| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略语索引 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-16页 |
| 1.1 概述 | 第11页 |
| 1.2. 传统生化方法 | 第11-12页 |
| 1.3 分子生物学方法 | 第12-13页 |
| 1.3.1 常规 PCR 检测 | 第12页 |
| 1.3.2 实时荧光定量 PCR | 第12页 |
| 1.3.3 LAMP 检测 | 第12-13页 |
| 1.3.4 基因芯片技术 | 第13页 |
| 1.4 免疫学方法 | 第13-15页 |
| 1.4.1 酶联免疫技术 | 第13-14页 |
| 1.4.2 免疫层析试纸条 | 第14页 |
| 1.4.3 核酸试纸条 | 第14-15页 |
| 1.5 高分辨熔解曲线 | 第15页 |
| 1.6 选题的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 克罗诺杆菌核酸试纸条的建立 | 第16-27页 |
| 摘要 | 第16页 |
| 2.1 前言 | 第16-17页 |
| 2.2 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第17页 |
| 2.2.2 主要试剂和仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.2.3 相关试剂及培养基配制 | 第18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.3.1 核酸探针特异性检测 | 第18-19页 |
| 2.3.2 胶体金制备 | 第19页 |
| 2.3.3 胶体金偶联链霉亲和素 | 第19页 |
| 2.3.4 生物素偶联 BSA | 第19页 |
| 2.3.5 核酸试纸条制备及组装 | 第19-20页 |
| 2.3.6 核酸探针浓度优化 | 第20页 |
| 2.3.7 核酸试纸条评价 | 第20-22页 |
| 2.4 实验结果 | 第22-26页 |
| 2.4.1 核酸探针浓度优化及特异性检测结果 | 第22-23页 |
| 2.4.2 纯培养物中克罗诺杆菌检测结果 | 第23-24页 |
| 2.4.3 奶粉中克罗诺杆菌检测结果 | 第24-25页 |
| 2.4.4 模拟实际样本检测结果 | 第25-26页 |
| 2.5 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 副溶血弧菌免疫层析试纸条的建立 | 第27-35页 |
| 摘要 | 第27页 |
| 3.1 前言 | 第27-28页 |
| 3.2 实验材料 | 第28页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第28页 |
| 3.2.2 主要仪器和设备 | 第28页 |
| 3.2.3 相关试剂及培养基配置 | 第28页 |
| 3.3 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.3.1 多克隆抗体与单克隆抗体配对实验 | 第28-29页 |
| 3.3.2 胶体金的制备 | 第29页 |
| 3.3.3 胶体金标记抗体制备 | 第29页 |
| 3.3.4 胶体金试纸条制备及组装 | 第29页 |
| 3.3.5 金标二抗显色增强实验 | 第29页 |
| 3.3.6 胶体金试纸条的评价 | 第29-30页 |
| 3.4 实验结果 | 第30-34页 |
| 3.4.1 多克隆抗体和单克隆抗体配对结果 | 第30-31页 |
| 3.4.2 金标抗体显色增强实验结果 | 第31-32页 |
| 3.4.3 副溶血弧菌免疫层析试纸条灵敏度 | 第32-34页 |
| 3.5 讨论 | 第34-35页 |
| 第四章 高分辨熔解曲线用于菌群种类初步分析 | 第35-43页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 4.1 前言 | 第35-36页 |
| 4.2 实验材料 | 第36页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第36页 |
| 4.2.2 主要仪器和设备 | 第36页 |
| 4.2.3 相关试剂及培养基配置 | 第36页 |
| 4.3 实验方法 | 第36-38页 |
| 4.3.1 菌落 PCR | 第36页 |
| 4.3.2 变性剂对熔解曲线 Tm 的影响 | 第36-37页 |
| 4.3.3 熔解曲线和变性梯度凝胶电泳肠道菌群分析 | 第37-38页 |
| 4.4 实验结果 | 第38-41页 |
| 4.4.1 尿素对熔解曲线 Tm 值的影响 | 第38-39页 |
| 4.4.2 甲酰胺对熔解曲线 Tm 值的影响 | 第39页 |
| 4.4.3 盐酸胍对熔解曲线 Tm 值的影响 | 第39-40页 |
| 4.4.4 熔解曲线对肠道菌群分析结果 | 第40-41页 |
| 4.5 讨论 | 第41-43页 |
| 第五章 结论与展望 | 第43-45页 |
| 5.1 结论 | 第43-44页 |
| 5.1.1 克罗诺杆菌核酸试纸条制备 | 第43页 |
| 5.1.2 副溶血弧菌免疫层析试纸条制备 | 第43页 |
| 5.1.3 高分辨熔解曲线用于菌群种类分析 | 第43-44页 |
| 5.2 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录A 实验菌株 | 第50-52页 |
| 附录B 实验试剂 | 第52-54页 |
| 附录C 实验仪器设备 | 第54-55页 |
| 附录D 常用试剂的配制 | 第55-56页 |
| 附录E 培养基的配制 | 第56-57页 |
| 个人介绍 | 第57页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第57页 |