| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 英文略缩语 | 第13-15页 |
| 文献综述 | 第15-35页 |
| 1 甘草药理活性研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1 抗菌活性 | 第15页 |
| 1.2 抗病毒活性 | 第15页 |
| 1.3 抗炎活性 | 第15-16页 |
| 1.4 抗肿瘤活性 | 第16页 |
| 1.5 抑制糖尿病作用 | 第16页 |
| 1.6 肾上腺皮质激素样作用 | 第16页 |
| 1.7 免疫调节活性 | 第16-17页 |
| 1.8 保肝作用 | 第17页 |
| 1.9 增强记忆力及神经保护作用 | 第17页 |
| 1.10 其它活性 | 第17-19页 |
| 2 甘草组织培养研究概况 | 第19-27页 |
| 2.1 外植体材料来源、预处理及表面灭菌 | 第19-20页 |
| 2.2 愈伤组织诱导 | 第20-21页 |
| 2.3 再生植株诱导 | 第21-23页 |
| 2.4 快速繁殖研究 | 第23页 |
| 2.5 毛状根诱导及培养 | 第23-24页 |
| 2.6 甘草组织培养物中有效成分分析 | 第24-25页 |
| 2.7 小结与展望 | 第25-27页 |
| 3 甘草功能基因研究进展 | 第27-33页 |
| 3.1 3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶基因HMGR | 第28页 |
| 3.2 鲨烯合酶基因SQS | 第28-30页 |
| 3.3 β-香树脂醇合成酶基因β-AS | 第30页 |
| 3.4 细胞色素P450酶系 | 第30-31页 |
| 3.5 小结与展望 | 第31-33页 |
| 4 国内外CNVs的研究进展 | 第33-35页 |
| 前言 | 第35-43页 |
| 1 立题依据 | 第35-37页 |
| 1.1 提高栽培甘草的质量是确保甘草资源可持续发展的关键问题 | 第35页 |
| 1.2 功能基因是甘草酸次生代谢途径中的关键影响因素 | 第35-36页 |
| 1.3 基于功能基因CNVs的新思路能够深入揭示甘草酸含量差异的分子机制 | 第36-37页 |
| 1.4 器官及组织特异性表达是影响转基因效果的重要因素 | 第37页 |
| 2 研究思路与方法 | 第37-43页 |
| 2.1 研究目标 | 第37-38页 |
| 2.2 研究内容 | 第38-39页 |
| 2.3 本课题拟解决的关键问题 | 第39-40页 |
| 2.4 研究方案及技术路线 | 第40-41页 |
| 2.5 特色与创新之处 | 第41页 |
| 2.6 预期研究成果和应用价值 | 第41-43页 |
| 第一章 栽培甘草中功能基因CNVS对甘草酸积累的调控 | 第43-51页 |
| 1 材料与方法 | 第43-45页 |
| 1.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 1.2 HPLC分析样品中甘草酸含量 | 第44-45页 |
| 1.3 real time PCR检测样品中功能基因拷贝数 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-50页 |
| 2.1 功能基因拷贝数及甘草酸含量总体测定结果 | 第45-47页 |
| 2.2 功能基因组合类型与甘草酸含量分析结果 | 第47-48页 |
| 2.3 样品产地与甘草酸含量相关性分析结果 | 第48-49页 |
| 2.4 样品产地与CNVs组合类型相关性分析结果 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 第二章 栽培甘草功能基因CNVS与其外部形态特征及显微构造特征的相关性分析 | 第51-99页 |
| 1 材料与方法 | 第51-53页 |
| 1.1 实验材料 | 第51页 |
| 1.2 不同功能基因CNVs组合类型甘草生长指标的测定方法 | 第51-52页 |
| 1.3 不同功能基因CNVs组合类型甘草叶片表面特征分析 | 第52页 |
| 1.4 不同功能基因CNVs组合类型甘草显微结构的比较 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-96页 |
| 2.1 不同功能基因CNVs组合类型甘草生长指标的测定结果 | 第53-67页 |
| 2.2 不同功能基因CNVs组合类型甘草叶片扫描特征分析 | 第67-71页 |
| 2.3 不同功能基因CNVs组合类型甘草显微结构的比较 | 第71-96页 |
| 3 讨论 | 第96-99页 |
| 3.1 栽培甘草植株形态与功能基因CNVs组合类型的相关性分析 | 第96页 |
| 3.2 栽培甘草叶片形态与功能基因CNVs组合类型的相关性分析 | 第96-97页 |
| 3.3 栽培甘草叶片扫描特征与功能基因CNVs组合类型的相关性分析 | 第97页 |
| 3.4 栽培甘草叶片显微特征与功能基因CNVs组合类型的相关性分析 | 第97-98页 |
| 3.5 不同类型栽培甘草中甘草酸含量与外部形态特征及内部显微结构特征的相关性分析 | 第98-99页 |
| 第三章 酵母表达体系中甘草功能基因CNVS对MVA代谢途径的影响研究 | 第99-112页 |
| 1 材料与方法 | 第99-104页 |
| 1.1 实验材料 | 第99-102页 |
| 1.2 各酵母工程菌的活化 | 第102-103页 |
| 1.3 各酵母工程菌及空白酵母菌的诱导 | 第103页 |
| 1.4 提取 | 第103-104页 |
| 1.5 HPLC分析各样品中麦角甾醇含量 | 第104页 |
| 2 结果 | 第104-110页 |
| 2.1 各酵母工程菌的活化 | 第104-105页 |
| 2.2 各酵母工程菌及空白酵母菌的诱导 | 第105页 |
| 2.3 HPLC分析各样品中麦角甾醇含量 | 第105-110页 |
| 3 讨论 | 第110-112页 |
| 第四章 甘草根特异性表达载体及工程菌的构建 | 第112-140页 |
| 1 材料与方法 | 第112-126页 |
| 1.1 实验材料 | 第112-113页 |
| 1.2 烟草根特异性启动子TobRB7的克隆 | 第113-116页 |
| 1.3 载体构建策略 | 第116-119页 |
| 1.4 根特异性表达载体构建 | 第119-124页 |
| 1.5 甘草根特异性表达工程菌的构建 | 第124-126页 |
| 2 结果 | 第126-139页 |
| 2.1 烟草根特异性启动子TobRB7的克隆 | 第126-128页 |
| 2.2 根特异性表达载体构建 | 第128-136页 |
| 2.3 甘草根特异性表达工程菌的构建 | 第136-139页 |
| 3 讨论 | 第139-140页 |
| 3.1 小结 | 第139页 |
| 3.2 讨论 | 第139-140页 |
| 第五章 根特异性过表达3个功能基因甘草再生植株的诱导 | 第140-153页 |
| 1 材料与方法 | 第140-146页 |
| 1.1 实验材料 | 第140-143页 |
| 1.2 根癌农杆菌工程菌的活化 | 第143-144页 |
| 1.3 甘草外植体材料的制备 | 第144页 |
| 1.4 侵染、共培养及除菌 | 第144-145页 |
| 1.5 转基因甘草再生植株诱导 | 第145页 |
| 1.6 转基因甘草再生植株炼苗及移栽 | 第145-146页 |
| 2 结果 | 第146-152页 |
| 2.1 根癌农杆菌工程菌的活化 | 第146页 |
| 2.2 甘草外植体材料的制备 | 第146页 |
| 2.3 根特异性转基因甘草再生植株诱导 | 第146-149页 |
| 2.4 转基因甘草再生植株的移栽 | 第149-152页 |
| 3 讨论 | 第152-153页 |
| 第六章 组成型过表达3个功能基因甘草再生植株的诱导 | 第153-160页 |
| 1 材料与方法 | 第153-154页 |
| 1.1 实验材料 | 第153页 |
| 1.2 试剂及培养基配制 | 第153-154页 |
| 1.3 实验方法 | 第154页 |
| 2 结果 | 第154-158页 |
| 2.1 根癌农杆菌工程菌的活化 | 第154页 |
| 2.2 组成型转基因甘草再生植株诱导及移栽 | 第154-158页 |
| 3 讨论 | 第158-160页 |
| 第七章 总结与展望 | 第160-165页 |
| 1 总结 | 第160-163页 |
| 1.1 栽培甘草中功能基因CNVs与甘草酸含量及产地之间具有密切的相关性 | 第160页 |
| 1.2 栽培甘草中功能基因CNVs与甘草外部形态、内部显微构造之间的相关性分析 | 第160-161页 |
| 1.3 酵母表达体系中功能基因CNVs明确影响次生代谢产物含量 | 第161-162页 |
| 1.4 成功构建了携带甘草3个功能基因的根特异性表达载体及工程菌 | 第162-163页 |
| 1.5 成功获得了根特异性过表达HMGR、SQS1及β-AS基因的甘草再生植株 | 第163页 |
| 1.6 成功获得了组成型过表达HMGR、SQS1及β-AS基因的甘草再生植株 | 第163页 |
| 2 展望 | 第163-165页 |
| 参考文献 | 第165-178页 |
| 致谢 | 第178-179页 |
| 个人简介 | 第179页 |
