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马铃薯Rubisco活化酶启动子功能分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-31页
   ·启动子结构特征及分类第12-18页
     ·植物启动子结构特征第12-13页
       ·转录起始位点第12页
       ·核心启动子第12-13页
       ·一般性上游元件第13页
       ·专一性上游元件第13页
     ·植物启动子调控第13-14页
     ·启动子研究的一般方法第14-16页
       ·生物信息学方法第14页
       ·5′端缺失法第14-15页
       ·离体瞬时表达分析第15页
       ·稳定表达分析第15页
       ·内部缺失突变法第15页
       ·衔接物扫描突变法第15页
       ·定点突变法第15-16页
     ·植物启动子的分类第16-18页
       ·组成型启动子第16页
       ·特异性启动子第16-17页
       ·诱导型启动子第17-18页
   ·诱导型启动子研究第18-30页
     ·光照诱导型启动子第18-20页
     ·非生物逆境诱导型启动子第20-23页
       ·温度诱导型启动子第20-21页
       ·干旱诱导型启动子第21-22页
       ·盐诱导型启动子第22-23页
     ·化学诱导型启动子第23-26页
       ·植物激素诱导型启动子第23-25页
       ·化学物质诱导型启动子第25-26页
     ·创伤诱导型启动子第26页
     ·病原菌诱导型启动子第26-27页
     ·重金属离子诱导型启动子第27-28页
     ·诱导型启动子顺式作用原件第28-30页
   ·本研究的目的、意义及技术路线第30-31页
第二章 材料与方法第31-46页
   ·材料第31-32页
   ·方法第32-46页
     ·提取质粒DNA第32-33页
     ·感受态细胞制备第33-34页
       ·制备大肠杆菌感受态细胞第33页
       ·根癌农杆菌LBA4404 感受态的制备第33-34页
     ·大肠杆菌及农杆菌的转化第34页
       ·大肠杆菌的热击转化第34页
       ·重组质粒DNA 冻融法转入农杆菌LBA4404第34页
     ·启动子5′系列缺失植物表达载体的构建第34-37页
       ·PCR 扩增获得StRCAp 基因5′末端系列缺失序列第34-35页
       ·目的片段的回收第35-36页
       ·植物表达载体的构建第36-37页
     ·农杆菌介导的烟草遗传转化第37页
     ·GUS 的组织化学染色第37-38页
     ·gus 基因表达的定量分析第38-40页
       ·提取新鲜烟草叶片GUS 蛋白第38页
       ·测定GUS 蛋白提取液中蛋白含量(Bradford 法)第38-39页
       ·GUS 酶活的反应第39页
       ·荧光定量第39-40页
       ·酶活力计算方法第40页
       ·酶活力计算采用 EXCEL 进行数据处理和 SAS8.1 进行统计分析第40页
     ·烟草基因组DNA 提取第40页
     ·Southern blot第40-43页
     ·烟草总RNA 提取第43页
     ·光照梯度处理试验第43页
     ·Northern Blot第43-46页
第三章 结果与分析第46-54页
   ·启动子序列分析第46页
   ·植物表达载体的构建第46-49页
   ·农杆菌介导法转化烟草第49页
   ·转基因烟草植株的PCR 鉴定第49-50页
   ·转基因烟草 Southern Blot 检测第50-51页
   ·GUS 组织化学染色检测转基因烟草幼苗组织特异性第51-52页
   ·gus 基因表达的定量分析第52页
   ·转 StRCAp 烟草植株光诱导性的 Northern Blot 检测第52-53页
   ·5’系列缺失启动子光诱导性的 Northern Blot 检测第53-54页
第四章 结论及讨论第54-56页
   ·结论第54页
   ·讨论第54-56页
参考文献第56-66页
致谢第66-67页
作者简历第67页

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