| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACR | 第7-9页 |
| 英文缩写词 | 第9-18页 |
| 1前言 | 第18-21页 |
| 2材料与方法 | 第21-32页 |
| ·材料 | 第21-23页 |
| ·引物合成 | 第21页 |
| ·菌株、细胞株、质粒和文库 | 第21页 |
| ·酵母双杂交实验常用试剂 | 第21页 |
| ·菌株培养 | 第21-22页 |
| ·细胞培养试剂 | 第22页 |
| ·细胞和细胞培养 | 第22页 |
| ·常用分子生物学试剂 | 第22页 |
| ·常用分子生物学试剂盒 | 第22页 |
| ·抗体 | 第22-23页 |
| ·常规无机盐试剂 | 第23页 |
| ·大型仪器 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-32页 |
| ·载体的构建 | 第23-25页 |
| ·酵母双杂交(Yeasttwo-hybrid) | 第25-29页 |
| ·哺乳动物细胞转染 | 第29页 |
| ·Westernblot分析 | 第29页 |
| ·浓缩细胞上清液 | 第29页 |
| ·GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第29-30页 |
| ·His融合蛋白的纯化 | 第30页 |
| ·GSTpull-downassay | 第30-32页 |
| 3结果 | 第32-41页 |
| ·酵母双杂交筛选与ERΒ相互作用的蛋白质 | 第32-35页 |
| ·用于酵母双杂交的pGBK-T7-AF1表达载体的构建及表达 | 第32页 |
| ·用于酵母双杂交的3-AT(3-amin-otriazole)浓度的确定 | 第32-33页 |
| ·乳腺文库的筛选 | 第33-35页 |
| ·表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·GST-ERβ-AF1表达载体的构建 | 第35页 |
| ·His-CTGF和His-NOV表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·pcDNA3-FLAG-CTGF表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第37-39页 |
| ·GST-ERβ-AF1融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第37页 |
| ·His-CTGF和His-NOV融合蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第37-38页 |
| ·pcDNA3-FLAG-CTGF在哺乳动物细胞中的表达 | 第38-39页 |
| ·CTGF与ER的体外结合 | 第39-41页 |
| ·His-CTGF和His-NOV融合蛋白与ER在体外的相互作用 | 第39页 |
| ·pcDNA3-FLAG-CTGF与ERβ在体外的相互作用 | 第39-41页 |
| 4讨论 | 第41-44页 |
| 5结论和研究展望 | 第44-45页 |
| ·结论 | 第44页 |
| ·研究展望 | 第44-45页 |
| 6附录 | 第45-49页 |
| ·克隆 | 第45页 |
| ·引物 | 第45-46页 |
| ·常用溶液 | 第46-49页 |
| 7参考文献 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表文章 | 第52页 |
