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胆汁酸受体TGR5抑制肾脏炎症反应的机制研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
英文缩略词第10-12页
1 前言第12-14页
2 材料、试剂和仪器第14-20页
    2.1 主要实验材料第14页
    2.2 主要试剂第14-15页
        2.2.1 主要试剂第14页
        2.2.2 主要抗体第14-15页
        2.2.3 主要质粒第15页
    2.3 主要溶液配制第15-18页
        2.3.1 DMEM完全培养基(10%FBS+1%AA)第15页
        2.3.2 1M Tris-HCL,(PH6.8)100ml第15页
        2.3.3 4*Loading Sample Buffer 10ml第15-16页
        2.3.4 1.5M Tris-HCL,(PH8.8,for Running buffer)500ml第16页
        2.3.5 10%APS 1ml第16页
        2.3.6 0.5M Tris-HCL,(PH6.8)50ml第16页
        2.3.7 10*Running Buffer 1L第16-17页
        2.3.8 10*Transfer buffer 1L第17页
        2.3.9 细胞内总蛋白提取裂解液配置第17-18页
        2.3.10 5%BSA 10ml第18页
        2.3.11 5%milk 100ml第18页
    2.4 主要的仪器第18-20页
3 实验方法第20-27页
    3.1 细胞培养与种板第20页
    3.2 TGR5 表达质粒的转染与激活第20页
    3.3 MRNA提取第20-21页
    3.4 MRNA反转录为CDNA第21页
    3.5 REAL-TIME PCR检测第21-22页
    3.6 荧光素酶报告试验第22页
    3.7 细胞内总蛋白提取第22页
    3.8 提取细胞核内蛋白质第22-24页
    3.9 用BCA法测蛋白浓度第24-25页
    3.10 WESTERN BLOTTING实验第25-26页
    3.11 统计学方法第26-27页
4 实验结果第27-37页
    4.1 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制TNF-Α与P65刺激后炎症相关因子的表达第27-31页
        4.1.1 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制TNF-α刺激后炎症相关因子的激活(图1)第27-29页
        4.1.2 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制P65刺激后炎症相关因子的激活第29-31页
    4.2 在肾癌细胞中激活TGR5后可抑制NF-ΚB的转录活性第31-34页
        4.2.1 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制TNF-α所激活的NF-κB转录活性第31-32页
        4.2.2 在肾癌细胞内激活TGR5可抑制P65所激活NF-ΚB的转录活性第32-34页
    4.3 在HEK293细胞中,TGR5可抑制IΚB-Α的磷酸化第34-35页
    4.4 在HEK293细胞中,TGR5可抑制P65的核内转移第35-37页
5 讨论第37-42页
6 结论第42-43页
参考文献第43-47页
综述第47-59页
    参考文献第55-59页
致谢第59-61页
在读期间发表的学术论文与获得奖励第61页

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