| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-27页 |
| ·国内外苜蓿育种工作研究进展 | 第10-11页 |
| ·苜蓿抗病虫害遗传改良基因工程研究进展 | 第11-21页 |
| ·苜蓿病害遗传改良基因工程研究进展 | 第11-18页 |
| ·苜蓿虫害遗传改良基因工程研究进展 | 第18-21页 |
| ·苜蓿基因遗传转化研究进展 | 第21-25页 |
| ·DNA 直接导入的遗传转化技术 | 第21-22页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化法 | 第22-23页 |
| ·苜蓿组织培养途径 | 第23-25页 |
| ·实验设计及目的意义 | 第25-27页 |
| ·实验设计 | 第25-26页 |
| ·实验目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 CpTI 基因的克隆及单价植物表达载体的构建 | 第27-35页 |
| ·材料与方法 | 第27-32页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-35页 |
| ·CpTI 基因的PCR 结果 | 第32页 |
| ·重组质粒pMD-T-CpTI 的鉴定 | 第32页 |
| ·CpTI 基因的序列测定及分析 | 第32-34页 |
| ·植物细胞表达载体的构建和鉴定 | 第34页 |
| ·讨论与分析 | 第34-35页 |
| 第三章 CpTI 基因的原核表达载体的构建及表达 | 第35-41页 |
| ·材料与方法 | 第35-38页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·目的基因克隆载体的构建 | 第38-39页 |
| ·GST-CpTI 在E.coliBL21 的表达 | 第39页 |
| ·讨论与分析 | 第39-41页 |
| 第四章 ChiA 基因的克隆及双价表达载体的构建 | 第41-50页 |
| ·材料与方法 | 第41-44页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·几丁质酶基因的克隆及测序鉴定 | 第44-45页 |
| ·几丁质酶基因序列分析 | 第45-47页 |
| ·双价植物表达载体pC35S1303-ChiA-CpTI 的构建 | 第47-49页 |
| ·讨论与分析 | 第49-50页 |
| 第五章 农杆菌介导的双价植物表达载体pC35S1303-ChiA-CpTI 转化紫花苜蓿 | 第50-55页 |
| ·材料与方法 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·初步结果 | 第52页 |
| ·苜蓿种子不同消毒的方式 | 第52页 |
| ·愈伤诱导结果 | 第52页 |
| ·分析与讨论 | 第52-55页 |
| ·苜蓿种子消毒方法比较 | 第52-53页 |
| ·筛选培养基的选择 | 第53页 |
| ·外植体的选择 | 第53页 |
| ·农杆菌的保存和侵染时菌液浓度 | 第53页 |
| ·共培时间 | 第53-54页 |
| ·多价基因的转化 | 第54-55页 |
| 第六章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
