| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstact | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 结直肠癌 | 第12-13页 |
| 1.1.1 概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 结直肠癌的发生发展 | 第13页 |
| 1.2 类固醇激素受体辅激活子SRC-1 | 第13-18页 |
| 1.2.1 SRC家族 | 第13-14页 |
| 1.2.2 SRC-1的基因结构 | 第14-15页 |
| 1.2.3 SRC-1的功能机制 | 第15-16页 |
| 1.2.4 SRC-1在癌症中的作用 | 第16-18页 |
| 1.2.4.1 SRC-1在乳腺癌中的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.4.2 SRC-1在前列腺癌中的作用 | 第17页 |
| 1.2.4.3 SRC-1在其他癌症中的作用 | 第17-18页 |
| 1.3 Hedgehog信号通路 | 第18-24页 |
| 1.3.1 概述 | 第18-19页 |
| 1.3.2 Hedgehog信号通路的组成 | 第19-20页 |
| 1.3.3 经典Hedgehog信号通路途径 | 第20-21页 |
| 1.3.4 非经典Hedgehog信号通路 | 第21页 |
| 1.3.5 Hedgehog信号通路的生物学功能 | 第21-22页 |
| 1.3.6 Hedgehog信号通路与肿瘤的关系 | 第22-24页 |
| 1.3.6.1 Hedgehog通路组分异常与肿瘤之间的关系 | 第22-23页 |
| 1.3.6.2 Hedgehog通路与肿瘤的侵袭转移 | 第23-24页 |
| 1.3.6.3 Hedgehog通路与结直肠癌 | 第24页 |
| 1.4 立题背景和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-42页 |
| 2.1 材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第26页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第26页 |
| 2.1.3 菌株 | 第26页 |
| 2.1.4 实验小鼠 | 第26页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-42页 |
| 2.2.1 分子克隆 | 第28-32页 |
| 2.2.1.1 大肠杆菌感受态制备(以DH5α为例) | 第28-29页 |
| 2.2.1.2 质粒转化 | 第29-30页 |
| 2.2.1.3 小量提取质粒DNA | 第30-31页 |
| 2.2.1.4 中量提取质粒DNA | 第31-32页 |
| 2.2.2 RNA相关实验及方法 | 第32-33页 |
| 2.2.2.1 RNA的提取 | 第32页 |
| 2.2.2.2 反转录合成cDNA | 第32-33页 |
| 2.2.2.3 实时荧光定量PCR | 第33页 |
| 2.2.3 蛋白质相关实验与方法 | 第33-36页 |
| 2.2.3.1 蛋白样品的制备 | 第33-34页 |
| 2.2.3.2 蛋白浓度测定 | 第34页 |
| 2.2.3.3 SDS-PAGE电泳以及Western Blot分析 | 第34-35页 |
| 2.2.3.5 免疫共沉淀实验 | 第35-36页 |
| 2.2.4 细胞相关实验及方法 | 第36-40页 |
| 2.2.4.1 细胞培养相关实验 | 第36-37页 |
| 2.2.4.2 细胞瞬时转染及稳定转染 | 第37页 |
| 2.2.4.3 构建稳定转染细胞株 | 第37-38页 |
| 2.2.4.4 CaCl_2转染HEK293T细胞 | 第38页 |
| 2.2.4.5 细胞荧光素酶活性检测 | 第38-39页 |
| 2.2.4.6 MTT测细胞生长 | 第39页 |
| 2.2.4.7 克隆形成实验 | 第39页 |
| 2.2.4.8 细胞划痕实验 | 第39-40页 |
| 2.2.4.9 细胞侵袭/迁移实验 | 第40页 |
| 2.2.5 小鼠皮下移植瘤实验 | 第40-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-55页 |
| 3.1 SRC-1在结直肠癌细胞系中的表达情况 | 第42页 |
| 3.2 TCGA数据库分析SRC-1在结直肠癌中的表达 | 第42-43页 |
| 3.3 SRC-1稳定敲低结直肠癌细胞株的建立 | 第43-44页 |
| 3.4 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞增殖 | 第44-45页 |
| 3.4.1 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞生长 | 第44-45页 |
| 3.4.2 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞克隆形成的能力 | 第45页 |
| 3.5 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞移植瘤的形成 | 第45-47页 |
| 3.5.1 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞移植瘤的生长 | 第45-46页 |
| 3.5.2 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞移植瘤的大小 | 第46-47页 |
| 3.5.3 移植瘤中PCNA的表达情况 | 第47页 |
| 3.6 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞迁移和侵袭能力 | 第47-50页 |
| 3.6.1 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞的划痕愈合能力 | 第47-48页 |
| 3.6.2 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞的迁移能力 | 第48-49页 |
| 3.6.3 下调SRC-1抑制结直肠癌细胞的侵袭能力 | 第49-50页 |
| 3.7 SRC-1协同Gli2促进Hh信号通路的激活 | 第50-54页 |
| 3.7.1 SRC-1促进Gli2转录活性 | 第50-52页 |
| 3.7.2 SRC家族仅SRC-1可促进Gli2转录活性 | 第52页 |
| 3.7.3 SRC-1以剂量依赖的方式促进Gli2转录活性 | 第52-53页 |
| 3.7.4 SRC-1与Gli2相互结合 | 第53-54页 |
| 3.8 SRC-1和Gli2的高表达与结直肠癌患者低生存率正相关 | 第54-55页 |
| 第四章 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
