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鳗弧菌(Vibrio anguillarum)M3菌株T6SS基因簇的克隆及其功能的初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章文献综述第12-28页
 引言第12页
 1. 病原性细菌致病机制第12-19页
   ·病原菌的致病性第12-14页
   ·病原菌的一般致病机制第14-19页
 2. 细菌的分泌系统第19-28页
   ·革兰氏阴性细菌的Ⅰ~Ⅴ型分泌系统第19-22页
   ·革兰氏阴性细菌的T6SS第22-28页
第二章鳗弧菌M3菌株T6SS基因序列的克隆及生物信息学分析第28-43页
 1. 实验材料第29-30页
   ·实验用菌株第29页
   ·实验仪器第29页
   ·实验试剂第29-30页
 2. 实验方法第30-36页
   ·引物设计第30-31页
   ·鳗弧菌M3 基因组DNA 的提取第31-32页
   ·PCR 扩增第32页
   ·PCR 产物的胶回收、连接、转化及阳性克隆筛选第32-34页
   ·鳗弧菌M3 T6SS 分泌系统操纵子的推测第34-36页
   ·生物信息学分析第36页
 3. 结果与分析第36-43页
   ·鳗弧菌T6SS 分泌系统序列分析第36页
   ·鳗弧菌T6SS 操纵子结构预测第36-38页
   ·编码序列的直系同源体分析第38-39页
   ·鳗弧菌VI 系统编码蛋白的功能预测第39-43页
第三章鳗弧菌T6SS基因缺失突变株的构建、表型特征及毒力检测第43-67页
 1. 实验材料第43-45页
   ·实验菌株和动物第43页
   ·实验仪器第43页
   ·试剂第43-45页
 2. 实验方法第45-54页
   ·鳗弧菌M3 菌株T6SS 部分基因缺失突变株的构建第45-51页
   ·鳗弧菌M3 菌株和基因缺失突变株生长曲线的检测第51-52页
   ·平板泳动实验第52页
   ·API ZYM 酶活检测第52-53页
   ·vaa117 基因对菌膜(biofilm)形成的影响第53页
   ·LD_(50)检测第53-54页
 3. 结果与讨论第54-67页
   ·基因缺失突变株的构建第54-57页
   ·鳗弧菌M3 菌株野生型和突变株生长曲线的分析第57-59页
   ·平板泳动实验第59-60页
   ·API ZYM 酶活检测第60-62页
   ·菌膜形成第62-65页
   ·感染实验结果第65-67页
第四章RT-PCR检测VAA117基因对VAA017基因转录的调控第67-78页
 1. 实验材料第67-68页
   ·实验菌株第67页
   ·实验仪器第67页
   ·试剂第67-68页
 2. 实验方法第68-71页
   ·细菌总RNA 的提取第68-69页
   ·反转录RNA 合成cDNA第69-70页
   ·RNA 质量的检测第70页
   ·cDNA 质量的检测第70-71页
   ·荧光定量PCR第71页
 3. 结果与讨论第71-78页
   ·RNA 提取质量的检测第71-72页
   ·RNA 反转录质量的检测第72页
   ·定量PCR 反应标准曲线的绘制第72-76页
   ·vaa117 基因缺失对hcp 基因转录的影响第76-78页
参考文献第78-85页
已发表和已接受的文章第85-86页
致谢第86页

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