摘要 | 第4-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
目录 | 第15-18页 |
前言 | 第18-20页 |
实验技术路线图 | 第20-23页 |
第一章 自杀基因VP3对鼻咽癌CNE-2细胞生长、增殖及凋亡的影响 | 第23-41页 |
1.1 材料 | 第23-27页 |
1.1.1 细胞株及培养条件 | 第23页 |
1.1.2 VP3表达质粒 | 第23页 |
1.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
1.1.4 主要仪器 | 第24-25页 |
1.1.5 Western blotting主要试剂配制 | 第25-27页 |
1.2 实验方法 | 第27-34页 |
1.2.1 细胞培养 | 第27页 |
1.2.2 细胞冻存 | 第27页 |
1.2.3 细胞复苏 | 第27-28页 |
1.2.4 细胞的传代培养 | 第28页 |
1.2.5 质粒稳定转染鼻咽癌细胞 | 第28-29页 |
1.2.6 RT-PCR实施步骤 | 第29-31页 |
1.2.7 细胞总蛋白提取 | 第31页 |
1.2.8 细胞总蛋白浓度的测定 | 第31页 |
1.2.9 Western Blotting的实施步骤 | 第31-33页 |
1.2.10 CCK-8法检测细胞存活率 | 第33页 |
1.2.11 Annexin V检测细胞凋亡 | 第33-34页 |
1.2.12 统计学分析 | 第34页 |
1.3 实验结果 | 第34-37页 |
1.3.1 PcDNA3.1(-)VP3-Myc(PVP3)及对照空载体质粒稳定转染鼻咽癌CNE-2细胞的转染效率 | 第34页 |
1.3.2 各组细胞VP3 mRNA及蛋白表达情况 | 第34页 |
1.3.3 VP3对CNE-2细胞存活率的影响 | 第34-35页 |
1.3.4 VP3对CNE-2细胞凋亡的影响 | 第35-37页 |
1.4 讨论 | 第37-40页 |
1.5 结论 | 第40-41页 |
第二章 光动力治疗联合VP3对鼻咽癌CNE-2细胞的体外实验研究 | 第41-49页 |
2.1 材料 | 第41-42页 |
2.1.1 细胞株及培养条件 | 第41页 |
2.1.2 主要试剂 | 第41页 |
2.1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
2.2 实验方法 | 第42-44页 |
2.2.1 细胞培养 | 第42页 |
2.2.2 光敏剂预备 | 第42页 |
2.2.3 细胞处理 | 第42页 |
2.2.4 细胞种板 | 第42-43页 |
2.2.5 细胞光动力治疗 | 第43页 |
2.2.6 CCK-8法检测细胞存活率 | 第43页 |
2.2.7 Annexin V检测细胞凋亡 | 第43-44页 |
2.2.8 Tunnel法检测细胞凋亡 | 第44页 |
2.2.9 统计学分析 | 第44页 |
2.3 实验结果 | 第44-46页 |
2.3.1 不同激光能量密度对CNE-2细胞存活率的影响 | 第44页 |
2.3.2 不同激光能量密度对CNE-2细胞凋亡的影响 | 第44-46页 |
2.4 讨论 | 第46-48页 |
2.5 结论 | 第48-49页 |
第三章 光动力治疗联合VP3对鼻咽癌CNE-2细胞裸鼠移植瘤作用的实验研究 | 第49-64页 |
3.1 材料 | 第49-50页 |
3.1.1 细胞株及培养条件 | 第49页 |
3.1.2 实验动物 | 第49页 |
3.1.3 主要试剂 | 第49-50页 |
3.1.4 主要仪器 | 第50页 |
3.2 实验方法 | 第50-54页 |
3.2.1 细胞培养 | 第50页 |
3.2.2 光敏剂预备 | 第50页 |
3.2.3 细胞处理 | 第50-51页 |
3.2.4 裸鼠人鼻咽癌移植瘤模型的制备 | 第51页 |
3.2.5 裸鼠人鼻咽癌移植瘤的光动力处理 | 第51页 |
3.2.6 病理学检查 | 第51-53页 |
3.2.7 免疫组化 | 第53-54页 |
3.2.8 统计学分析 | 第54页 |
3.3 实验结果 | 第54-61页 |
3.3.1 裸鼠人鼻咽癌移植瘤模型的建立 | 第54页 |
3.3.2 VP3对裸鼠人鼻咽癌移植瘤肿瘤的影响 | 第54页 |
3.3.3 PDT对裸鼠人鼻咽癌移植瘤肿瘤的影响 | 第54页 |
3.3.4 肿瘤体积比较 | 第54-55页 |
3.3.5 移植瘤重量比较 | 第55页 |
3.3.6 各组移植瘤HE染色比较 | 第55页 |
3.3.7 免疫组化检测各组apoptin蛋白表达情况 | 第55-61页 |
3.4 讨论 | 第61-63页 |
3.6 小结 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
综述 | 第69-92页 |
参考文献 | 第80-92页 |
博士期间学术成果 | 第92-93页 |
致谢 | 第93页 |