的关系 | 第91-94页 |
| 第六章 斜纹夜蛾酯酶的生化特性及其酯酶基因的相对表达水平研究 | 第94-115页 |
| 1 材料与方法 | 第95-100页 |
| ·供试昆虫 | 第95页 |
| ·主要试剂 | 第95页 |
| ·酶液制备 | 第95页 |
| ·酯酶动力学参数K_m和V_(max)的测定 | 第95-96页 |
| ·酯酶的抑制试验 | 第96页 |
| ·酯酶非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第96页 |
| ·斜纹夜蛾酯酶的亚细胞分布 | 第96-97页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第97页 |
| ·斜纹夜蛾酯酶基因cDNA克隆 | 第97页 |
| ·斜纹夜蛾酯酶基因Slest2全长的克隆 | 第97-100页 |
| 2 结果与分析 | 第100-112页 |
| ·斜纹夜蛾抗性和敏感品系的酯酶动力学参数的比较 | 第100-101页 |
| ·斜纹夜蛾抗性和敏感品系酯酶的亚细胞分布 | 第101-102页 |
| ·溴氰菊酯和丙溴磷对斜纹夜蛾酯酶的抑制效应 | 第102-104页 |
| ·酯酶非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第104页 |
| ·斜纹夜蛾酯酶基因cDNA片段的克隆 | 第104-105页 |
| ·斜纹夜蛾酷酶基因Slest2的全长序列分析 | 第105-109页 |
| ·PCR产物熔解曲线及荧光定量PCR扩增效率一致性分析 | 第109-111页 |
| ·斜纹夜蛾酯酶基因相对表达量和拷贝数的比较 | 第111-112页 |
| 3 讨论 | 第112-115页 |
| 全文总结 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-138页 |
| 附录：攻读博士学位期间学术论文的发表情况 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
