| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| ·蛋白纯化方法 | 第11-17页 |
| ·根据蛋白质溶解度不同的蛋白沉淀方法 | 第11-12页 |
| ·根据蛋白质分子大小的差别的分离方法 | 第12-13页 |
| ·根据蛋白质带电性质进行分离 | 第13页 |
| ·根据蛋白的疏水性的分离方法 | 第13-14页 |
| ·根据配体特异性的分离方法－亲和层析法 | 第14-17页 |
| ·蛋白标签的去除 | 第17-19页 |
| ·蛋白酶法切除分子标签 | 第17-18页 |
| ·蛋白质内含子自切割法去除融合标签法 | 第18-19页 |
| ·降钙素体外酰胺化方法和酰胺化酶 | 第19-23页 |
| ·降钙素体外酰胺化的方法 | 第19-20页 |
| ·酰胺化酶 | 第20-23页 |
| ·油体蛋白 | 第23-27页 |
| ·油体及结构 | 第23-24页 |
| ·油体蛋白-oleosin | 第24-25页 |
| ·植物油体表达体系 | 第25-27页 |
| 第二章 材料和方法 | 第27-38页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·油菜品种 | 第27页 |
| ·菌株、载体 | 第27页 |
| ·PCR引物 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-38页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第28-29页 |
| ·冻融法回收目的基因片段 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第29页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第29页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态的制备 | 第29-30页 |
| ·质粒DNA的Kit提取 | 第30页 |
| ·将质粒DNA转入农杆菌 | 第30页 |
| ·油菜基因组DNA的小量提取 | 第30-31页 |
| ·油菜基因组RNA的小量提取 | 第31页 |
| ·转基因油菜的Southern检测 | 第31-32页 |
| ·降钙素基因的人工合成 | 第32-33页 |
| ·芝麻oleosin基因的PCR扩增和克隆 | 第33-34页 |
| ·大豆oleosin基因5’端的扩增和克隆 | 第34页 |
| ·大鼠PHM基因的扩增和克隆 | 第34页 |
| ·拟南芥oleosin启动子5’端序列的扩增和克隆 | 第34-35页 |
| ·油菜的遗传转化 | 第35页 |
| ·转基因油菜油体蛋白的提取 | 第35-36页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-38页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第38-70页 |
| ·结果 | 第38-67页 |
| ·转基因油菜籽中降钙素纯化方法的研究 | 第38-44页 |
| ·油体表达体系的优化 | 第44-63页 |
| ·农杆菌介导的油菜遗传转化 | 第63-64页 |
| ·T1 代双价转基因油菜的PCR检测 | 第64页 |
| ·T1 代双价转基因油菜的RT-PCR检测 | 第64-65页 |
| ·T2 代双价转基因油菜的GUS染色检测 | 第65页 |
| ·T2 代双价转基因油菜的PCR检测 | 第65-66页 |
| ·T2 代双价转基因油菜的Southern检测 | 第66页 |
| ·三价转基因油菜的PCR检测 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| ·油菜表达体系中降钙素纯化方法的研究 | 第67-68页 |
| ·降钙素油体表达体系的优化 | 第68-70页 |
| 第四章 全文结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |