| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·小麦条锈病的危害及研究现状 | 第12-13页 |
| ·小麦条锈病的危害 | 第12页 |
| ·小麦条锈病的研究现状 | 第12-13页 |
| ·植物抗病基因研究进展 | 第13-16页 |
| ·植物抗病性机理 | 第13-14页 |
| ·植物抗病基因的克隆 | 第14页 |
| ·植物抗病基因的结构与功能 | 第14-15页 |
| ·小麦抗病基因的克隆 | 第15-16页 |
| ·植物热激蛋白70 研究进展 | 第16-17页 |
| ·植物热激蛋白70 的特征与功能 | 第16页 |
| ·植物热激蛋白70 与植物的抗病反应 | 第16-17页 |
| ·植物丙氨酸氨基转移酶研究进展 | 第17-18页 |
| ·植物过敏性反应诱导蛋白研究进展 | 第18-20页 |
| ·植物过敏性反应 | 第18-19页 |
| ·植物过敏性反应诱导蛋白研究进展 | 第19-20页 |
| ·CDNA 末端快速扩增技术 | 第20-21页 |
| ·RACE 原理 | 第20-21页 |
| ·RACE 的研究现状 | 第21页 |
| ·生物信息学 | 第21-23页 |
| ·生物信息学的产生和发展 | 第21-22页 |
| ·生物信息学的应用 | 第22-23页 |
| ·研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 小麦热激蛋白70基因TAHSC70的全长CDNA克隆及表达特征分析 | 第24-42页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第24-25页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-32页 |
| ·小麦叶片总RNA 的提取、纯化与质量检测 | 第25-26页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第26页 |
| ·5`-RACE 和3`-RACE 反应 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物与载体的连接 | 第28页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA 的小量制备 | 第29页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·RACE 产物的测序及序列拼接 | 第29-30页 |
| ·序列分析 | 第30-31页 |
| ·表达特征分析 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-40页 |
| ·小麦叶片总RNA 的提取 | 第32页 |
| ·5`-RACE 和3`-RACE 扩增 | 第32-33页 |
| ·序列拼接 | 第33-34页 |
| ·小麦热激蛋白70 基因TaHSC70 序列分析 | 第34-39页 |
| ·半定量RT-PCR 分析 | 第39页 |
| ·实时定量PCR 分析 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| ·RACE 技术 | 第40页 |
| ·小麦热激蛋白70 基因TaHSC70 | 第40-42页 |
| 第三章 小麦丙氨酸氨基转移酶基因TAALAAT1的全长CDNA克隆及表达特征分析 | 第42-52页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·电子克隆 | 第42页 |
| ·RT-PCR 验证 | 第42页 |
| ·序列分析 | 第42页 |
| ·表达特征分析 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-50页 |
| ·电子克隆结果 | 第43页 |
| ·RT-PCR 验证 | 第43-45页 |
| ·小麦丙氨酸氨基转移酶基因TaAlaAT1 序列分析 | 第45-49页 |
| ·半定量RT-PCR 分析 | 第49页 |
| ·实时定量PCR 分析 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·电子克隆技术 | 第50页 |
| ·小麦丙氨酸氨基转移酶基因TaAlaAT1 | 第50-52页 |
| 第四章 小麦过敏性反应诱导蛋白基因TA-HIR1 的原核表达、多克隆抗体制备及WESTERN 杂交分析 | 第52-66页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第52页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-59页 |
| ·小麦过敏性反应诱导蛋白基因Ta-hir1 开放阅读框的克隆 | 第52-53页 |
| ·克隆载体Ta-hir1-pGEM-T 的构建 | 第53页 |
| ·融合表达载体Ta-hir1-pET-32a 的构建 | 第53-55页 |
| ·融合表达载体的转化 | 第55页 |
| ·融合蛋白诱导表达条件的确定 | 第55页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第55-56页 |
| ·融合表达蛋白的纯化 | 第56-57页 |
| ·抗血清的制备 | 第57页 |
| ·抗血清的免疫识别反应及效价测定 | 第57-58页 |
| ·抗体的纯化 | 第58页 |
| ·Western 杂交 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-64页 |
| ·Ta-hir1 开放阅读框的克隆 | 第59页 |
| ·融合表达载体Ta-hir1-pET-32a 的构建 | 第59-61页 |
| ·Ta-hir1 的原核表达 | 第61-63页 |
| ·融合表达蛋白的纯化 | 第63页 |
| ·抗血清的免疫学性质分析 | 第63页 |
| ·抗体的纯化及特异性检测 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| ·原核表达系统 | 第64-65页 |
| ·抗体特异性 | 第65-66页 |
| 第五章 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录1 | 第74-77页 |
| 附录2 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
