| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 心肌L型钙离子通道Cav1.3羧基端核转运现象及功能的探究 | 第11-36页 |
| 第一节 研究背景及相关研究进展 | 第11-12页 |
| 第二节 实验材料与方法 | 第12-20页 |
| 1 实验动物 | 第12页 |
| 2 实验方法 | 第12-20页 |
| 2.1 质粒构建 | 第12-13页 |
| 2.1.1 引物设计 | 第13页 |
| 2.1.2 PCR扩增反应 | 第13页 |
| 2.2 细胞培养 | 第13-16页 |
| 2.2.1 HEK293细胞培养 | 第13页 |
| 2.2.2 HL-1细胞培养 | 第13-14页 |
| 2.2.3 α_1D稳定表达细胞株(HEK293)的筛选 | 第14页 |
| 2.2.4 心肌细胞的分离 | 第14-16页 |
| 2.2.4.1 成年小鼠心房肌细胞的分离 | 第14-15页 |
| 2.2.4.2 原代新生小鼠心房肌细胞的分离和培养 | 第15-16页 |
| 2.3 细胞转染 | 第16页 |
| 2.4 荧光实时定量PCR(Real Time PCR) | 第16-18页 |
| 2.4.1 心房组织总RNA提取 | 第16页 |
| 2.4.2 RNA的反转录 | 第16-17页 |
| 2.4.3 荧光实时定量PCR的检测 | 第17-18页 |
| 2.5 蛋白提取与分析 | 第18-19页 |
| 2.5.1 心房组织和α_1D稳定表达细胞株蛋白的提取 | 第18-19页 |
| 2.5.2 免疫印迹检测蛋白质的表达 | 第19页 |
| 2.6 细胞免疫荧光 | 第19页 |
| 2.7 数据统计与分析 | 第19-20页 |
| 第三节 实验结果 | 第20-34页 |
| 3.1 心肌Cav1.3α_1亚基的羧基端(CCt)具有核转运现象 | 第20-22页 |
| 3.2 Cav1.3羧基端的“核保留区域”决定其核转运 | 第22-26页 |
| 3.2.1 CCt-ct-pEGFP-C1(C682)、C421和C181的构建 | 第23-24页 |
| 3.2.2 易位表达C682、C421和C181质粒,观察CCt的定位 | 第24-26页 |
| 3.3 CCt核转运的功能影响 | 第26-27页 |
| 3.4 CCt核转运的调控 | 第27-34页 |
| 3.4.1 CCt的核转运受到钙离子浓度的调控 | 第27-29页 |
| 3.4.2 CCt的核转运受到发育的调控 | 第29-30页 |
| 3.4.3 CCt的核转运受到心肌肥大信号的调控 | 第30-34页 |
| 3.4.3.1 TAC模型中,CCt的核转运增加 | 第30-32页 |
| 3.4.3.2 ISO刺激促进CCt的核转运 | 第32-34页 |
| 第四节 讨论 | 第34-36页 |
| 全文总结 | 第36-37页 |
| 第二章 文献综述 心肌L型电压门控钙离子通道的研究进展 | 第37-46页 |
| 第三章 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录一 | 第52-53页 |
| 附录二 | 第53-54页 |
| 附录三 | 第54-55页 |
| 在读期间研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
