| 致谢 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 猪圆环病毒研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1 猪圆环病毒的发现及分类学地位 | 第12页 |
| 1.2 猪圆环病毒的理化及增殖培养特性 | 第12-13页 |
| 1.3 猪圆环病毒的基因序列特征 | 第13-14页 |
| 1.4 猪圆环病毒基因组编码的相关蛋白 | 第14-15页 |
| 1.5 PCV2相关疾病及致病机理 | 第15-17页 |
| 1.6 流行病学 | 第17页 |
| 1.7 猪圆环病毒疫苗研究进展 | 第17-18页 |
| 2 大肠杆菌高密度发酵研究进展 | 第18-21页 |
| 2.1 大肠杆菌高密度发酵影响因素 | 第18-21页 |
| 3 重组蛋白纯化方法的研究进展 | 第21-22页 |
| 3.1 离子交换层析 | 第21-22页 |
| 3.2 疏水层析 | 第22页 |
| 3.3 反向层析 | 第22页 |
| 3.4 亲和层析 | 第22页 |
| 3.5 凝胶过滤层析 | 第22页 |
| 4 病毒样颗粒疫苗研究进展 | 第22-23页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二部分 研究内容 | 第24-54页 |
| 第一章 猪圆环病毒2型Cap蛋白的高密度发酵表达 | 第24-33页 |
| 1 引言 | 第24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-28页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 菌株 | 第25页 |
| 2.3 主要试剂 | 第25页 |
| 2.4 主要溶液和培养基的配制 | 第25-26页 |
| 2.5 PCV2重组Cap蛋白高密度发酵表达 | 第26-27页 |
| 2.6 发酵产物SDS-聚丙烯胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定 | 第27-28页 |
| 2.7 发酵产物Western-Blot鉴定 | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-31页 |
| 3.1 连续三批发酵结果 | 第28页 |
| 3.2 重组蛋白发酵表达结果 | 第28-29页 |
| 3.3 发酵表达重组蛋白的免疫原性 | 第29-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 第二章 重组猪圆环病毒2型Cap蛋白纯化及其VLPs的体外组装 | 第33-44页 |
| 1 引言 | 第33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-36页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.2 主要试剂及相关试剂配制 | 第34页 |
| 2.3 菌体破碎条件探索 | 第34页 |
| 2.4 Cap蛋白硫酸铵沉淀粗纯条件确定 | 第34-35页 |
| 2.5 Cap蛋白硫酸铵粗纯沉淀复溶条件摸索 | 第35页 |
| 2.6 Cap蛋白阳离子交换层析条件探索 | 第35-36页 |
| 2.7 PCV2病毒样颗粒组装探索 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-42页 |
| 3.1 菌体破碎条件确定 | 第36-37页 |
| 3.2 Cap蛋白硫酸铵沉淀粗纯条件确定 | 第37-38页 |
| 3.3 Cap蛋白硫酸铵粗纯沉淀复溶条件确定 | 第38-39页 |
| 3.4 Cap蛋白阳离子交换层析条件确定 | 第39-42页 |
| 3.5 PCV2病毒样颗粒组装条件摸索 | 第42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 重组猪圆环病毒2型Cap蛋白体外稳定性研究 | 第44-48页 |
| 1 引言 | 第44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-45页 |
| 2.1 主要试剂与仪器 | 第44页 |
| 2.2 双抗夹心ELISA方法的建立 | 第44页 |
| 2.3 重组Cap蛋白稳定性研究 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-46页 |
| 3.1 双抗夹心ELISA反应体系的确定 | 第45页 |
| 3.2 重组Cap蛋白稳定性试验 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 猪圆环病毒2型病毒样颗粒性疫苗的动物免疫评价 | 第48-54页 |
| 1 引言 | 第48页 |
| 2 材料与方法 | 第48-49页 |
| 2.1 实验动物 | 第48页 |
| 2.2 主要试剂和仪器 | 第48页 |
| 2.3 疫苗配制方法 | 第48页 |
| 2.4 猪圆环病毒2型病毒样颗粒性疫苗小鼠免疫评价 | 第48-49页 |
| 2.5 猪圆环病毒2型病毒样颗粒性疫苗临床试验 | 第49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-52页 |
| 3.1 猪圆环病毒2型病毒样颗粒性疫苗小鼠免疫评价 | 第49-51页 |
| 3.2 仔猪免疫临床试验评价 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 全文总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
