| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-26页 |
| 1.1 玉米花序发育特点 | 第13-15页 |
| 1.2 转录因子是影响玉米花序发育的关键因素 | 第15-18页 |
| 1.2.1 ID1和DLF1控制玉米花序生殖转换过程 | 第16页 |
| 1.2.2 CLV-WUS和KN1调控分生组织活性 | 第16-17页 |
| 1.2.3 Ramosa影响分生组织身份和确定性 | 第17-18页 |
| 1.3 miRNA参与玉米花序发育 | 第18-20页 |
| 1.3.1 miR156和miR172控制植物生殖转换和花序发育 | 第18-19页 |
| 1.3.2 其他miRNAs参与花序发育调控 | 第19-20页 |
| 1.4 AGO蛋白在花序发育调控中的作用 | 第20-23页 |
| 1.4.1 AGOI亚类的生物学功能 | 第20-21页 |
| 1.4.2 AGOII亚类的生物学功能 | 第21-22页 |
| 1.4.3 AGOIII亚类的生物学功能 | 第22-23页 |
| 1.4.4 禾本科特有分支AGO18的生物学功能 | 第23页 |
| 1.5 AGO18b可能参与玉米雄穗发育 | 第23-24页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-35页 |
| 2.1 材料种植和表型鉴定 | 第26-27页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第26页 |
| 2.1.2 突变体群体构建和表型鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2 花粉母细胞染色体行为和活性观察 | 第27页 |
| 2.3 RNA干涉(RNAi)转基因及表型鉴定 | 第27-28页 |
| 2.4 基因表达分析和蛋白定量分析 | 第28-30页 |
| 2.4.1 定量PCR分析 | 第28-29页 |
| 2.4.2 原位杂交 | 第29-30页 |
| 2.4.3 Westernblotting | 第30页 |
| 2.5 AGO18b结合RNA的交联免疫沉淀反应 | 第30-31页 |
| 2.6 cRIP-seqsmallRNA文库构建及数据分析 | 第31-32页 |
| 2.7 cRIP-seqmRNA文库构建及数据分析 | 第32-33页 |
| 2.8 SmallRNA-seq文库构建和数据分析 | 第33页 |
| 2.9 Transctiptomepoly(A)RNA-seq文库构建和数据分析 | 第33-34页 |
| 2.10 miRNA靶基因分析 | 第34页 |
| 2.11 PhasiRNA分析 | 第34页 |
| 2.12 其他的统计方法(Otherstatisticalmethods) | 第34页 |
| 2.13 AccessionNumbers | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-72页 |
| 3.1 玉米AGO家族基因分析 | 第35-37页 |
| 3.2 AGO18b是雄穗发育特异表达的基因 | 第37-40页 |
| 3.2.1 qRT-PCR分析 | 第37-39页 |
| 3.2.2 mRNA原位杂交 | 第39-40页 |
| 3.3 AGO18b负向调控花序分生组织发育 | 第40-52页 |
| 3.3.1 AGO18b突变体的基因型鉴定 | 第40-42页 |
| 3.3.2 AGO18b突变体的表型鉴定 | 第42-45页 |
| 3.3.3 RNAi转基因家系的获得与遗传鉴定 | 第45页 |
| 3.3.4 RNAi转基因家系的表型分析 | 第45-47页 |
| 3.3.5 AGO18b突变体的雄穗减数分裂染色体行为和花粉育性分析 | 第47-52页 |
| 3.4 AGO18b抑制减数分裂前期雄穗中24-ntphasiRNA的表达 | 第52-55页 |
| 3.5 减数分裂前期雄穗中的AGO18b倾向于结合21-ntphasiRNA | 第55-57页 |
| 3.6 AGO18b结合5'-U21-ntsRNA/phasiRNA和5'-A24-ntsRNA/phasiRNA | 第57-59页 |
| 3.7 AGO18b结合24-ntphasiRNA产生所必需的miR2275 | 第59-63页 |
| 3.8 AGO18b结合miR166和其它miRNAs | 第63-66页 |
| 3.9 AGO18b结合miR166a的靶标基因分析 | 第66-68页 |
| 3.10 AGO18b-miR166a负调控靶基因表达 | 第68-70页 |
| 3.11 AGO18b结合的mRNA和相关功能 | 第70-72页 |
| 4 讨论 | 第72-80页 |
| 4.1 AGO18b结合miR166a-HD-ZIPⅢ负调控花序分生组织(IM)的活性 | 第72-73页 |
| 4.2 AGO1亚类蛋白的复杂调控系统控制花序分生组织活性的微妙变化 | 第73-74页 |
| 4.3 AGO18b结合5'-U21-ntphasiRNA的能力强于5'-A24-ntphasiRNA | 第74-76页 |
| 4.4 AGO18b可能同时结合miRNA和phasiRNA调控玉米雄穗发育 | 第76-79页 |
| 4.5 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-91页 |
| 附录 A | 第91-97页 |
| 附录1 玉米DNA小量提取(CTAB法) | 第91页 |
| 附录2 大肠杆菌遗传转化 | 第91-92页 |
| 附录3 植物总RNA提取、纯化及反转录 | 第92-93页 |
| 附录4 大肠杆菌质粒抽提 | 第93页 |
| 附录5 Westernblot | 第93-95页 |
| 附表6.本研究中所用引物序列 | 第95-97页 |
| 附录 B 在读期间发表论文 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
