| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 课题的提出 | 第12页 |
| 1.2 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.2.1 植物的成花调控途径 | 第12-19页 |
| 1.2.2 植物春化作用相关基因研究进展 | 第19-20页 |
| 1.3 本研究的目的和主要内容 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌株和载体质粒 | 第22-25页 |
| 2.1.3 实验主要试剂和仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 实时定量qRT-PCR | 第26-28页 |
| 2.2.2 载体的构建 | 第28-33页 |
| 2.2.3 拟南芥遗传转化 | 第33页 |
| 2.2.4 拟南芥种子的筛选 | 第33-34页 |
| 2.2.5 GUS载体的构建及拟南芥GUS染色 | 第34-35页 |
| 2.2.6 伏令夏橙愈伤的瞬时转化 | 第35页 |
| 2.2.7 烟草瞬时转化 | 第35-36页 |
| 2.2.8 亚细胞定位 | 第36页 |
| 2.2.9 酵母双杂 | 第36-38页 |
| 2.2.10 酵母单杂 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-57页 |
| 3.1 PtFRI保守结构域位点的预测与进化分析 | 第40-41页 |
| 3.2 PtFRI转基因拟南芥的表型分析 | 第41-43页 |
| 3.2.1 PtFRI超表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.2.2 PtFRI转基因拟南芥的表型分析 | 第42-43页 |
| 3.3 PtFRI亚细胞定位 | 第43-44页 |
| 3.4 PtFRI互作蛋白的筛选 | 第44-46页 |
| 3.5 PtFRI启动子 5’缺失不同长度转录活性分析 | 第46-50页 |
| 3.5.1 PtFRI 启动子顺式作用元件分析 | 第46-48页 |
| 3.5.2 PtFRI 5’缺失启动子载体的构建 | 第48-49页 |
| 3.5.3 PtFRI 5’缺失启动子愈伤瞬时表达分析 | 第49-50页 |
| 3.5.4 PtFRI 5’缺失启动子烟草瞬时表达分析 | 第50页 |
| 3.6 PtFRI启动子的时空表达分析及对春化的响应 | 第50-53页 |
| 3.6.1 PtFRI在不同柑橘品种中不同组织的表达分析情况 | 第50-51页 |
| 3.6.2 PtFRI启动子转基因拟南芥时空表达分析 | 第51-52页 |
| 3.6.3 PtFRI启动子转基因拟南芥对春化响应 | 第52-53页 |
| 3.7 PtFRI上游调控因子的筛选 | 第53-57页 |
| 3.7.1 最低AbA抑制浓度的筛选 | 第53-55页 |
| 3.7.2 酵母单杂筛库 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| 4.1 PtFRI基因功能的分析 | 第57页 |
| 4.2 PtFRI基因启动子的研究 | 第57-58页 |
| 4.3 实验中出现的问题 | 第58页 |
| 4.4 研究与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录 | 第65-71页 |
| 1 实验所需培养基配方 | 第65-67页 |
| 1.1 拟南芥转化培养基配方 | 第65-66页 |
| 1.2 伏令夏橙愈伤组织生长及转化培养基配方 | 第66页 |
| 1.3 LB培养基配方 | 第66-67页 |
| 1.4 酵母培养基配方 | 第67页 |
| 2 部分实验步骤 | 第67-68页 |
| 2.1 大肠杆菌感受态制备 | 第67-68页 |
| 2.2 农杆菌感受态制备 | 第68页 |
| 3 PtFRI基因和启动子序列 | 第68-71页 |
| 3.1 PtFRI基因序列 | 第68-69页 |
| 3.2 PtFRI启动子序列 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
