摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第11-27页 |
1.1 PPR基因在植物中的作用机制 | 第11-23页 |
1.1.1 PPR蛋白的结构特点 | 第11-12页 |
1.1.2 PPR家族的演化 | 第12-13页 |
1.1.3 PPR蛋白家族的功能 | 第13-20页 |
1.1.4 水稻中PPR蛋白的研究进展 | 第20-23页 |
1.2 叶绿体对植物发育的研究 | 第23-26页 |
1.2.1 叶色突变的分子机制 | 第23-24页 |
1.2.2 叶色突变的应用 | 第24-26页 |
1.3 本课题研究的目的与意义 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-45页 |
2.1 实验材料 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-45页 |
2.2.1 载体的构建 | 第27-34页 |
2.2.2 转基因 | 第34-37页 |
2.2.3 转基因植株的阳性检测 | 第37页 |
2.2.4 Tail-PCR鉴定插入位点 | 第37页 |
2.2.5 叶绿素含量的测定 | 第37-38页 |
2.2.6 扫描和透射电子显微镜的分析 | 第38-39页 |
2.2.7 水稻原生质体的制备及转化 | 第39-41页 |
2.2.8 烟草表达系统鉴定启动子活性 | 第41-42页 |
2.2.9 水稻组织的RNA提取及反转录 | 第42-43页 |
2.2.10 荧光定量PCR | 第43-44页 |
2.2.11 线粒体和叶绿体编辑效率的检测 | 第44-45页 |
第三章 结果与分析 | 第45-56页 |
3.1 水稻DYW型PPR蛋白OsPGL1的结构分析 | 第45-47页 |
3.2 Ospgl1材料的表型及细胞学特征 | 第47-48页 |
3.2.1 Ospgl1材料的表型 | 第47页 |
3.2.2 Ospgl1材料的细胞学特征 | 第47-48页 |
3.3 叶绿素含量的测定 | 第48-49页 |
3.4 OsPGL1基因的组织特异性表达 | 第49页 |
3.5 OsPGL1双定位于线粒体和叶绿体中 | 第49-51页 |
3.6 参与叶绿体和线粒体基因的编辑 | 第51-53页 |
3.7 烟草表达系统鉴定启动子活性 | 第53页 |
3.8 CRISPR/cas9技术构建敲除材料 | 第53-56页 |
3.8.1 CRISPR/CAS9载体的构建 | 第53-54页 |
3.8.2 转基因流程图 | 第54-55页 |
3.8.3 转基因植株鉴定 | 第55-56页 |
第四章 讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
附件 | 第68-70页 |
致谢 | 第70页 |