| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-29页 |
| 1.1 油菜素内酯(Brassinosteroids,BRs) | 第9-19页 |
| 1.1.1 BR受体BRI | 第9-13页 |
| 1.1.2 BR共受体BAK | 第13-17页 |
| 1.1.3 BRI1和BAK1共同介导的BR信号感知及下游转录因子的信号转导 | 第17-19页 |
| 1.2 富含亮氨酸重复序列的类受体激酶(Leucine-RichRepeatReceptor-LikeKinases,LRR-RLKs) | 第19-26页 |
| 1.2.1 BAK1参与的激素调节、抗菌胁迫和细胞死亡等多种生物途径.. | 第21-24页 |
| 1.2.2 除SERKs以外部分LRR-RLKs的研究进展 | 第24-26页 |
| 1.3 BIRs在拟南芥中的功能研究进展 | 第26-29页 |
| 1.3.1 BIR1和BON1同与BAK1相互结合并受其负向调节参与细胞死亡和先天免疫 | 第26-27页 |
| 1.3.2 BIR2作为BAK1的负向调节因子参与植物免疫反应 | 第27-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.2 实验材料的培养 | 第29-30页 |
| 2.2.1 无菌培养 | 第29-30页 |
| 2.3 常用培养基的制备 | 第30-31页 |
| 2.3.1 MS培养基(植物生长)(100mL) | 第30页 |
| 2.3.2 LB培养基(细菌生长)(100mL) | 第30-31页 |
| 2.4 植物小量DNA提取 | 第31-32页 |
| 2.4.1 植物小量DNA快速提取(适用于植物材料的基因型鉴定实验) | 第31页 |
| 2.4.2 CTAB法提取植物全基因组DNA | 第31-32页 |
| 2.5 植物小量RNA提取及反转录 | 第32-34页 |
| 2.5.1 普通材料(植物叶片、幼苗等)——试剂盒提取 | 第32页 |
| 2.5.2 特殊材料(拟南芥果荚、干燥的种子等) | 第32-34页 |
| 2.6 拟南芥植物蛋白质的提取免疫(共)沉淀(co)-IP | 第34-37页 |
| 2.6.1 拟南芥总蛋白的提取 | 第34-36页 |
| 2.6.2 拟南芥膜蛋白提取 | 第36-37页 |
| 2.7 烟草中的瞬时表达 | 第37-41页 |
| 2.7.1 烟草注射 | 第37-39页 |
| 2.7.2 烟草总蛋白的提取 | 第39-40页 |
| 2.7.3 BiFC | 第40-41页 |
| 2.8 免疫共沉淀技术(Co-Immunoprecipitation,co-IP) | 第41-43页 |
| 2.8.1 稀释缓冲液的制备 | 第41-42页 |
| 2.8.2 GFP-IP | 第42页 |
| 2.8.3 FLAG-IP | 第42页 |
| 2.8.4 IP后beads的清洗及IP蛋白的收集 | 第42-43页 |
| 2.9 WesternBlot | 第43-47页 |
| 2.9.1 基本溶液的制备 | 第43-44页 |
| 2.9.2 Tris-GlycinSDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第44-45页 |
| 2.9.3 一抗的制备和洗涤以及对应封闭液的配制 | 第45-46页 |
| 2.9.4 二抗的制备及洗涤 | 第46-47页 |
| 2.10 酵母双杂交(YeastTwo-Hybrid) | 第47-49页 |
| 2.11 RT-PCR和real-timePCR | 第49-51页 |
| 2.11.1 半定量RT-PCR | 第49页 |
| 2.11.2 Real-timePCR | 第49-51页 |
| 2.12 Promoter-GUS转基因材料的构建及染色 | 第51-54页 |
| 2.12.1 Promoter-GUS转基因材料的构建 | 第51页 |
| 2.12.2 转基因材料的GUS染色 | 第51-54页 |
| 第三章 结果分析与讨论 | 第54-79页 |
| 3.1 拟南芥中所有LRR-RLKs基因的克隆及超表达转基因植物筛选 | 第54页 |
| 3.2 拟南芥中BIR3超表达植物莲座变小 | 第54-56页 |
| 3.3 BIR3和BIR2在植物不同生长阶段具有很强的表达 | 第56-58页 |
| 3.4 BIR3超表达转基因材料(BIR3OE)对外源BR不敏感 | 第58-61页 |
| 3.5 BIR3的激酶活性对于其在BR通路中的作用并不重要 | 第61-62页 |
| 3.6 BIR2超表达导致与BIR3OE类似的表型,二者的单突变体对外源BR并未出现区别于野生型的响应反应 | 第62-66页 |
| 3.7 超表达的BIR3能加剧bri1-301和bak1-4的表型 | 第66-68页 |
| 3.8 BIR3与BRI1和BAK1具有相互作用 | 第68-70页 |
| 3.9 BIR3可能通过影响种子体内GA和ABA的激素平衡从而调节种子萌发 | 第70-75页 |
| 3.10 BIR3OE和bir3-1中转录组数据分析 | 第75-79页 |
| 第四章 讨论和展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-93页 |
| 附录 | 第93-119页 |
| 在学期间研究成果 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
