致谢 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 植物根际促生菌概述 | 第11-12页 |
1.1.1 植物根际促生菌 | 第11页 |
1.1.2 PGPR在农作物中的应用效果 | 第11-12页 |
1.1.3 PGPR在当前应用中存在的问题 | 第12页 |
1.2 植物的抗逆机理 | 第12-13页 |
1.3 植物乙烯生物合成路径 | 第13-14页 |
1.4 恶臭假单胞菌及其趋化特性 | 第14-16页 |
1.4.1 恶臭假单胞菌 | 第14页 |
1.4.2 1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶 | 第14页 |
1.4.3 AcdS在PGPR与植物互作中的作用 | 第14-15页 |
1.4.4 1-氨基环丙烷-1-羧酸及乙烯作为趋化物质的研究进展 | 第15-16页 |
1.5 趋化信号传导途径 | 第16-18页 |
1.5.1 细菌趋化信号通路 | 第16-17页 |
1.5.2 甲基受体趋化蛋白(MCPs)结构及功能概述 | 第17-18页 |
1.6 亲本接合转化方法 | 第18-19页 |
1.7 本实验研究意义及内容 | 第19-20页 |
1.8 技术路线 | 第20-21页 |
第二章 ecp基因生物信息学分析 | 第21-24页 |
2.1 生物信息学结构预测 | 第21页 |
2.2 预测结果分析 | 第21-23页 |
2.2.1 同源建树分析 | 第21-22页 |
2.2.2 跨膜结构域分析 | 第22页 |
2.2.3 信号结构域分析 | 第22-23页 |
2.2.4 配体结合结构域分析 | 第23页 |
2.3 本章小结 | 第23-24页 |
第三章 构建恶臭假单胞菌乙烯趋化受体突变菌株 | 第24-45页 |
3.1 实验材料 | 第24-25页 |
3.1.1 菌种及质粒 | 第24页 |
3.1.2 主要仪器 | 第24页 |
3.1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
3.1.4 培养基及溶液配方 | 第25页 |
3.2 实验方法 | 第25-37页 |
3.2.1 上下游同源臂融合片段的获得 | 第25-28页 |
3.2.2 同源重组质粒pEX18Gm-F的获得 | 第28-31页 |
3.2.3 恶臭假单胞菌Gm耐受浓度探究 | 第31页 |
3.2.4 突变菌株筛选与PCR验证 | 第31-33页 |
3.2.5 突变体菌株Southernblot验证 | 第33-37页 |
3.3 实验结果及分析 | 第37-44页 |
3.3.1 上下游同源片段的获得及纯化后检测结果 | 第37页 |
3.3.2 融合片段的获得及纯化检测结果 | 第37-38页 |
3.3.3 质粒pEASYbluntE1-F的构建结果 | 第38-39页 |
3.3.4 融合片段测序及比对结果 | 第39页 |
3.3.5 同源重组质粒pEX18Gm-F的构建结果 | 第39页 |
3.3.6 恶臭假单胞菌Gm耐受浓度测定结果 | 第39-40页 |
3.3.7 单交换子的筛选验证结果 | 第40-42页 |
3.3.8 突变体菌株的筛选与PCR验证结果 | 第42页 |
3.3.9 突变体菌株Southernblot验证结果 | 第42-44页 |
3.4 本章小结 | 第44-45页 |
第四章 功能回补菌株及空载对照菌株的构建 | 第45-56页 |
4.1 实验材料 | 第45页 |
4.1.1 菌种及质粒 | 第45页 |
4.1.2 主要试剂 | 第45页 |
4.1.3 主要仪器 | 第45页 |
4.2 实验方法 | 第45-51页 |
4.2.1 乙烯趋化受体基因的克隆 | 第45-47页 |
4.2.2 功能回补质粒pBBR-ecp的构建 | 第47-49页 |
4.2.3 乙烯趋化受体突变菌株(UW4-ecp-)Kan耐受浓度探究 | 第49-50页 |
4.2.4 功能回补菌株(UW4-ecp-+pBBR-ecp)的构建 | 第50页 |
4.2.5 空载对照菌株(UW4-ecp-+pBBR1MCS2)的构建 | 第50-51页 |
4.3 实验结果 | 第51-55页 |
4.3.1 乙烯趋化受体基因的克隆结果 | 第51页 |
4.3.2 乙烯趋化受体基因的保存及测序结果 | 第51-52页 |
4.3.3 功能回补质粒pBBR-ecp的构建结果 | 第52-53页 |
4.3.4 UW4-ecp-菌株Kan耐受浓度测定结果 | 第53页 |
4.3.5 功能回补菌株的筛选与验证结果 | 第53-54页 |
4.3.6 空载对照菌株的筛选与验证结果 | 第54-55页 |
4.4 本章小结 | 第55-56页 |
第五章 趋化功能及比生长速率验证 | 第56-62页 |
5.1 实验材料 | 第56-57页 |
5.1.1 菌种及质粒 | 第56页 |
5.1.2 培养基配方 | 第56页 |
5.1.3 主要试剂 | 第56页 |
5.1.4 主要仪器 | 第56-57页 |
5.2 实验方法 | 第57-58页 |
5.2.1 各菌株乙烯趋化能力验证 | 第57-58页 |
5.2.2 各菌株对强趋化物趋化能力验证 | 第58页 |
5.2.3 各菌株比生长速率比较 | 第58页 |
5.3 实验结果及分析 | 第58-61页 |
5.3.1 各菌株乙烯趋化能力验证 | 第58-59页 |
5.3.2 各菌株趋化能力验证 | 第59-60页 |
5.3.3 比生长速率分析结果 | 第60-61页 |
5.4 本章小结 | 第61-62页 |
第六章 不同菌剂在小麦根际定殖量测定及其对小麦生物量的影响 | 第62-68页 |
6.1 实验材料 | 第62-63页 |
6.1.1 实验菌种 | 第62页 |
6.1.2 培养基及溶液配方 | 第62页 |
6.1.3 设备仪器 | 第62-63页 |
6.2 实验方法 | 第63-65页 |
6.2.1 小麦生物量测定 | 第63页 |
6.2.2 小麦根际微生物定殖量测定 | 第63-65页 |
6.3 实验结果 | 第65-66页 |
6.3.1 不同菌剂对小麦根部生物量的影响 | 第65-66页 |
6.3.2 不同菌剂在小麦根际定殖量测定结果 | 第66页 |
6.4 本章小结 | 第66-68页 |
总结与讨论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
ABSTRACT | 第75-77页 |