摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-31页 |
·启动子结构特征及分类 | 第12-18页 |
·植物启动子结构特征 | 第12-13页 |
·转录起始位点 | 第12页 |
·核心启动子 | 第12-13页 |
·一般性上游元件 | 第13页 |
·专一性上游元件 | 第13页 |
·植物启动子调控 | 第13-14页 |
·启动子研究的一般方法 | 第14-16页 |
·生物信息学方法 | 第14页 |
·5′端缺失法 | 第14-15页 |
·离体瞬时表达分析 | 第15页 |
·稳定表达分析 | 第15页 |
·内部缺失突变法 | 第15页 |
·衔接物扫描突变法 | 第15页 |
·定点突变法 | 第15-16页 |
·植物启动子的分类 | 第16-18页 |
·组成型启动子 | 第16页 |
·特异性启动子 | 第16-17页 |
·诱导型启动子 | 第17-18页 |
·诱导型启动子研究 | 第18-30页 |
·光照诱导型启动子 | 第18-20页 |
·非生物逆境诱导型启动子 | 第20-23页 |
·温度诱导型启动子 | 第20-21页 |
·干旱诱导型启动子 | 第21-22页 |
·盐诱导型启动子 | 第22-23页 |
·化学诱导型启动子 | 第23-26页 |
·植物激素诱导型启动子 | 第23-25页 |
·化学物质诱导型启动子 | 第25-26页 |
·创伤诱导型启动子 | 第26页 |
·病原菌诱导型启动子 | 第26-27页 |
·重金属离子诱导型启动子 | 第27-28页 |
·诱导型启动子顺式作用原件 | 第28-30页 |
·本研究的目的、意义及技术路线 | 第30-31页 |
第二章 材料与方法 | 第31-46页 |
·材料 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-46页 |
·提取质粒DNA | 第32-33页 |
·感受态细胞制备 | 第33-34页 |
·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第33页 |
·根癌农杆菌LBA4404 感受态的制备 | 第33-34页 |
·大肠杆菌及农杆菌的转化 | 第34页 |
·大肠杆菌的热击转化 | 第34页 |
·重组质粒DNA 冻融法转入农杆菌LBA4404 | 第34页 |
·启动子5′系列缺失植物表达载体的构建 | 第34-37页 |
·PCR 扩增获得StRCAp 基因5′末端系列缺失序列 | 第34-35页 |
·目的片段的回收 | 第35-36页 |
·植物表达载体的构建 | 第36-37页 |
·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第37页 |
·GUS 的组织化学染色 | 第37-38页 |
·gus 基因表达的定量分析 | 第38-40页 |
·提取新鲜烟草叶片GUS 蛋白 | 第38页 |
·测定GUS 蛋白提取液中蛋白含量(Bradford 法) | 第38-39页 |
·GUS 酶活的反应 | 第39页 |
·荧光定量 | 第39-40页 |
·酶活力计算方法 | 第40页 |
·酶活力计算采用 EXCEL 进行数据处理和 SAS8.1 进行统计分析 | 第40页 |
·烟草基因组DNA 提取 | 第40页 |
·Southern blot | 第40-43页 |
·烟草总RNA 提取 | 第43页 |
·光照梯度处理试验 | 第43页 |
·Northern Blot | 第43-46页 |
第三章 结果与分析 | 第46-54页 |
·启动子序列分析 | 第46页 |
·植物表达载体的构建 | 第46-49页 |
·农杆菌介导法转化烟草 | 第49页 |
·转基因烟草植株的PCR 鉴定 | 第49-50页 |
·转基因烟草 Southern Blot 检测 | 第50-51页 |
·GUS 组织化学染色检测转基因烟草幼苗组织特异性 | 第51-52页 |
·gus 基因表达的定量分析 | 第52页 |
·转 StRCAp 烟草植株光诱导性的 Northern Blot 检测 | 第52-53页 |
·5’系列缺失启动子光诱导性的 Northern Blot 检测 | 第53-54页 |
第四章 结论及讨论 | 第54-56页 |
·结论 | 第54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简历 | 第67页 |