摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 研究现状 | 第13-14页 |
1.2 竹纤维发育 | 第14页 |
1.2.1 竹纤维发育过程 | 第14页 |
1.2.2 植物激素对竹次生发育的调控 | 第14页 |
1.3 植物细胞壁 | 第14-18页 |
1.3.1 植物细胞壁组成 | 第14-17页 |
1.3.2 植物次生发育的调控网络 | 第17-18页 |
1.4 植物转录因子 | 第18-20页 |
1.4.1 植物NAC转录因子 | 第18-19页 |
1.4.2 植物MYB转录因子 | 第19-20页 |
1.5 立题依据及研究意义 | 第20-21页 |
1.6 主要研究内容和技术路线 | 第21-22页 |
1.6.1 研究内容 | 第21页 |
1.6.2 技术路线 | 第21-22页 |
第二章 梁山慈竹DfNACs和DfMYB3转录因子克隆及生物信息学分析 | 第22-40页 |
2.1 材料、试剂和仪器 | 第22-23页 |
2.1.1 材料 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂、菌种及载体 | 第22页 |
2.1.3 实验用主要仪器 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-31页 |
2.2.1 梁山慈竹总RNA的提取 | 第23-24页 |
2.2.2 梁山慈竹cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.2.3 梁山慈竹基因cDNA全长克隆 | 第25-26页 |
2.2.4 基因PCR回收产物和T载体的连接 | 第26-28页 |
2.2.5 大肠杆菌转化 | 第28-30页 |
2.2.6 生物信息学分析 | 第30-31页 |
2.3 结果与分析 | 第31-37页 |
2.3.1 梁山慈竹叶总RNA的提取 | 第31-32页 |
2.3.2 基因PCR扩增 | 第32-33页 |
2.3.3 DfNACs和DfMYB3基因的生物信息学分析 | 第33-37页 |
2.4 讨论与结论 | 第37-40页 |
第三章 梁山慈竹DfNACs和DfMYB3蛋白亚细胞定位 | 第40-47页 |
3.1 材料、试剂和仪器 | 第40页 |
3.1.1 材料 | 第40页 |
3.1.2 主要试剂和载体 | 第40页 |
3.1.3 实验用主要仪器 | 第40页 |
3.2 方法 | 第40-45页 |
3.2.1 亚细胞定位引物设计 | 第40-41页 |
3.2.2 亚细胞定位PCR扩增 | 第41页 |
3.2.3 亚细胞定位PCR产物纯化回收 | 第41页 |
3.2.4 PCR回收产物和pART27-GFP的双酶切与纯化 | 第41-42页 |
3.2.5 重组质粒构建 | 第42页 |
3.2.6 pART27-TFs-GFP大肠杆菌摇菌、菌液PCR和双酶切 | 第42页 |
3.2.7 水稻白化苗原生质体制备及瞬时表达 | 第42-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-47页 |
第四章 酵母单杂系统鉴定梁山慈竹DfNACs和DfMYB3基因转录活性 | 第47-54页 |
4.1 材料和仪器 | 第47页 |
4.1.1 试剂、菌种和载体 | 第47页 |
4.1.2 主要仪器 | 第47页 |
4.2 方法 | 第47-51页 |
4.2.1 载体构建 | 第47-49页 |
4.2.2 大肠杆菌受态转化及阳性菌筛选 | 第49页 |
4.2.3 重组质粒转化酵母感受态EGY | 第49-51页 |
4.3 结果与分析 | 第51-53页 |
4.3.1 转录因子自激活活性 | 第51-53页 |
4.4 讨论与结论 | 第53-54页 |
第五章 梁山慈竹DfNACs基因的调控分析 | 第54-77页 |
5.1 材料、试剂和仪器 | 第54页 |
5.1.1 材料 | 第54页 |
5.1.2 主要试剂、菌种及载体 | 第54页 |
5.1.3 主要仪器 | 第54页 |
5.2 方法 | 第54-68页 |
5.2.1 过表达载体的构建 | 第54-57页 |
5.2.2 毛白杨和毛竹的遗传转化 | 第57-60页 |
5.2.3 毛竹和毛白杨阳性植株的筛选及鉴定 | 第60-63页 |
5.2.4 转基因毛白杨相对表达量 | 第63-64页 |
5.2.5 转基因毛白杨相关指标分析 | 第64-68页 |
5.3 结果和分析 | 第68-76页 |
5.3.1 过表达载体的构建 | 第68页 |
5.3.2 转基因毛白杨和毛竹植株的获得 | 第68-69页 |
5.3.3 毛白杨转基因植株生长发育分析 | 第69-71页 |
5.3.4 毛白杨转基因植株DfNAC2基因相对表达量 | 第71-72页 |
5.3.5 DfNAC2转基因毛白杨茎杆的形态解剖学分析 | 第72-74页 |
5.3.6 DfNAC2转基因毛白杨纤维素含量分析 | 第74-75页 |
5.3.7 DfNAC2转基因毛白杨木质素含量分析 | 第75-76页 |
5.4 讨论与结论 | 第76-77页 |
第六章 DfMYB3转录因子组织表达分析 | 第77-88页 |
6.1 材料、试剂和仪器 | 第77页 |
6.1.1 材料 | 第77页 |
6.1.2 主要试剂、菌种和载体 | 第77页 |
6.1.3 主要仪器 | 第77页 |
6.2 方法 | 第77-84页 |
6.2.1 梁山慈竹DNA提取 | 第77-78页 |
6.2.2 GenomeWalking获得DfpMYB | 第78-81页 |
6.2.3 表达载体的构建 | 第81页 |
6.2.4 DfMYB3转录因子GUS组织染色定位 | 第81-84页 |
6.3 结果与分析 | 第84-86页 |
6.3.1 GenomeWalking克隆产物 | 第84-85页 |
6.3.2 DfMYB3转录因子GUS组织染色定位 | 第85-86页 |
6.4 讨论与结论 | 第86-88页 |
结论 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-100页 |
附件 | 第100-107页 |
攻读硕士学位期间学术科研情况 | 第107-108页 |
致谢 | 第108页 |