| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·体细胞克隆概述 | 第12-14页 |
| ·甲基化综述 | 第14-17页 |
| ·甲基化的维持、去甲基化和重新甲基化 | 第14页 |
| ·甲基化的功能 | 第14-16页 |
| ·DNA 甲基化的检测方法 | 第16-17页 |
| ·DNA 甲基化与体细胞克隆 | 第17-18页 |
| ·Peg10 与H19 基因的结构与功能 | 第18-19页 |
| ·Peg10 | 第18页 |
| ·H19 基因 | 第18-19页 |
| ·本实验的技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 牛同种、异种克隆及体外受精胚胎的制备 | 第20-37页 |
| ·实验材料 | 第20-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·主要化学试剂 | 第21页 |
| ·主要溶液的配制 | 第21-24页 |
| ·显微操作针的拉制 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·牛耳组织的采取 | 第25页 |
| ·耳成纤维细胞的原代培养 | 第25页 |
| ·耳成纤维细胞的传代、冷冻、复苏 | 第25-26页 |
| ·马胎儿成纤维细胞的培养 | 第26-27页 |
| ·克隆胚胎的构建 | 第27-29页 |
| ·牛体外受精 | 第29-30页 |
| ·实验结果 | 第30-34页 |
| ·原代细胞的生长 | 第30-31页 |
| ·传代细胞的生长 | 第31页 |
| ·卵母细胞的成熟 | 第31-32页 |
| ·卵母细胞的去核 | 第32-33页 |
| ·核移植后融合率 | 第33页 |
| ·克隆胚胎的发育 | 第33-34页 |
| ·牛体外受精胚胎的发育 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·结论 | 第36-37页 |
| 第三章 Peg10、H19 基因在同种克隆、体外受精着床前胚胎中的甲基化状态 | 第37-50页 |
| ·材料与方法 | 第37-40页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·实验结果 | 第40-48页 |
| ·CpG 岛的预测及PCR 扩增、克隆、测序 | 第40-42页 |
| ·同种克隆、体外受精胚胎的甲基化状态分析 | 第42-47页 |
| ·Peg10、H19 基因在各时期胚胎中的甲基化水平总结 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·结论 | 第49-50页 |
| 第四章 Peg10、H19 基因在马-牛异种克隆着床前胚胎中的甲基化状态 | 第50-60页 |
| ·材料与方法 | 第50-52页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·实验结果 | 第52-59页 |
| ·CpG 岛的预测及PCR 扩增、克隆、测序 | 第52-54页 |
| ·马-牛异种克隆胚胎的甲基化状态分析 | 第54-57页 |
| ·Peg10、H19 基因在各时期胚胎中的甲基化水平总结 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59页 |
| ·结论 | 第59-60页 |
| 第五章 全文结论 | 第60-61页 |
| ·同种、异种克隆胚以及牛体外受精胚胎的制备 | 第60页 |
| ·Peg10、H19 基因在同种克隆、体外受精胚胎中的甲基化状态 | 第60页 |
| ·Peg10、H19 基因在马-牛异种克隆胚胎中的甲基化状态 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简历 | 第67页 |
