摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
英文缩略词 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-14页 |
2 材料、试剂和仪器 | 第14-20页 |
2.1 主要实验材料 | 第14页 |
2.2 主要试剂 | 第14-15页 |
2.2.1 主要试剂 | 第14页 |
2.2.2 主要抗体 | 第14-15页 |
2.2.3 主要质粒 | 第15页 |
2.3 主要溶液配制 | 第15-18页 |
2.3.1 DMEM完全培养基(10%FBS+1%AA) | 第15页 |
2.3.2 1M Tris-HCL,(PH6.8)100ml | 第15页 |
2.3.3 4*Loading Sample Buffer 10ml | 第15-16页 |
2.3.4 1.5M Tris-HCL,(PH8.8,for Running buffer)500ml | 第16页 |
2.3.5 10%APS 1ml | 第16页 |
2.3.6 0.5M Tris-HCL,(PH6.8)50ml | 第16页 |
2.3.7 10*Running Buffer 1L | 第16-17页 |
2.3.8 10*Transfer buffer 1L | 第17页 |
2.3.9 细胞内总蛋白提取裂解液配置 | 第17-18页 |
2.3.10 5%BSA 10ml | 第18页 |
2.3.11 5%milk 100ml | 第18页 |
2.4 主要的仪器 | 第18-20页 |
3 实验方法 | 第20-27页 |
3.1 细胞培养与种板 | 第20页 |
3.2 TGR5 表达质粒的转染与激活 | 第20页 |
3.3 MRNA提取 | 第20-21页 |
3.4 MRNA反转录为CDNA | 第21页 |
3.5 REAL-TIME PCR检测 | 第21-22页 |
3.6 荧光素酶报告试验 | 第22页 |
3.7 细胞内总蛋白提取 | 第22页 |
3.8 提取细胞核内蛋白质 | 第22-24页 |
3.9 用BCA法测蛋白浓度 | 第24-25页 |
3.10 WESTERN BLOTTING实验 | 第25-26页 |
3.11 统计学方法 | 第26-27页 |
4 实验结果 | 第27-37页 |
4.1 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制TNF-Α与P65刺激后炎症相关因子的表达 | 第27-31页 |
4.1.1 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制TNF-α刺激后炎症相关因子的激活(图1) | 第27-29页 |
4.1.2 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制P65刺激后炎症相关因子的激活 | 第29-31页 |
4.2 在肾癌细胞中激活TGR5后可抑制NF-ΚB的转录活性 | 第31-34页 |
4.2.1 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制TNF-α所激活的NF-κB转录活性 | 第31-32页 |
4.2.2 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制P65所激活NF-ΚB的转录活性 | 第32-34页 |
4.3 在HEK293细胞中,TGR5可抑制IΚB-Α的磷酸化 | 第34-35页 |
4.4 在HEK293细胞中,TGR5可抑制P65的核内转移 | 第35-37页 |
5 讨论 | 第37-42页 |
6 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
综述 | 第47-59页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
在读期间发表的学术论文与获得奖励 | 第61页 |