| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩写、符号说明 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 鸡传染性支气管炎概述 | 第14-15页 |
| 1.2 昆虫杆状病毒表达系统概述 | 第15-16页 |
| 1.3 昆虫杆状病毒表达系统在主要家禽病毒病应用研究进展 | 第16-22页 |
| 1.3.1 诊断与检测 | 第16-20页 |
| 1.3.2 疫苗研究方面 | 第20-22页 |
| 1.4 本课题研究的主要内容及其目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 表达鸡传染性支气管炎病毒GX-YL5株N蛋白的重组杆状病毒的构建 | 第24-39页 |
| 2.1 材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 IBV毒株 | 第24-25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 载体和感受态细胞 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-33页 |
| 2.2.1 目的基因的获取 | 第26-30页 |
| 2.2.2 重组克隆载体pEasy-HBM-N的构建及鉴定 | 第30页 |
| 2.2.3 重组转座载体pFast-HBM-N的构建及鉴定 | 第30-32页 |
| 2.2.4 重组杆粒rHBM-N的获取及纯化 | 第32-33页 |
| 2.3 结果 | 第33-37页 |
| 2.3.1 目的基因扩增 | 第33-35页 |
| 2.3.2 HBM-N基因的克隆载体的构建及鉴定 | 第35页 |
| 2.3.3 重组转座载体pFast-HBM-N的构建及鉴定 | 第35-37页 |
| 2.3.4 重组杆粒rHBM-N的获取及纯化 | 第37页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 表达鸡传染性支气管炎病毒GX-YL5株S蛋白的重组杆状病毒的构建 | 第39-55页 |
| 3.1 材料 | 第40-41页 |
| 3.1.1 病毒及相关反应试剂 | 第40页 |
| 3.1.2 引物设计与合成 | 第40-41页 |
| 3.2 方法 | 第41-42页 |
| 3.2.1 S1、S基因及融合HBM信号肽HBM-S1、HBM-S的扩增 | 第41页 |
| 3.2.2 S1、S基因克隆载体的构建及鉴定 | 第41页 |
| 3.2.3 S1、S基因转座载体的构建及鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.4 重组杆粒rHBM-S1、r-S1、rHBM-S和r-S的鉴定及纯化 | 第42页 |
| 3.3 结果 | 第42-53页 |
| 3.3.1 目的基因扩增 | 第42-46页 |
| 3.3.2 克隆载体的构建及鉴定 | 第46-48页 |
| 3.3.3 重组转座载体的构建及鉴定 | 第48-50页 |
| 3.3.4 重组杆粒的获取及纯化 | 第50-53页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第53-55页 |
| 3.4.1 S和S1蛋白的重转座载体的构建及鉴定 | 第53页 |
| 3.4.2 表达S和S1蛋白的重组杆粒的获取及纯化 | 第53-55页 |
| 第四章 共表达鸡传染性支气管炎病毒GX-YL5株N蛋白和S1蛋白的重组杆状病毒的构建 | 第55-61页 |
| 4.1 材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 载体 | 第55页 |
| 4.1.2 相关分子生物学试剂 | 第55-56页 |
| 4.2 方法 | 第56-57页 |
| 4.2.1 双元转座载体pFast-HBM-S1-N的构建及鉴定 | 第56-57页 |
| 4.2.2 双表达杆粒rHBM-S-N的获取及纯化 | 第57页 |
| 4.3 结果 | 第57-59页 |
| 4.3.1 重组转座载体pFast-HBM-S-N鉴定 | 第57-58页 |
| 4.3.2 重组杆粒rHBM-S-N鉴定及纯化 | 第58-59页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 结论 | 第61-62页 |
| 5.1 构建了携带蜂素信号肽的IBV GX-YL5株N蛋白的重组杆状病毒 | 第61页 |
| 5.2 构建了携带蜂素信号肽的IBV GX-YL5株S蛋白的重组杆状病毒 | 第61页 |
| 5.3 构建了携带蜂素信号肽的共表达IBV GX-YL5株S1和N蛋白的重组杆状病毒 | 第61-62页 |
| 创新点 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 附录一 | 第72-74页 |
| 附录二 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 个人简历 | 第83-84页 |
| 攻读硕士学位期间论文发表情况及参与的科研项目 | 第84页 |
