| CONTENTS | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 鸡坏死性肠炎 | 第11-15页 |
| 1.1.1 病原及相关毒力因子 | 第11-13页 |
| 1.1.2 鸡坏死性肠炎诱发因素 | 第13-14页 |
| 1.1.3 鸡坏死性肠炎流行特点 | 第14页 |
| 1.1.4 鸡坏死性肠炎的临床症状 | 第14-15页 |
| 1.1.5 鸡坏死性肠炎病理变化 | 第15页 |
| 1.2 鸡坏死性肠炎疫苗的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 类毒素疫苗 | 第15页 |
| 1.2.2 弱毒疫苗 | 第15-16页 |
| 1.2.3 基因工程疫苗 | 第16-18页 |
| 1.3 乳酸菌作为口服疫苗传递载体研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 乳酸菌对机体免疫作用的影响 | 第18-19页 |
| 1.3.2 乳酸菌作为口服疫苗传递载体的应用前景 | 第19-20页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 培养基和主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第21-24页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.1 表达产气荚膜梭菌plc和NetB蛋白重组质粒的构建 | 第24-28页 |
| 2.2.2 重组质粒pSIP409-plc和pSIP409-NetB鉴定 | 第28页 |
| 2.2.3 重组质粒pSIP409-plc和pSIP409-NetB在大肠杆菌中诱导表达 | 第28-30页 |
| 2.2.4 重组质粒pSIP409-plc和pSIP409-NetB在植物乳杆菌中诱导表达 | 第30-32页 |
| 2.2.5 产气荚膜梭菌plc和NetB基因重组植物乳杆菌的免疫保护试验 | 第32-37页 |
| 3 结果 | 第37-82页 |
| 3.1 PCR扩增plc基因与NetB基因 | 第37页 |
| 3.2 重组质粒pSIP409-plc和pSIP409-NetB鉴定 | 第37-39页 |
| 3.2.1 重组质粒pSIP409-plc和pSIP409-NetB PCR鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.2 重组质粒pSIP409-plc和pSIP409-NetB双酶切鉴定 | 第38页 |
| 3.2.3 重组质粒pSIP409-plc和pSIP409-NetB序列测定 | 第38-39页 |
| 3.3 重组蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39-40页 |
| 3.3.1 重组plc蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39页 |
| 3.3.2 重组NetB蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第39-40页 |
| 3.4 重组蛋白在植物乳杆菌中的诱导表达 | 第40-42页 |
| 3.4.1 表达plc/NetB重组植物乳杆菌PCR鉴定 | 第40页 |
| 3.4.2 表达plc/NetB重组植物乳杆菌Western Blot鉴定 | 第40-41页 |
| 3.4.3 表达plc/NetB重组植物乳杆菌间接免疫荧光鉴定 | 第41-42页 |
| 3.5 重组植物乳杆菌的免疫保护效果 | 第42-82页 |
| 3.5.1 重组植物乳杆菌在免疫鸡肠道定植情况 | 第42-44页 |
| 3.5.2 雏鸡免疫后抗产气荚膜梭菌plc、NetB抗体动态变化 | 第44-54页 |
| 3.5.3 雏鸡攻菌后抗产气荚膜梭菌plc、NetB抗体动态变化 | 第54-64页 |
| 3.5.4 重组植物乳杆菌免疫雏鸡攻菌后细菌计数 | 第64-66页 |
| 3.5.5 重组植物乳杆菌免疫雏鸡攻菌后病理剖检变化 | 第66-68页 |
| 3.5.6 重组植物乳杆菌免疫雏鸡攻菌后病理组织学变化 | 第68-75页 |
| 3.5.7 重组植物乳杆菌免疫雏鸡攻菌后肠道病变评分 | 第75-76页 |
| 3.5.8 重组物乳杆菌免疫及攻菌对雏鸡体重的影响 | 第76-78页 |
| 3.5.9 重组植物乳杆菌免疫菌对雏鸡免疫器官发育的影响 | 第78-82页 |
| 4 讨论 | 第82-86页 |
| 4.1 重组质粒pSIP409-plc和pSIP409-NetB的构建 | 第82页 |
| 4.2 重组蛋白plc与NetB在大肠杆菌和乳酸菌中的表达 | 第82-83页 |
| 4.3 重组植物乳标菌抗产气荚膜梭菌感染免疫效果 | 第83-86页 |
| 4.3.1 免疫雏鸡攻凶后产气荚膜梭菌凶plc、NetB抗体动态变化 | 第83-84页 |
| 4.3.2 免疫鸡攻菌后机体病理损伤、细菌定植变化 | 第84-86页 |
| 5 结论 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-95页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第95页 |
