| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第11-14页 |
| 缩略词简表 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-23页 |
| 第一部分 Chi-29b嵌合体在卵巢上皮性癌细胞中的抗癌作用 | 第23-56页 |
| 引言 | 第23-25页 |
| 材料与方法 | 第25-47页 |
| 1.1 实验试剂和材料 | 第25-29页 |
| 1.1.1 实验试剂 | 第25-27页 |
| 1.1.2 实验器材 | 第27-28页 |
| 1.1.3 试剂配制 | 第28-29页 |
| 1.2 实验方法 | 第29-47页 |
| 1.2.1 细胞培养用品的准备 | 第29-30页 |
| 1.2.2 OVCAR-3细胞的培养 | 第30页 |
| 1.2.3 OVCAR-3细胞的复苏 | 第30-31页 |
| 1.2.4 OVCAR-3细胞的传代 | 第31页 |
| 1.2.5 OVCAR-3细胞的冻存 | 第31-32页 |
| 1.2.6 MUC1适体-miRNA嵌合体(Chi-29b)的设计 | 第32页 |
| 1.2.7 对照组嵌合体(Chi-NT)的设计 | 第32-33页 |
| 1.2.8 Chi-29b和Chi-NT的体外消化 | 第33页 |
| 1.2.9 流式细胞仪检测 | 第33-34页 |
| 1.2.10 嵌合体的细胞内化检测 | 第34页 |
| 1.2.11 OVCAR-3细胞中转染miR-29b | 第34-35页 |
| 1.2.12 各组OVCAR-3细胞中PTEN mRNA表达的RT-PCR分析 | 第35-38页 |
| 1.2.13 免疫印迹 | 第38-40页 |
| 1.2.14 甲基化检测 | 第40-46页 |
| 1.2.15 凋亡细胞的Hoechst染色 | 第46页 |
| 1.2.16 统计分析 | 第46-47页 |
| 结果 | 第47-52页 |
| 1.3 MUC1适体-miRNA嵌合体(Chi-29b)的鉴别 | 第47-52页 |
| 1.3.1 Chi-29b对Dnmt蛋白质表达的作用 | 第48-50页 |
| 1.3.2 Chi-29b对PTEN甲基化和PTEN基因表达作用 | 第50-51页 |
| 1.3.3 细胞凋亡检测 | 第51-52页 |
| 讨论 | 第52-55页 |
| 小结 | 第55-56页 |
| 第二部分 卵巢癌中Chi-29b嵌合体的抗化疗耐药效应及机制 | 第56-88页 |
| 引言 | 第56-57页 |
| 材料与方法 | 第57-75页 |
| 2.1 主要试剂与材料 | 第57-58页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第57-58页 |
| 2.1.2 实验器材 | 第58页 |
| 2.2 实验方法 | 第58-75页 |
| 2.2.1 细胞培养用品的准备 | 第58-59页 |
| 2.2.2 OVCA420细胞培养 | 第59页 |
| 2.2.3 OVCA420细胞的复苏 | 第59页 |
| 2.2.4 OVCA420细胞的传代 | 第59-60页 |
| 2.2.5 OVCA420细胞的冻存 | 第60-61页 |
| 2.2.6 适体-miRNA嵌合体的准备 | 第61页 |
| 2.2.7 卵巢癌细胞株及耐药细胞株的建立 | 第61-62页 |
| 2.2.8 MTT法检测细胞增殖 | 第62页 |
| 2.2.9 动物模型的建立 | 第62-63页 |
| 2.2.10 肿瘤组织中ALDH1+和ALDH1-细胞亚群的分离 | 第63-64页 |
| 2.2.11 甲基化检测 | 第64-67页 |
| 2.2.12 Real-time RT-PCR检测PTEN及ALDH1 mRNA表达水平 | 第67-70页 |
| 2.2.13 TUNEL染色 | 第70-71页 |
| 2.2.14 Western blot | 第71-75页 |
| 结果 | 第75-84页 |
| 2.3 异种移植的卵巢癌模型中MUC1适体miR-29b嵌合体抑制了肿瘤生长 | 第75-84页 |
| 2.3.1 Chi-29b在OVCAR-3和OVCA420肿瘤细胞中移植效应的机制不相同 | 第76-78页 |
| 2.3.2 chi-29b抑制OVCAR-3耐药细胞的增殖和异种移植的OVCAR-3-taxol肿瘤生长 | 第78-80页 |
| 2.3.3 OVCAR-3-taxol细胞中对紫杉醇化疗耐药是由ALDH1阳性细胞引起 | 第80-81页 |
| 2.3.4 chi-29b注射是通过PTEN信号减少ALDH1+OVCAR-3细胞 | 第81-82页 |
| 2.3.5 chi-29b注射抑制了miR-29b靶基因的表达 | 第82-84页 |
| 讨论 | 第84-87页 |
| 小结 | 第87-88页 |
| 第三部分 全文结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-97页 |
| 综述 | 第97-122页 |
| 参考文献 | 第108-122页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123页 |
