摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第12-36页 |
1 水牛奶 | 第12-18页 |
1.1 水牛奶的营养特性 | 第12-13页 |
1.2 水牛奶产业的发展优势 | 第13-14页 |
1.3 牛乳蛋白 | 第14-18页 |
1.3.1 酪蛋白 | 第14-15页 |
1.3.2 乳清蛋白 | 第15页 |
1.3.3 乳脂肪球膜蛋白 | 第15-17页 |
1.3.4 乳外泌体蛋白 | 第17-18页 |
2 蛋白质组学 | 第18-32页 |
2.1 蛋白质组学概述 | 第18-27页 |
2.1.1 iTRAQ | 第19-21页 |
2.1.2 SILAC | 第21-22页 |
2.1.3 Label-free | 第22-23页 |
2.1.4 MRM和MRMHR | 第23-24页 |
2.1.5 SWATH | 第24-27页 |
2.2 蛋白质组学在乳品中的研究 | 第27-32页 |
2.2.1 乳清蛋白质组的研究进展 | 第27-29页 |
2.2.2 脂肪球膜蛋白质组的研究进展 | 第29-32页 |
3 影响泌乳性状的相关基因 | 第32-35页 |
4 研究的目的意义 | 第35-36页 |
第二章 河流型水牛与荷斯坦奶牛乳清蛋白和脂肪球膜蛋白的iTRAQ定量蛋白质组学研究 | 第36-81页 |
1 实验材料 | 第37-41页 |
1.1 实验动物 | 第37-39页 |
1.2 实验技术路线 | 第39页 |
1.3 主要试剂 | 第39-40页 |
1.4 主要仪器 | 第40页 |
1.5 主要试剂配制 | 第40-41页 |
2 河流型水牛与荷斯坦奶牛乳的主要营养成分测定 | 第41页 |
3 乳品iTRAQ定量蛋白质组学实验方法 | 第41-45页 |
3.1 奶样前处理 | 第41页 |
3.2 乳清蛋白的提取 | 第41页 |
3.3 脂肪球膜蛋白的提取 | 第41-42页 |
3.4 蛋白质含量测定 | 第42页 |
3.5 蛋白还原烷基化及酶解 | 第42-43页 |
3.6 酶解肽段脱盐 | 第43页 |
3.7 蛋白酶切产物的iTRAQ标记 | 第43页 |
3.8 质谱分析 | 第43-44页 |
3.9 数据库检索及相关参数 | 第44页 |
3.10 差异表达蛋白筛选 | 第44-45页 |
3.11 差异表达蛋白质的生物信息学分析 | 第45页 |
4 差异表达蛋白的western blot验证 | 第45-48页 |
4.1 蛋白样品的前处理 | 第45-46页 |
4.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳及凝胶系统拍照 | 第46页 |
4.3 转膜与封闭 | 第46-47页 |
4.4 免疫杂交与显色 | 第47-48页 |
5 实验结果 | 第48-75页 |
5.1 河流型水牛与荷斯坦奶牛的乳成分测定 | 第48-50页 |
5.2 乳清蛋白与脂肪球膜蛋白的SDS-PAGE电泳图 | 第50-51页 |
5.3 乳清蛋白的质谱结果 | 第51-59页 |
5.4 脂肪球膜蛋白的质谱结果 | 第59-65页 |
5.5 对差异表达蛋白进行生物信息学分析 | 第65-75页 |
5.5.1 乳清蛋白的GO功能注释 | 第65-68页 |
5.5.2 脂肪球膜差异蛋白的GO功能注释 | 第68-70页 |
5.5.3 乳清与脂肪球膜显著差异蛋白的KEGG代谢通路分析 | 第70-72页 |
5.5.4 乳清与脂肪球膜显著差异蛋白层次聚类分析 | 第72-75页 |
5.6 LTF、XDH的western blot验证 | 第75页 |
6 分析与讨论 | 第75-79页 |
7 小结 | 第79-81页 |
全文结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第93页 |