| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述－动物的模式识别受体与先天性免疫识别 | 第12-40页 |
| ·动物的模式识别受体与先天性免疫识别 | 第12-13页 |
| ·脊椎动物的模式识别受体与免疫识别 | 第13-25页 |
| ·细胞外的免疫识别系统 | 第13-18页 |
| ·补体系统 | 第13-16页 |
| ·Colletin 家族 | 第16-17页 |
| ·Pentraxin 家族 | 第17-18页 |
| ·细胞膜上的模式识别受体 | 第18-23页 |
| ·细胞膜上的C 型凝集素受体 | 第20-21页 |
| ·清道夫受体 | 第21-23页 |
| ·细胞内的模式识别受体 | 第23-25页 |
| ·CARD 螺旋酶家族 | 第23页 |
| ·NLR 螺旋酶家族 | 第23-25页 |
| ·无脊椎动物的模式识别受体与免疫识别 | 第25-35页 |
| ·无脊椎动物的模式识别受体 | 第25-29页 |
| ·肽聚糖识别蛋白 | 第25-26页 |
| ·革兰氏阴性菌结合蛋白 | 第26-27页 |
| ·硫酯蛋白 | 第27页 |
| ·C-型凝集素 | 第27-28页 |
| ·硫依赖型凝集素 | 第28页 |
| ·血素 | 第28-29页 |
| ·无脊椎动物的免疫识别信号系统 | 第29-35页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联反应 | 第29-30页 |
| ·前酚氧化酶激活系统 | 第30-31页 |
| ·凝血系统 | 第31-33页 |
| ·Toll信号通路 | 第33页 |
| ·Imd信号通路 | 第33-35页 |
| ·甲壳动物的免疫机制及模式识别受体的研究 | 第35-38页 |
| ·甲壳动物的免疫机制研究概况 | 第35-36页 |
| ·甲壳动物模式识别受体研究 | 第36页 |
| ·甲壳动物RNA 干扰技术与模式识别受体的研究 | 第36-38页 |
| ·本研究的内容及意义 | 第38-40页 |
| 第二章 甲壳动物RNA 干扰技术建立 | 第40-53页 |
| ·引言 | 第40-41页 |
| ·材料与方法 | 第41-45页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·dsRNA 与单链RNA 的制备 | 第41-42页 |
| ·dsRNA 的酶切鉴定 | 第42页 |
| ·dsRNA 注射及样品采集 | 第42页 |
| ·RNA 提取 | 第42-43页 |
| ·cDNA 第一链合成及PCR 反应 | 第43-45页 |
| ·结果 | 第45-50页 |
| ·dsRNA 的制备 | 第45-46页 |
| ·dsRNA 的鉴定 | 第46页 |
| ·利用RNA 干扰进行对虾和克氏原螯虾基因敲减的有效性 | 第46-48页 |
| ·RNA 干扰的时间效应 | 第48-49页 |
| ·RNA 干扰的系统性 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 克氏原螯虾脂多糖和β-1,3 葡聚糖结合蛋白基因的克隆与功能分析 | 第53-82页 |
| ·引言 | 第53-55页 |
| ·材料与方法 | 第55-64页 |
| ·实验动物 | 第55页 |
| ·PcLGBP 基因片段的同源克隆 | 第55页 |
| ·3’末端的获得 | 第55-56页 |
| ·5’末端的获得 | 第56-57页 |
| ·PCR 产物克隆测序 | 第57-58页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第57页 |
| ·PCR 产物连接 | 第57-58页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第58页 |
| ·序列分析 | 第58页 |
| ·基因表达定量 | 第58-60页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·重组PcLGBP 基因片段的克隆 | 第60页 |
| ·质粒DNA 提取 | 第60-61页 |
| ·酶切及连接 | 第61页 |
| ·重组子转化与重组蛋白的诱导表达、纯化和复性 | 第61-62页 |
| ·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第62页 |
| ·重组蛋白的结合活性分析 | 第62-63页 |
| ·RNA 干扰及细菌侵染实验 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-79页 |
| ·PcLGBP 基因的全长cDNA 克隆及序列分析 | 第64-66页 |
| ·同源性分析 | 第66-70页 |
| ·系统树的构建 | 第70-71页 |
| ·PcLGBP 基因的重组表达及其重组蛋白的糖结合活性鉴定 | 第71-74页 |
| ·PcLGBP 的组织分配及其对细菌刺激的反应 | 第74-76页 |
| ·PcLGBP 基因参与了克氏原螯虾对革兰氏阴性细菌侵染的防御反应 | 第76-79页 |
| ·讨论 | 第79-82页 |
| 第四章 克氏原螯虾C-型凝集素基因的克隆、重组表达及其体外生物活性分析 | 第82-106页 |
| ·引言 | 第82-83页 |
| ·材料与方法 | 第83-89页 |
| ·实验动物 | 第83页 |
| ·基因克隆 | 第83-84页 |
| ·序列分析 | 第84-85页 |
| ·基因的表达定量分析 | 第85-86页 |
| ·重组蛋白的准备 | 第86-87页 |
| ·凝菌和抑凝实验 | 第87-88页 |
| ·糖结合实验 | 第88-89页 |
| ·结果 | 第89-103页 |
| ·基因克隆和序列分析 | 第89-92页 |
| ·序列比对和多聚系统树的构建 | 第92-95页 |
| ·PcLEC 基因的组织分配和对细菌刺激的反应 | 第95-98页 |
| ·PcLEC 基因的重组表达 | 第98-99页 |
| ·rPcLEC 蛋白对细菌的凝集效应 | 第99-101页 |
| ·PcLEC 蛋白的配体结合特异性 | 第101-102页 |
| ·糖结合实验 | 第102-103页 |
| ·讨论 | 第103-106页 |
| 结论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第129页 |
