| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第15-30页 |
| ·蛋白磷酸酶的研究 | 第15-25页 |
| ·蛋白磷酸酶的发现 | 第15页 |
| ·蛋白磷酸酶的分类、结构及生化特性 | 第15-18页 |
| ·植物PP2C 的生理功能 | 第18-25页 |
| ·生物信息学概述 | 第25-29页 |
| ·生物信息学简介 | 第25-26页 |
| ·Perl 语言简介 | 第26-27页 |
| ·进化树 | 第27-28页 |
| ·基因家族的研究 | 第28-29页 |
| ·本课题研究的目的及意义 | 第29-30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-53页 |
| ·实验材料 | 第30-33页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌株与质粒 | 第30页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第30页 |
| ·PCR 引物 | 第30-31页 |
| ·软件及网络资源 | 第31-33页 |
| ·实验方法 | 第33-51页 |
| ·植物总RNA 的提取及检测 | 第33-35页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第35-36页 |
| ·cDNA 回收纯化 | 第36页 |
| ·cDNA 的5′加尾反应 | 第36-37页 |
| ·cDNA 全长序列的获得 | 第37-39页 |
| ·目的片段的回收 | 第39-40页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第40-41页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·对重组质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·Northern 杂交 | 第43-44页 |
| ·Southern 杂交 | 第44-46页 |
| ·正义表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第47-48页 |
| ·拟南芥的无土栽培、转化及分析 | 第48-51页 |
| ·野生型与转基因拟南芥植株在培养基上萌发及生长情况 | 第51页 |
| ·拟南芥PP2C 基因家族鉴定及基因组学分析 | 第51-53页 |
| ·Clustal 的使用 | 第51-52页 |
| ·Mega4.0 构建系统发生树的方法 | 第52页 |
| ·本地BLAST 方法 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-74页 |
| ·鸢尾蛋白磷酸酶 2C(IrisPP2C1)基因的分离 | 第53-56页 |
| ·鸢尾花RNA 的提取及反转录 | 第53页 |
| ·IrisPP2C1 中间片段的分离 | 第53-54页 |
| ·IrisPP2C1 5′片段的分离 | 第54-55页 |
| ·IrisPP2C1 3′片段的分离 | 第55页 |
| ·IrisPP2C1 全长cDNA 的分离 | 第55-56页 |
| ·IrisPP2C1 序列的分析 | 第56-59页 |
| ·IrisPP2C1 全长cDNA 分析 | 第56页 |
| ·IrisPP2C1 编码蛋白序列的分析 | 第56-58页 |
| ·IrisPP2C1 预测蛋白的跨膜结构分析 | 第58-59页 |
| ·鸢尾 IrisPP2C1 基因的表达分析 | 第59-60页 |
| ·IrisPP2C1 基因的Southern 杂交分析 | 第59-60页 |
| ·IrisPP2C1 对ABA 信号的响应 | 第60页 |
| ·IrisPP2C1 蛋白的亚细胞定位研究 | 第60-62页 |
| ·转基因拟南芥植株的获得及表型观察 | 第62-64页 |
| ·正义表达载体的构建 | 第62页 |
| ·T_1 代转基因植株的鉴定 | 第62-63页 |
| ·转基因植株的形态学变化 | 第63-64页 |
| ·转基因拟南芥在种子萌发和根生长过程中对ABA 的响应 | 第64-65页 |
| ·种子萌发率的检测 | 第64-65页 |
| ·根的生长测定 | 第65页 |
| ·拟南芥中PP2C 家族的成员鉴定及基因组学分析 | 第65-74页 |
| ·拟南芥PP2C 基因的鉴定 | 第65-68页 |
| ·拟南芥PP2C 基因家族进化树分析 | 第68-69页 |
| ·拟南芥PP2C 蛋白质元件的分布 | 第69页 |
| ·PP2C 基因在染色体上的定位和复制分析 | 第69-74页 |
| 4 讨论 | 第74-77页 |
| ·鸢尾 IrisPP2C1 基因及其同源基因之间的序列分析 | 第74页 |
| ·鸢尾 IrisPP2C1 基因的表达和调控 | 第74页 |
| ·鸢尾 IrisPP2C1 基因可能的信号转导机制 | 第74-75页 |
| ·PP2C 家族是拟南芥中的一大类基因家族 | 第75-76页 |
| ·利用 Perl 语言鉴定基因家族的各个成员 | 第76-77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第86页 |
