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河流型水牛与荷斯坦奶牛乳清蛋白、脂肪球膜蛋白的差异蛋白质组学分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第12-36页
    1 水牛奶第12-18页
        1.1 水牛奶的营养特性第12-13页
        1.2 水牛奶产业的发展优势第13-14页
        1.3 牛乳蛋白第14-18页
            1.3.1 酪蛋白第14-15页
            1.3.2 乳清蛋白第15页
            1.3.3 乳脂肪球膜蛋白第15-17页
            1.3.4 乳外泌体蛋白第17-18页
    2 蛋白质组学第18-32页
        2.1 蛋白质组学概述第18-27页
            2.1.1 iTRAQ第19-21页
            2.1.2 SILAC第21-22页
            2.1.3 Label-free第22-23页
            2.1.4 MRM和MRMHR第23-24页
            2.1.5 SWATH第24-27页
        2.2 蛋白质组学在乳品中的研究第27-32页
            2.2.1 乳清蛋白质组的研究进展第27-29页
            2.2.2 脂肪球膜蛋白质组的研究进展第29-32页
    3 影响泌乳性状的相关基因第32-35页
    4 研究的目的意义第35-36页
第二章 河流型水牛与荷斯坦奶牛乳清蛋白和脂肪球膜蛋白的iTRAQ定量蛋白质组学研究第36-81页
    1 实验材料第37-41页
        1.1 实验动物第37-39页
        1.2 实验技术路线第39页
        1.3 主要试剂第39-40页
        1.4 主要仪器第40页
        1.5 主要试剂配制第40-41页
    2 河流型水牛与荷斯坦奶牛乳的主要营养成分测定第41页
    3 乳品iTRAQ定量蛋白质组学实验方法第41-45页
        3.1 奶样前处理第41页
        3.2 乳清蛋白的提取第41页
        3.3 脂肪球膜蛋白的提取第41-42页
        3.4 蛋白质含量测定第42页
        3.5 蛋白还原烷基化及酶解第42-43页
        3.6 酶解肽段脱盐第43页
        3.7 蛋白酶切产物的iTRAQ标记第43页
        3.8 质谱分析第43-44页
        3.9 数据库检索及相关参数第44页
        3.10 差异表达蛋白筛选第44-45页
        3.11 差异表达蛋白质的生物信息学分析第45页
    4 差异表达蛋白的western blot验证第45-48页
        4.1 蛋白样品的前处理第45-46页
        4.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳及凝胶系统拍照第46页
        4.3 转膜与封闭第46-47页
        4.4 免疫杂交与显色第47-48页
    5 实验结果第48-75页
        5.1 河流型水牛与荷斯坦奶牛的乳成分测定第48-50页
        5.2 乳清蛋白与脂肪球膜蛋白的SDS-PAGE电泳图第50-51页
        5.3 乳清蛋白的质谱结果第51-59页
        5.4 脂肪球膜蛋白的质谱结果第59-65页
        5.5 对差异表达蛋白进行生物信息学分析第65-75页
            5.5.1 乳清蛋白的GO功能注释第65-68页
            5.5.2 脂肪球膜差异蛋白的GO功能注释第68-70页
            5.5.3 乳清与脂肪球膜显著差异蛋白的KEGG代谢通路分析第70-72页
            5.5.4 乳清与脂肪球膜显著差异蛋白层次聚类分析第72-75页
        5.6 LTF、XDH的western blot验证第75页
    6 分析与讨论第75-79页
    7 小结第79-81页
全文结论第81-82页
参考文献第82-92页
致谢第92-93页
攻读学位期间发表的学术论文第93页

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